Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C

Share Tweet Pin it

Hepatitt er en alvorlig sykdom som har mange årsaker. Grunnlaget for utviklingen er direkte eller indirekte skade på leveren. Med tanke på dens betydning for hele organismen, kan man bare gjette hvor vanskelig patologien er. I denne artikkelen vil vi nærmere undersøke funksjonene i kurset og laboratoriediagnosen av hepatitt C.

Årsaken til sykdommen er et virusmiddel som refererer til RNA-holdige patogener. Den har en særegen egenskap - evnen til å mutere, det vil si å forandre strukturen. På grunn av dette unngår infeksjonen fra angrepet av immunsystemet og fører i de fleste tilfeller til kronisk betennelse i leveren.

Gitt eksistensen av forskjellige undertyper av viruset, bør valget av medisiner være basert på resultatene av genotyping. Til tross for en lang studie av sykdommen og strukturen av HCV, har det ennå ikke vært mulig å utvikle en spesifikk vaksine for sykdommen.

Vanskelighetene med tidlig diagnose ligger i det asymptomatiske løpet av hepatitt, noe som fører til at en person besøker en lege på cirrhosisstadiet. For å oppdage sykdommen i tide, er det nødvendig med vanlige medisinske undersøkelser. Bare ved laboratorietesting av blod er det mulig å oppdage HCV og forhindre forurensning av andre. Faktum er at transportøren av infeksjonen i lang tid ikke kan gjette om patologien og fortsette å overføre viruset til friske mennesker.

Fremgangsmåter for overføring

I de fleste tilfeller sprer viruset gjennom blodet, da det inneholder den høyeste konsentrasjonen av patogene stoffer. Dermed overføres infeksjonen:

  • med hemodialyse;
  • med en infisert nål;
  • i ferd med å kjempe, når huden er skadet, og blodkontakt oppstår;
  • med blodtransfusjon (blodtransfusjon).

Sannsynligheten for infeksjon under intimitet er ubetydelig, da sæd og vaginal utslipp inneholder en liten mengde patogener. Risikoen for infeksjon økes betydelig i strid med integriteten til slimhinnen i kjønnsorganene. Dette observeres med aggressiv og analsex.

Når det gjelder vertikal modus for overføring, utføres den i arbeidsprosessen. I fosterets svangerskapstid kan patogen ikke trenge gjennom moderkaken til embryoet. Ved naturlig fødsel blir det patogene stoffet overført til barnet når huden er skadet, når kontakt med moderens blod blir observert.

Etter patogenes inntrengning i en sunn organisme begynner syntesen av antistoffer, som er beskyttelse mot infeksjon og tilhører immunstrukturer. De er funnet i den første studien av en person som bruker ELISA.

En polymerasekjedereaksjon utføres for å bekrefte pasientens diagnose. Det er en analyse av det genetiske materialet til et patogent middel og bestemmelsen av viral belastning.

Laboratoriediagnose av hepatitt C

Laboratoriediagnose starter med enzymimmunoassay. Hovedoppgaven er å oppdage antistoffer produsert mot patogenet. Dens effektivitet er nesten 95%. Takket være denne undersøkelsen er det mulig å identifisere virusbæreren i det prekliniske stadiet og sende det til videre undersøkelse.

En kvalitativ analyse av ELISA indikerer tilstedeværelse eller fravær av immunglobuliner i pasientens blod. Resultatet kan være "positivt" eller "negativt". Etter å ha mottatt det første svaret, blir personen sendt til neste undersøkelse - PCR. Prisen avhenger av kvaliteten på reagensene og laboratoriet. Kostnaden for polymerasekjedereaksjonen kan nå 4000 rubler.

PCR-funksjoner

Ved hjelp av en polymerasekjedereaksjon, tillater selv en liten mengde biologisk materiale oss å estimere virusbelastningen i blodet, det vil si å beregne konsentrasjonen av patogener i en milliliter væske.

Med forekomsten av PCR har diagnosen hepatitt blitt mye lettere. Analysen gjør det mulig å identifisere HCV RNA, for å etablere stadium av den smittsomme prosessen og infektiøsiteten av virusbæreren.

Det finnes flere typer genetisk diagnose:

  1. Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C - bekrefter tilstedeværelse eller fravær av HCV i emnetes blod:
  2. kvantitativ, der du kan beregne konsentrasjonen av virus og etablere scenen av sykdommen. Resultatet er gitt i IE / ml eller kopier / ml (avhengig av laboratoriet);
  3. genotyping - nødvendig for å bestemme genotypen av HCV. Dette kreves for det nøyaktige utvalg av stoffer som vil være mest effektive i dette tilfellet. Analyse indikerer indirekte alvorlighetsgraden av den patologiske prosessen i leveren. Således, med den tredje genotypen av patogenet, observeres steatosis oftest, grunnlaget for dette er akkumulering av fett i hepatocytter (dets celler). I tillegg påvirker typen av virus utfallet og varigheten av terapeutisk kurs.

Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C

Først og fremst blir biologisk materiale undersøkt i laboratoriet for tilstedeværelse av HCV RNA. Det er viktig å huske at en kvalitativ analyse av hepatitt C har et visst følsomhetsnivå, og derfor kan det ikke alltid gi riktig svar. I dette tilfellet anbefales det å gjennomføre laboratoriediagnostikk ved hjelp av andre reagenser.

For å oppnå pålitelige resultater, bør testsystemer med følsomhet på minst 50 IE / ml brukes.

Det diagnostiske resultatet kan enten være "positivt" eller "negativt". Hvis patogenet ikke er funnet i blodet, er studien fullført. Hvis det oppdages et patogent middel i en prøve, kvantifiseres en viral belastning.

En falsk-negativ respons oppnås når en teknologisk prosess brytes, for eksempel, aktive komponenter som undertrykker byggingen av kopier av patogenet, kommer inn i mediet. Dermed er det ikke mulig å vise et ekte blodbilde, og derfor er ikke en persons infeksjon diagnostisert.

Et falskt positivt resultat kan oppnås hvis røret for innsamling av biologisk materiale, samt miljøet for studien, var forurenset. I tillegg er slik analyserespons mulig med blandede infeksjoner, når leveren er påvirket av flere virus, for eksempel hepatitt C og D.

Indikasjoner for kvalitativ forskning

Legen kan foreskrive en pasient en kvalitativ studie om identifisering av RNA i hepatitt C-viruset:

  • ved mottak av et positivt eller tvilsomt enzymimmunoassayrespons;
  • for bekreftelse av diagnosen;
  • bestemme viral belastning;
  • sette scenen av sykdommen;
  • diagnose av blandet infeksjon. Hepatitt C infiserer ofte leveren samtidig med "D" -viruset;
  • Bestemmelse av terapeutisk taktikk under hensyntagen til kausjonsmiddelets genotype;
  • vurdere dynamikken i endringer under behandling med antivirale medisiner.

Fordelene ved polymerasekjedereaksjonen inkluderer:

  1. høy følsomhet av teknikken, som gjør det mulig å fastslå faktumet av infeksjon i det prekliniske stadium;
  2. identifisering av patogenets genetiske materiale, og ikke antistoffer mot det;
  3. muligheten for å etablere en subtype av et patogent middel;
  4. høy hastighet på diagnostikk, da det ikke krever såing av materialet på næringsmediet, og det er nok å bruke spesifikke testsystemer. En person mottar resultatet etter 5 timer;
  5. allsidighet. Analysen tillater å identifisere ethvert genetisk materiale (RNA, DNA). På grunn av dette kan legen bekrefte hepatitt C og andre typer sykdommen (B);
  6. evnen til å oppdage latent infeksjon.

Kvantitativ forskning

I studien av blod ved hjelp av polymerasekjeden kan reaksjonen beregne antall patogener i et fast volum biologisk materiale. Indikatoren er presentert i IE / ml. Gjennom analyse er det mulig å bestemme graden av smitte av pasienten, bestemme stadium av den smittefarlige prosessen, og også vurdere effektiviteten av medisinering.

På grunnlag av PCR bestemmer spesialisten hvilke doser medikamenter som kan blokkere reproduksjon av patogener. I tillegg bestemmes varigheten av antiviral behandling og prognose for livet. Det er viktig å huske at testsystemene har høy følsomhet, slik at metoden gjør det mulig å bekrefte infeksjon av en person i det prekliniske stadiet.

genotyping

Gitt patogenes evne til å mutere, er genotypen nødvendig for å bestemme behandlingens taktikk og valg av antivirale legemidler. For eksempel varer behandling av hepatitt B HCV 1 48 uker, med en positiv utvikling observert i bare 60% av tilfellene. Genotyper 2 og 3 har en mer gunstig prognose. Antivirale legemidler er foreskrevet i 8 måneder, og deres effektivitet når 85%.

Ifølge statistikk er HCV 1, 2 og 3 i de fleste tilfeller registrert i Russland.

Når deklarerer en laboratorietest, kan dette svaret angis - "ikke skrevet". Dette betyr at et virus sirkulerer i pasientens sirkulasjonssystem og ikke kan gjenkjennes av testsystemet. Resultatet av analysen i dette tilfellet indikerer at patogenet ikke er typisk for et gitt geografisk område.

Hvordan får du pålitelige resultater?

For at en kvalitativ studie av PCR for å oppdage RNA av det fremkallende middel av hepatitt C viste de riktige resultatene, er det nødvendig å observere kravene til å forberede laboratoriediagnostikk:

  1. blodprøvetaking utføres på tom mage, og det "sultne" gapet bør ikke være kortere enn 8 timer;
  2. To dager før studien anbefales det å slutte å drikke alkoholholdige drikkevarer og forlate krydret, fett og røkt mat;
  3. Avbryt introduksjonen av legemidler som reduserer blodproppene, for eksempel heparin. Hvis disse medisinene er foreskrevet av helsehensyn, må du varsle legen. I tillegg bør spesialisten være oppmerksom på inntak av andre legemidler som kan påvirke resultatet av laboratorieforskning;
  4. På tærskelen til samlingen av biologisk materiale, bør ikke fysioterapeutiske prosedyrer utføres og ikke utsettes for alvorlig fysisk anstrengelse.

Resultatene av analysen kan påvirkes ikke bare av den personen som donerer blod, men også av andre faktorer, nemlig:

  • dårlig kvalitet blod prøvetaking;
  • manglende overholdelse av anbefalinger om transport av biologisk materiale
  • Utilstrekkelig opplæring av laboratoriearbeidere;
  • manglende overholdelse av forskningsteknikken;
  • innføring av antikoagulantia (heparin) på kvelden før blodprøvetaking. Denne gruppen medikamenter reduserer koagulering, og derved reduserer arbeidet med reagenser.

I ulike laboratorier kan det diagnostiske svaret avvike noe, men disse feilene påvirker ikke det endelige resultatet av studien.

Spesiell oppmerksomhet er lagt til hvilke typer testsystemer som brukes i laboratoriet. Ofte er det gitt fortrinnsvis reagenser med høy følsomhet. Dette er viktig for pasienter med lav viral belastning, da det er vanskelig å oppdage.

Hvor ofte utføres en laboratorietest?

Primær polymerasekjedereaksjon utføres hos mennesker som har blitt påvist ved immunoassay-antistoffer mot patogenet av hepatitt. I dette tilfellet er det tildelt å bekrefte det faktum at infeksjon av en person og etablere scenen av sykdommen. I tillegg tillater analysen å bestemme virus subtypen, noe som er spesielt viktig for valg av medisiner.

Neste periode for obligatorisk laboratorietesting er 3 måneder fra starten av antiviral terapi. Diagnostikk gjør det mulig å evaluere effektiviteten av medisiner, justere dosen eller erstatte dem.

I tillegg til grunnleggende tester kan PCR i tillegg utføres ved 4 og 24 uker fra starten av behandlingen. Positiv prognose av sykdommen er bekreftet av en reduksjon i viral belastning etter tre måneders behandling. For eksempel bør den reduseres fra 1 million IE / ml til flere hundre tusen.

Hvis konsentrasjonen av patogene stoffer i blodet forblir på samme nivå eller øker noe, indikerer dette ineffektiviteten av antivirale legemidler og krever erstatning. Ved bruk av PCR ved slutten av behandlingen, er det mulig å bekrefte pasientens utvinning.

For å korrekt tolke resultatene av laboratoriediagnostikk, er det nødvendig med konsultasjon av en hepatolog eller smittsom sykdom. Gitt den høye frekvensen av falske responser i ELISA, brukes analysen utelukkende til primær screening. For en grundigere undersøkelse av den anvendte polymerasekjedereaksjonen.

Tror du fortsatt at herding av hepatitt C er vanskelig?

Dømmer av det faktum at du leser disse linjene nå - seieren i kampen mot leversykdommer er ikke på din side. Og har du allerede tenkt på interferonbehandling? Det er forståelig, fordi hepatitt C er en svært alvorlig sykdom, fordi riktig funksjon av leveren er nøkkelen til helse og velvære. Kvalme og oppkast, gulaktig eller gråaktig hud, bitter smak i munnen, mørk urin og diaré. Alle disse symptomene er kjent for deg førstehånds.

Men kanskje er det mer riktig å behandle ikke effekten, men årsaken? For behandlingen anbefaler vi at du bruker moderne narkotika - sofosbuvir og daclatasvir. Les mer >>

Hepatitt C markører og tolkning av HCV RNA kvantitasjonsresultater

Nylig har søket etter "kvantitativ analyse av hepatitt med avkodning" i økende grad oppstått i søkemotorer av Internett-ressurser.

Faktisk er hepatittviruset spredt og farlig, sykdommen påvirker leveren. Navnet kommer fra lat. hepatitt er betennelse i leveren. Infeksjon oppstår gjennom blodet eller seksuelt. Oftere er voksne i alderen 25 til 50 år.

Det er flere typer av denne sykdommen. Hepatitt C har ikke en klar alvorlighetsgrad, men i 40-70% av tilfellene blir det kronisk, kan forårsake skrumplever og kreft. Denne sykdommen krever nøyaktig diagnose og tolkning av dataene, for hvilke teknikker som er blitt utviklet. En av dem er RNA-analyse av HCV RNA ved PCR.

RNA analyse av HCV RNA ved PCR

RNA (ribonukleinsyre) er en type makromolekyl, en av komponentene i en levende celle. RNA er ansvarlig for koding av genetisk informasjon. Hepatitt C-viruset inneholder et RNA-molekyl og har en tendens til å mutere. 6 av dens undertyper er kjent, så vel som mange undertyper.

Sykdommen i kronisk stadium fører til fibrose i leveren - bindevev vokser, organets struktur blir gradvis forstyrret. Fibrose er egnet til rettidig behandling, siden leveren ikke har gjennomgått destruktive prosesser. I motsetning til cirrhosis, alvorlig irreversibel leversykdom der fibrose kan utvikles uten å ta de nødvendige tiltakene i tide.

En person med mistanke om å ha et hepatitt B-virus bestemmes av antistoffer mot det. Hvis de ikke er, er sykdommen utelukket, hvis de er tilgjengelige, går de til PCR (polymerasekjedereaksjonen) metoden. I molekylærbiologi er det eksperimentell, men opptar et ledende sted blant metodene for å diagnostisere smittsomme sykdommer. Med den kan du øke konsentrasjonen av molekylfragmenter i prøven betydelig. 10 dager etter infeksjon, er RNA allerede mulig å bestemme i blodet.

Denne metoden er den eneste som kan oppdage sykdommen i sine tidlige stadier. På andre måter (for eksempel ved biokjemiske blodprøver) kan dette ikke gjøres, siden leveren ikke er påvirket ennå.

Metoden ble oppdaget i 1993 av biokjemiker Kerry Mullis, som han vant Nobelprisen. PCR var et gjennombrudd i medisin og vitenskap, da det ble tillatt å raskt og nøyaktig identifisere infeksjoner i blodet og andre biologiske materialer av mennesker. Metoden har med andre ord akselerert utviklingen av diagnosen infeksjonssykdommer.

RNA analyse av HCV RNA ved PCR er effektiv av følgende årsaker:

  • har god følsomhet - selv en liten mengde virus i blodet oppdages;
  • selve viruset er bestemt, ikke biprodukter som er opprettet av det;
  • Typen av patogen er bestemt.

Forskjeller i kvantitativ analyse av HCV RNA fra kvalitativ

PCR-metoden inkluderer to hovedveier for å studere det biologiske materialet for søket etter hepatitt C-viruset:

Disse studiene har forskjellige oppgaver.

En kvalitativ analyse av hepatitt ved dekoding bekrefter tilstedeværelsen av viruset etter at antistoffer mot sykdommen allerede er funnet i blodet. Hvis studien ga et positivt resultat, så oppdages sykdommen. Med andre ord er en person smittet. Hvis det oppnås et negativt resultat, betyr dette at personen ikke er infisert, eller virusets konsentrasjon er for liten. Denne konsentrasjonen oppdages ikke på denne måten.

I tillegg er det kliniske bildet av sykdommen basert på hepatitt C markører og tolkning av analysen. Hovedmerkene er immunglobuliner (antistoffer) M og G. Deres tilstedeværelse i pasientens blod indikerer en ikke-karakteristisk prosess for en sunn organisme. På grunnlag av tilstedeværelsen av disse antistoffene etablerer pasienten som hovedregel den primære diagnosen.

Kvantitativ analyse er foreskrevet for primær deteksjon av antistoffer og om nødvendig behandling.

Også er kvantitativ analyse av hepatitt C foreskrevet for påvisning av blandet hepatitt (infeksjon med flere virus samtidig).

Kvantitativ analyse med dekoding utføres for å:

  • klargjøring av den endelige diagnosen;
  • bygge spådommer om sykdomsforløpet og dets behandling - utvidelse, reduksjon av behandling eller taktikkendring;
  • overvåkningsterapi.

For at resultatene skal være sanne, må du følge det etablerte regimet før du donerer blod:

  • kom til laboratoriet på tom mage, siste gang du kan spise 8 timer før prosedyren;
  • To dager før studien alkohol, er fett og stekt mat forbudt;
  • ultralyd, massasje, fysioterapi før studien ikke kan utføres;
  • medisinering er forbudt for dagen, hvis det er umulig å avbryte inntaket av visse legemidler, rapporteres dette før blodprøvetaking;
  • Før prosedyren anbefales det å redusere fysiske og nervøse belastninger så mye som mulig.

Oppfyllelsen av disse kravene vil være nøkkelen til å oppnå korrekte resultater av en kvantitativ analyse av hepatitt C.

Tolkning av kvantitativ analyse

Etter å ha oppnådd kvantitative analyseindikatorer, er det nødvendig å dechiffrere resultatene av tester for hepatitt C. Resultatene beregnes både i enheter i IE / ml og i eksemplarer per ml. For å få resultatene, konvertert til kopier, bruk flere teknikker.

  • HCV Monitor (konverteringsfaktor til ME - 2,7);
  • LCX HCV RNA (konverteringsfaktor til ME - 3,8).

Tabell. Tolkning av den kvantitative analysen av HCV RNA ved PCR.

Hva er Hepatitt C RNA?

Studien av RNA i hepatitt C-viruset er den viktigste prosedyren, som gjør det mulig å fastsette varighet og metoder for behandling av pasienter med stor nøyaktighet. Diagnosen av sykdommen består av flere forskjellige blodprøver, for eksempel:

  • hepatitt C markører (anti-HCV);
  • bestemmelse av hepatitt C-virus RNA (HCV RNA).

Den første studien er utført ved første mistanke om hepatitt. Det andre alternativet er den mest signifikante i behandlingen av HCV RNA, så betrakt det mer detaljert.

Hva er viral hepatitt C?

Viral hepatitt C, eller HCV, er en smittsom sykdom som påvirker leveren. Infeksjon med viruset skjer gjennom blodet. Du kan bli smittet ved å gjøre blodtransfusjon når regler for sterilisering av medisinske instrumenter ikke følges. Oftere er det tilfeller når sykdommen oppnås seksuelt eller fra en gravid mor til fosteret. Hepatitt C kan være av 2 typer.

Kronisk hepatitt C er den farligste. Det er en form for sykdom som kan vare i livet. Det fører til alvorlige problemer i leverfunksjonen, som skrumplever eller kreft. I 70-90% av infiserte mennesker blir sykdommen kronisk.

Den viktigste faren for hepatitt C er at den fortsetter skjult, uten icteric tegn. Samtidig klager de oftest på feber, kvalme og oppkast, fysisk svakhet, økt tretthet, tap av matlyst og vekt. På samme tid, på grunn av en liten herding av leverenvevet, opptrer den ondartede degenerasjonen ganske ofte. Av denne grunn blir hepatitt C ofte referert til som en "tidsbombe" eller "kjærlig morder".

En annen funksjon av sykdommen er den svært sakte utviklingen, beregnet i dusinvis av år.

Som regel føler de smittede ikke noen symptomer og er ikke klar over sin sanne tilstand. Ofte kan en sykdom kun oppdages ved å kontakte en lege på et annet emne.

På risiko er:

  • barn som fikk hepatitt C-viruset fra sine mødre;
  • narkomane;
  • folk som gjennomsyret deler av kroppen eller tatoverte med ikke-sterile instrumenter;
  • mottar donorblod eller organer (fram til 1992, da hemodialyse ikke ble utført);
  • folk smittet med hiv;
  • medisinsk personale i kontakt med infiserte pasienter.

Bestemmelse av hepatitt C RNA

Definisjonen av hepatitt C-virus-RNA, også kalt hepatitt C-PCR, er en studie av biologisk materiale (blod) som kan brukes til å bestemme direkte tilstedeværelse av hepatittvirusgenomater i kroppen (et enkelt virus er et enkelt RNA).

Hovedprøven er PCR, eller polymerasekjedereaksjonsmetoden.

Det finnes to typer blodprøver for HCV RNA:

Kvalitetstest

Gjennomføring av en kvalitativ analyse gjør det mulig å avgjøre om viruset er i blodet. Alle pasienter der C-hepatittantistoffer er funnet, må bestå denne testen. Ifølge resultatene kan du få 2 svar: "tilstede" eller "fravær" -virus. Ved et positivt testresultat (detektert) kan man dømme den aktive reproduksjonen av et virus som infiserer friske celler i leveren.

Testen utført på PCR av høy kvalitet er innstilt til en bestemt følsomhet, fra 10 til 500 IE / ml. Hvis hepatittviruset oppdages i blodet med et spesifikt innhold på mindre enn 10 IE / ml, kan deteksjon av viruset bli umulig. Et svært lavt spesifikt virusinnhold observeres hos pasienter som har antiviral terapi blitt foreskrevet. Derfor er det viktig at følsomheten til det medisinske systemet er høyt for å diagnostisere og sette et kvalitativt resultat i polymerasekjedereaksjonen.

Ofte utføres polymerasekjedereaksjonen av C-hepatitt umiddelbart etter å finne de tilsvarende antistoffer. Etterfølgende tester, under gjennomføringen av antiviral terapi, utføres på 4., 12. og 24. uke. Og en annen analyse etter avslutning av HTP er gjort etter 24 uker. Så - en gang i året.

Kvantitativ test

Kvantitativ analyse av PCR RNA, som noen ganger kalles viral belastning, bestemmer konsentrasjonen (spesifikt innhold) av viruset i blodet. Med andre ord, viral belastning er definert som en viss mengde viralt RNA, som kan være i en bestemt mengde blod (det er vanlig å bruke 1 ml, lik 1 cm i en terning). Enhetene for testresultater er internasjonale (standard) enheter dividert med en milliliter (IE / ml). Virusets innhold forekommer noen ganger annerledes, det avhenger av laboratoriene der forskningen utføres. For hepatitt C bruker kvantitativ bestemmelse noen ganger verdier som kopier / ml.

Du må forstå at det ikke er noen spesifikk avhengighet i alvorlighetsgraden av C-hepatitt på konsentrasjonen av denne stammen i blodet.

Sjekk "viral load" lar deg bestemme graden av smittsomhet av sykdommen. Dermed øker risikoen for å infisere en annen person med et virus med en økning i konsentrasjonen av hepatitt i blodet. I tillegg reduserer det høye innholdet av viruset effekten av behandlingen. Derfor er lav viral belastning en svært gunstig faktor for vellykket behandling.

I tillegg har hepatitt C-testen og dens bestemmelse ved PCR en stor rolle i anvendelsen av terapi for sykdommen og bestemmer suksessen av behandlingen. Basert på testresultatene er det planlagt et rehabiliteringskurs. For eksempel, hvis den spesifikke konsentrasjonen av hepatittviruset er for sakte, er antiviral terapi forlenget, og vice versa.

I moderne medisin antas det at belastningen på mer enn 800000 ME / ml er høy. En belastning på over 10 000 000 ME / ml anses kritisk. Men eksperter fra forskjellige land har fortsatt ikke den samme oppfatningen om grensene for virusbelastningen.

Frekvensen av den kvantitative testen

I generelle tilfeller utføres en kvantitativ analyse av hepatitt før antiviral terapi og 3 måneder etter avslutning av medisinske prosedyrer for å bestemme kvaliteten på den utførte behandlingen.

Som et resultat vil en kvantitativ test bli vurdert som en kvantitativ vurdering av resultatene for prøven spesifisert ovenfor. Som et resultat vil dommen "under det målte området" eller "ikke oppdaget i blodet" bli utstedt.

Sensitivitetsparameteren til en kvalitativ test er vanligvis lavere enn sensitiviteten til en kvantitativ analyse. Den "Manglende" transkripsjonen viser at begge typer analyser ikke fant virus-RNA. Når testindeksen var "under det målte området", fant en kvantitativ type analyse sannsynligvis ikke hepatitt-RNA, selv om dette bekrefter tilstedeværelsen av et virus med et svært lite spesifikt innhold.

Hepatitt C og dens genotyper

Hepatitt C-virus RNA-genotyping diagnostiserer tilstedeværelsen av forskjellige genetiske typer hepatitt C. Mer enn 10 typer av det virale genomet er kjent for vitenskap, men for medisinsk praksis er det tilstrekkelig å utelukke flere genotyper som har størst andel i regionen. Å bestemme den genetiske typen spiller en nøkkelrolle i valg av behandlingstidspunktet, noe som er svært nødvendig dersom du tar hensyn til det store antallet bivirkninger av medisiner for hepatitt.

Metoder for behandling av viral hepatitt C

Den eneste effektive måten å kurere hepatittviruset, er som regel en kombinasjon av 2 medisiner: interferon-alfa sammen med ribavirin. Individuelt er disse stoffene ikke like effektive. Den anbefalte dosen av legemidler og tidspunktet for bruk bør kun foreskrives av lege og individuelt for hver pasient. Behandling med disse legemidlene kan ta fra 6 til 12 måneder.

I dag ikke oppfunnet narkotika som garanterer et hundre prosent utvinning fra viruset. Men med riktig behandling kan helbredelse av pasienter nå opptil 90% av antall tilfeller.

Medinfo.club

Portal om leveren

HCV kvantitativ analyse og dekoding

Hepatitt C er en sykdom som kan formere seg i friske leverceller og provosere forekomsten av proliferative sykdommer. I den moderne verden, når hepatittviruset har passert en bestemt mutasjon, er det menneskelige immunsystem truet, siden det er ubetydelig sammenlignet med en infeksjon. Det er også verdt å merke seg at ikke alle pasienter vil oppleve de første tegn på sykdommen, særlig i de tidlige stadier.

RNA-analyse av hepatitt C-virus er en kvantitativ studie, hvis norm ligger i den moderate mengden av tilstedeværelsen av virusceller i pasientens blod. Ifølge statistikken er ca 31% av pasientene fullstendig herdet av denne sykdommen, hvis den er i utgangspunktet.

I medisinsk praksis merker leger at 4 millioner infiserte symptomer og første tegn ikke synes i det hele tatt, selv om den forsømte form for hepatitt kan føre til levercirrhose eller kreft.

For tiden, under blodtransfusjonsprosedyren, kontrolleres dette blodet for tilstedeværelsen av hepatitt C-viruset, siden denne sykdommen overføres gjennom donorblod.

I dag har medisiner for hepatitt C allerede oppstått i verden med en effektivitet nær 100%. Moderne farmasøytisk industri har skapt stoffer som har nesten ingen bivirkninger. Mange pasienter får de første resultatene i form av å lindre symptomene og redusere virusbelastningen etter en uke med inntak. Les mer om medisiner for hepatitt fra indisk produksjon, les vår egen artikkel.

Sofosbuvir Express har bevist seg i markedet for transport av indianhepatitt C-legemidler. Dette selskapet hjelper med suksess folk til å gjenopprette fra sykdommen i mer enn 2 år. Anmeldelser og videoer av fornøyde pasienter kan du se her. På deres konto er det mer enn 4000 mennesker som gjenvunnet takket være kjøpte stoffer. Ikke legg helsen din på vent, gå til www.sofosbuvir-express.com eller ring 8-800-200-59-21

Typer av PCR-studier

PCR (polymerasekjedereaksjon) er den mest moderne og effektive metoden for å studere virusgenet og dets evner. Slike diagnostikk er i stand til å etablere en type sykdom og bestemme dens videre mutasjon i pasientens kropp.

Analysen utføres ved å ta blod, som deretter plasseres i spesielle reagenser der kloning av celler finner sted.

Fra en celle viser det seg to, og så videre. Som et resultat er det hundrevis av DNA, der du kan diagnostisere patogenet og identifisere viruset på et tidlig stadium.

Derfor er PCR delt inn i flere typer:

  • kvalitativ analyse - gjenkjenner gener infeksjon i blodet. Hvis sykdommen under den kvalitative analysen av pasienten bekreftes, bør en kvantitativ analyse utføres for å fastslå infeksjonens omfang. Som et resultat av denne diagnosen skriver eksperter "oppdaget / ikke oppdaget". "Oppdaget" - sier at sykdommen er tilstede i kroppen og dens RNA allerede er identifisert. "Ikke oppdaget" - indikerer fraværet av et virusgen i prøven, det vil si, det er ingen hepatitt-RNA. Men leger anbefaler at de testes etter 10 dager.
  • kvantitativ analyse - bestemmer mengden av genetisk materiale av infeksjon i blodet. En slik diagnose bidrar til å fastslå alvorlighetsgraden av sykdommen og hele klinisk historie. Som et resultat av en slik analyse kan bare "Positiv / Negativ / Ugyldig" skrives. "Positiv" - representerer den smittsomme belastningen. Legene foreskriver denne metoden for å diagnostisere sykdommen for å bestemme effektiviteten av behandlingen ved 4, 12, 16 og 24 ukers sykdom. Hvis virusindikatoren er i området 8x10 IE / ml, er behandlingen effektiv hvis prisene er høyere, så nei. "Negativ" - infeksjonsgenet blir ikke oppdaget. "Ugyldig" - dette skjer hvis virusgenet ble oppdaget i kvalitative, men det ble ikke avslørt i kvantitativ analyse. Det er en lignende, forutsatt at infeksjonsvolumet er under nivået.

Forskjeller i kvalitative og kvantitative analyser

Hepatitt C-viruset diagnostiseres først og fremst ved å gjennomføre en kvantitativ analyse, hvor dekoding er nødvendig for korrekt tolkning av sykdommen. Til tross for dette har de kvalitative og kvantitative diagnostiske metodene sine forskjeller, for eksempel: rollen og oppgavene som er tildelt forskningen - kvalitativ - bekrefter tilstedeværelsen av infeksjon etter virusets detekterte antistoffer og kvantitativ - en sekundær metode som refuterer eller bekrefter sykdommen for å få den riktige og eneste diagnosen.

Tolkning av kvantitativ forskning

Etter diagnosen kan bare leger tolke resultatet, slik det ikke skal vises i figurer, men i ord. Ifølge statistikk er kvantitativ PCR den mest sensitive analysen. For å forstå om et virus er til stede i kroppen, er det nødvendig å forstå og vite at en kvantitativ analyse av hepatitt C tolkes ved hjelp av den digitale betegnelsen (standard) for infeksjon:

Phk hcv kvalitet hva er det

Hepatitt a og hepatitt c sammen
Myhep sofosbuvir daclatasvir

Hva er Hepatitt C RNA?

Studien av RNA i hepatitt C-viruset er den viktigste prosedyren, som gjør det mulig å fastsette varighet og metoder for behandling av pasienter med stor nøyaktighet. Diagnosen av sykdommen består av flere forskjellige blodprøver, for eksempel:

  • Hepatitt C markører (anti-HCV)
  • bestemmelse av hepatitt C-virus RNA (HCV RNA).

Den første studien er utført ved første mistanke om hepatitt. Det andre alternativet er den mest signifikante i behandlingen av HCV RNA, så betrakt det mer detaljert.

Hva er viral hepatitt C?

Viral hepatitt C, eller HCV, er en smittsom sykdom som påvirker leveren. Infeksjon med viruset skjer gjennom blodet. Du kan bli smittet ved å gjøre blodtransfusjon når regler for sterilisering av medisinske instrumenter ikke følges. Oftere er det tilfeller når sykdommen oppnås seksuelt eller fra en gravid mor til fosteret. Hepatitt C kan være av 2 typer.

Kronisk hepatitt C er den farligste. Det er en form for sykdom som kan vare i livet. Det fører til alvorlige problemer i leverfunksjonen, som skrumplever eller kreft. I 70-90% av infiserte mennesker blir sykdommen kronisk.

Den viktigste faren for hepatitt C er at den fortsetter skjult, uten icteric tegn. Samtidig klager de oftest på feber, kvalme og oppkast, fysisk svakhet, økt tretthet, tap av matlyst og vekt. På samme tid, på grunn av en liten herding av leverenvevet, opptrer den ondartede degenerasjonen ganske ofte. Av denne grunn blir hepatitt C ofte referert til som en "tidsbombe" eller "kjærlig morder".

En annen funksjon av sykdommen er den svært sakte utviklingen, beregnet i dusinvis av år.

Som regel føler de smittede ikke noen symptomer og er ikke klar over sin sanne tilstand. Ofte kan en sykdom kun oppdages ved å kontakte en lege på et annet emne.

På risiko er:

  • barn som fikk hepatitt C-viruset fra sine mødre,
  • narkomane
  • folk som gjennomsyret kroppsdeler eller tatoverte med ikke-sterile instrumenter,
  • donerte blod eller organer (fram til 1992, da hemodialyse ikke ble utført)
  • folk som lever med hiv
  • medisinsk personale i kontakt med infiserte pasienter.

Bestemmelse av hepatitt C RNA

Definisjonen av hepatitt C-virus-RNA, også kalt hepatitt C-PCR, er en studie av biologisk materiale (blod) som kan brukes til å bestemme direkte tilstedeværelse av hepatittvirusgenomater i kroppen (et enkelt virus er et enkelt RNA).

Grunnprøve metode # 8229, PCR eller polymerasekjedereaksjonsmetode.

Det finnes to typer blodprøver for HCV RNA:

Kvalitetstest

Gjennomføring av en kvalitativ analyse gjør det mulig å avgjøre om viruset er i blodet. Alle pasienter der C-hepatittantistoffer er funnet, må bestå denne testen. Ifølge resultatene kan du få 2 svar: "tilstede" eller "fravær" -virus. Ved et positivt testresultat (detektert) kan man dømme den aktive reproduksjonen av et virus som infiserer friske celler i leveren.

Testen utført på PCR av høy kvalitet er innstilt til en bestemt følsomhet, fra 10 til 500 IE / ml. Hvis hepatittviruset oppdages i blodet med et spesifikt innhold på mindre enn 10 IE / ml, kan deteksjon av viruset bli umulig. Et svært lavt spesifikt virusinnhold observeres hos pasienter som har antiviral terapi blitt foreskrevet. Derfor er det viktig at følsomheten til det medisinske systemet er høyt for å diagnostisere og sette et kvalitativt resultat i polymerasekjedereaksjonen.

Ofte utføres polymerasekjedereaksjonen av C-hepatitt umiddelbart etter å finne de tilsvarende antistoffer. Etterfølgende tester, under gjennomføringen av antiviral terapi, utføres på 4., 29. og 24. uke. Og en annen analyse etter avslutning av HTP er gjort etter 24 uker. deretter # 8229, en gang i året.

Kvantitativ test

Kvantitativ analyse av PCR RNA, som noen ganger kalles viral belastning, bestemmer konsentrasjonen (spesifikt innhold) av viruset i blodet. Med andre ord, viral belastning er definert som en viss mengde viralt RNA, som kan være i en bestemt mengde blod (det er vanlig å bruke 1 ml, lik 1 cm i en terning). Enheter for testresultater # 8229, internasjonale (standard) enheter delt med en milliliter (IE / ml). Virusets innhold forekommer noen ganger annerledes, det avhenger av laboratoriene der forskningen utføres. For hepatitt C bruker kvantitativ bestemmelse noen ganger verdier som kopier / ml.

Du må forstå at det ikke er noen spesifikk avhengighet i alvorlighetsgraden av C-hepatitt på konsentrasjonen av denne stammen i blodet.

inspeksjon # 171, viral belastning # 187, lar deg bestemme graden av smittsomhet av sykdommen. Dermed øker risikoen for å infisere en annen person med et virus med en økning i konsentrasjonen av hepatitt i blodet. I tillegg reduserer det høye innholdet av viruset effekten av behandlingen. Derfor er lav viral belastning en svært gunstig faktor for vellykket behandling.

I tillegg har hepatitt C-testen og dens bestemmelse ved PCR en stor rolle i anvendelsen av terapi for sykdommen og bestemmer suksessen av behandlingen. Basert på testresultatene er det planlagt et rehabiliteringskurs. For eksempel, hvis den spesifikke konsentrasjonen av hepatittviruset er for sakte, er antiviral terapi forlenget, og vice versa.

I moderne medisin antas det at belastningen er større enn 8 (800) 511 36 18 ME / ml er høy. En belastning på over 8 (800) 511 36 18 ME / ml regnes som kritisk. Men eksperter fra forskjellige land har fortsatt ikke den samme oppfatningen om grensene for virusbelastningen.

Frekvensen av den kvantitative testen

I generelle tilfeller utføres en kvantitativ analyse av hepatitt før antiviral terapi og 3 måneder etter avslutning av medisinske prosedyrer for å bestemme kvaliteten på den utførte behandlingen.

Som et resultat vil en kvantitativ test bli vurdert som en kvantitativ vurdering av resultatene for prøven spesifisert ovenfor. Som et resultat vil dommen "under det målte området" eller "ikke oppdaget i blodet" bli utstedt.

Sensitivitetsparameteren til en kvalitativ test er vanligvis lavere enn sensitiviteten til en kvantitativ analyse. Den "Manglende" transkripsjonen viser at begge typer analyser ikke fant virus-RNA. Når testindeksen var "under det målte området", fant en kvantitativ type analyse sannsynligvis ikke hepatitt-RNA, selv om dette bekrefter tilstedeværelsen av et virus med et svært lite spesifikt innhold.

Hepatitt C og dens genotyper

Hepatitt C-virus RNA-genotyping diagnostiserer tilstedeværelsen av forskjellige genetiske typer hepatitt C. Mer enn 10 typer av det virale genomet er kjent for vitenskap, men for medisinsk praksis er det tilstrekkelig å utelukke flere genotyper som har størst andel i regionen. Å bestemme den genetiske typen spiller en nøkkelrolle i valg av behandlingstidspunktet, noe som er svært nødvendig dersom du tar hensyn til det store antallet bivirkninger av medisiner for hepatitt.

Metoder for behandling av viral hepatitt C

Den eneste effektive måten å kurere hepatittviruset, er som regel en kombinasjon av 2 medisiner: interferon-alfa sammen med ribavirin. Individuelt er disse stoffene ikke like effektive. Den anbefalte dosen av legemidler og tidspunktet for bruk bør kun foreskrives av lege og individuelt for hver pasient. Behandling med disse legemidlene kan ta fra 6 til 29 måneder.

I dag ikke oppfunnet narkotika som garanterer et hundre prosent utvinning fra viruset. Men med riktig behandling kan helbredelse av pasienter nå opptil 90% av antall tilfeller.

HCV, RNA-kvantifisert [sanntids-PCR]

En studie for å identifisere årsaksmedlet til hepatitt C (HCV), hvor forekomsten av virusets genetiske materiale (RNA) og dets kvantitet (virusbelastning) i en blodprøve bestemmes ved bruk av realtids-polymerasekjedereaksjonsmetoden (RT-PCR).

HCV RNA kan detekteres ved en konsentrasjon som ligger utenfor den nedre grensen for det lineære konsentrasjonsområdet. Linjært konsentrasjonsområde er området der du nøyaktig kan beregne antall kopier av patogenet. For denne analysen er det lineære området for HCV DNA-konsentrasjoner bestemt av detekteringsforsterkeren 7,5 × 10 2 - 1,0 x 108 kopier / ml prøve.

Russiske synonymer

Hepatitt C-virus (HCV), kvantitativ bestemmelse av RNA.

Engelsk synonymer

Hepatitt C-virus RNA, kvantitativ realtid PCR, blod, HCV viral belastning, hepatitt C virus RNA Quant.

Forskningsmetode

Realtids revers transkriptase-polymerasekjedereaksjon.

Hva biomateriale kan brukes til forskning?

Hvordan forbereder du på studien?

Ikke røyk i 30 minutter før du donerer blod.

Generell informasjon om studien

Hepatitt C-virus (HCV) er et RNA-virus fra familien Flaviviridae som infiserer leveren. Det er i stand til å formere seg i blodceller (nøytrofiler, monocytter og makrofager, B-lymfocytter) og forårsake kryoglobulinemi, Sjogrens sykdom og B-celle lymfoproliferative sykdommer. HCV, på grunn av sin høye mutasjonsaktivitet, er i stand til å unngå eksponering for immunsystemets beskyttende mekanismer. Det er 6 genotyper og mange subtyper av viruset, som har forskjellige betydninger for å forutsi utviklingen av sykdommen og effektiviteten av antiviral terapi.

Hovedmodus for overføring er gjennom blodet (legemidler for blod og plasma transfusjoner, donororganer, ikke-sterile sprøyter, nåler, verktøy for tatovering, piercing). Infeksjon gjennom seksuell kontakt og barnet fra moren under fødsel er sannsynlig, men dette skjer sjelden.

Akutt viral hepatitt karakteriseres vanligvis av et asymptomatisk forløb og forblir uoppdaget i de fleste tilfeller. Bare i 15% av smittede er sykdommen akutt, med kvalme, kroppssmerter, mangel på appetitt og vekttap (sjelden ledsaget av gulsott). 60-85% av infiserte mennesker utvikler kronisk infeksjon, noe som er 15 ganger høyere enn hyppigheten av kronisk infeksjon i hepatitt B. Kronisk viral hepatitt C forekommer med en økning i leverenzymer og en dårlig manifestasjon av symptomer. Hos 20-30% av pasientene fører sykdommen til levercirrhose, noe som øker risikoen for leversvikt og hepatocellulær karsinom.

Påvisning av HCV RNA indikerer multiplikasjon av viruset i kroppen og er en metode for diagnostisering av sykdommen. Det genetiske materialet til viruset kan detekteres ved PCR 10-12 dager etter infeksjon. I denne perioden er spesifikke antistoffer, som dannes flere måneder etter infeksjon, fraværende, og de biokjemiske indikatorene for leverfunksjon er innenfor referanseverdier.

Gjennom PCR oppdages virus RNA enten kvalitativt eller kvantitativt. På grunn av den kvalitative metoden er tilstedeværelsen av hepatitt C-viruset og dets aktive reproduksjon bekreftet. Kvantitativ bestemmelse av virusbelastningen med hensyn til HCV-genotypen lar deg overvåke pågående behandling og forutsi sykdomsforløpet.

Effektiviteten av behandlingen vurderes av mengden av RNA før og under behandlingen. Vanligvis reduseres virusbelastningen av blodet flere ganger i de tre første månedene av vellykket behandling. Med effektiv behandling reduseres viremia med to størrelsesordninger i de første 4-12 ukers behandling, og etter behandlingsforløpet blir det genetiske materialet av viruset ikke detektert i blodet. Fraværet av en reduksjon i viremia etter 12 uker fra starten av behandlingen indikerer at den er ineffektiv. Det ble anbefalt å utføre analysen før behandlingsstart, 4., 12. og 24. behandlingsuke og 24 uker etter avsluttet kurs. Varigheten av behandlingen og frekvensen av kvantifisering av Hepatitt C-virus-RNA avhenger av virusgenotypen og graden av leverskade.

Hva brukes forskning til?

  • For å bekrefte diagnosen "viral hepatitt C".
  • Å forutsi løpet av viral hepatitt C.
  • Å overvåke antiviral terapi og bestemme videre behandlingsteknikker.

Når er en studie planlagt?

  • Med kvalitativ deteksjon av RNA av hepatitt C.
  • Ved akutt og kronisk viral hepatitt C.
  • Når blandet hepatitt.
  • Ved planlegging, under og etter slutten av antiviral terapi.

Hva betyr resultatene?

  • Ikke oppdaget - ingen hepatitt C-virus-RNA oppdaget eller en verdi under følsomhetsgrensen for metoden (200 kopier / ml = 400 IE / ml).
  • kopier / ml (IE / ml) - Hepatitt C-virus RNA oppdaget. Lav viremi (den mest gunstige prognosen for sykdommen og effektiviteten av behandlingen).
  • > 2 * 10 ^ 6 kopier / ml (> 4 * 10 ^ 6 IE / ml) - Hepatitt C-virus RNA er detektert. Høy viremi.
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kopier / ml (> 2 * 10 ^ 8 IE / ml) - Hepatitt C-virus RNA detekteres ved en konsentrasjon over det lineære konsentrasjonsområdet.

Det lineære området for RNA-konsentrasjoner av hepatitt C-viruset, bestemt av detekteringsforsterkeren, er 7,5 * 10 ^ 2 - 1,0 * 10 ^ 8 kopier / ml (1,5 * 10 ^ 3-2 * 10 ^ 8 IE / ml).

Hva kan påvirke resultatet?

Upålitelige resultater kan fås ved å:

  • biomaterialkontaminering;
  • Tilstedeværelsen i prøven av inhibitorer - kjemiske og proteinstoffer som påvirker de ulike komponentene i PCR;
  • Tilstedeværelsen av heparin i blodet.

Viktige notater

  • Nivået på viral blodbelastning indikerer ikke graden av skade på leveren og alvorlighetsgraden av sykdommen. For deres vurdering er det nødvendig å undersøke biokjemiske parametere og biopsi-materialer.
  • Ved planlegging av behandling er det svært viktig å bestemme genotypen for hepatitt C-viruset.

Anbefales også

Hvem gjør studien?

litteratur

  • Zh.I. Vozianova Infeksiøse og parasittiske sykdommer: I 3 tonn. - K.: Helse, 2000. - Vol. 1.: 600-690.
  • Kiskun A.A. Immunologiske og serologiske studier i klinisk praksis. - M.: OOO MIA, 2006. - 471-476 s.
  • Harrisons prinsipper for internmedisin. 16. utg. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, og andre. In vivo-celler i hepatitt C-viruset er det påvirkninger av viral belastning, viral genotype og cellefenotype. Blood. 1998 15 mai, 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Humane celletyper for hepatitt C-virusreplikasjon in vivo og in vivo: gamle påstander og nåværende bevis. Virol J. 2011 11 juli; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

PCR-studie for hepatitt C: typer, indikasjoner, transkripsjon

Viral hepatitt C er en alvorlig sykdom som oppstår med skade på leveren. I åtti prosent av pasientene blir det kronisk. Viruset multipliserer i leveren celler - hepatocytter - og forårsaker deres død. Dødt vev erstattes av bindevev, fibrose utvikler seg.

Etter hvert som fibrose utvikler seg, lever ikke i stand til å utføre sine funksjoner, begynner levercirrhose, noe som er farlig på grunn av komplikasjoner: økt trykk i portalveinsystemet, gastrointestinal blødning, nedsatt blodkoagulasjon, mentale forandringer på grunn av skade på hjernekjerner ved giftige produkter.

Årsaken til sykdommen er infeksjon av et virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen RNA-virus. Dette betyr at det genetiske materialet ved hvilket patogenene av patogenet syntetiseres, er kodet i ribonukleinsyremolekylet. Infeksjon skjer gjennom blod, seksuelt, og fra en gravid kvinne til fosteret. Dessverre kan en tilstrekkelig stor mengde tid passere mellom infeksjon og begynnelsen av antistoffproduksjonen - fra to uker til seks måneder. Dette tillater ikke å bestemme infeksjonen ved hjelp av metoden for immunoassay og begynne behandling i de tidlige stadier.

Hva er PCR-analyse?

PCR er en metode for molekylær analyse, som gjør det mulig å oppdage patogenes genetiske materiale allerede i den første uken etter infeksjon ved bruk av polymerasekjedereaksjon. Studien har høy spesifisitet, nøyaktighet, og tillater ikke bare å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også dets konsentrasjon og genotype.

For studien tas en pasients blod der virus-RNA kan være lokalisert. Primerer legges til de kunstig syntetiserte regioner av det ønskede gen av liten lengde, og RNA-polymerase er et spesielt enzym som øker mengden av genetisk materiale av patogenet flere ganger. Ved hjelp av et spesielt apparat, utføres flere sykluser av oppvarming og kjøling. Deretter analyseres materialet og sammenlignes med de kjente genene til viruset, på basis av hvilket det dannes en konklusjon om nærvær eller fravær av infeksjon.

Typer av PCR-analyse for hepatitt C

Det finnes tre typer PCR-analyse:

  1. Kvalitativ analyse av PCR. Den første fasen av studien. Det lar deg identifisere genetisk materiale av viruset i blodet.

  • Kvantitativ analyse av PCR. Lar deg bestemme virusbelastningen - konsentrasjonen av det genetiske materialet til patogenet i en milliliter blod. Denne studien utføres før behandlingsstart, og deretter i første, fjerde, tolvte, og (hvis løpet er lang), tjuefire uke med behandling for å evaluere effektiviteten.

  • Genotyping. Den forårsakende agensen av hepatitt C muterer ofte og raskt. Det var syv varianter av denne virusgenotypen funnet på planeten. I Russland er den første, andre og tredje typen vanlige. Hver av genotypene har en annen motstand mot terapi, for eksempel er effektiviteten av behandlingen av den første typen seksti prosent, og for den andre og tredje når denne tallet åttifem. Derfor, for å kunne velge de riktige stoffene og foreskrive et behandlingsforløp av tilstrekkelig varighet, er det nødvendig å avgjøre nøyaktig hvilken type virus pasienten er infisert med.
  • Indikasjoner for PCR-analyse for hepatitt C

    PCR-studien er foreskrevet i følgende tilfeller:

    • kontakt med en syk person der infeksjon kan oppstå;
    • positiv enzymimmunoassay;
    • tegn på skrumplever: endringer i leverens størrelse, utbredelse av milten, utseende på underlivet av subkutan venøs plexus;
    • Utseendet på symptomer på leverskade: smerte i høyre underliv, guling av huden;
    • økt aktivitet av ALT og AST i den biokjemiske analysen av blod;
    • før behandling begynner å bestemme viral belastning;
    • å overvåke effekten av antiviral terapi;
    • etter behandling for å kontrollere tilbakefall
    • i nærvær av diagnostisert hepatitt B, for å utelukke blandet leverskade.

    Forklaring av PCR-studier på hepatitt C

    Dekoding av PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitt C skal utføres av en spesialist på hepatolog eller smittsomme sykdommer. Analysere resultatene av PCR er nødvendig i kombinasjon med data om biokjemisk analyse av blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalifisert lege vil kunne analysere resultatene av forskning og, basert på dem, foreskrive riktig behandling.

    Dekoding av kvalitativ analyse.

    I det analyserte biologiske materialet fant det genetiske materialet til patogenet. Infeksjon bekreftet.

    Infeksjon er fraværende, eller mengden av patogenens RNA er under følsomhetsgrensen.

    Dekoding av kvantitativ analyse.

    Normal sats for friske mennesker. Det betyr at det ikke finnes hepatitt C-RNA i materialet som er studert, eller konsentrasjonen er under følsomhetsgrensen for studien.

    RNA-konsentrasjonen er under rekkevidden av kvantifisering. Disse resultatene tolkes svært nøye, korrelerer dem med data fra andre studier, ofte gjenstudier.

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon regnes som lav. Vanligvis betyr en reduksjon i mengden virus at terapien er vellykket.

    Mer enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon anses høy.

    Mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

    Mengden av RNA er over den øvre grense for kvantifikasjonsområdet. Det er umulig å trekke konklusjoner om graden av virusbelastning med dette resultatet. Vanligvis i slike tilfeller gjentas testen med fortynning av en blodprøve.

    Dekoding av genotyping.

    Oppdaget RNA av en bestemt genotype

    Hepatitt C-virus av en bestemt genotype og subtype ble påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romerske tall og latinske bokstaver, for eksempel - 1a, 2b. Totalt er det syv genotyper og sekstisju subtyper, men i Russland er det bare tre første typer.

    Hepatitt C virus RNA oppdaget

    RNA ble funnet i blodet av en sjelden genotype for Russland, som ikke kan tilskrives den første, andre eller tredje typen. Mer forskning er nødvendig.

    Dette resultatet indikerer at pasienten er sunn, eller at mengden av patogen-RNA er for liten.

    Det er mulig at PCR-analyse for hepatitt C er negativ, og enzymbundet immunosorbentanalyse gjenkjenner antistoffer mot viruset. Dette betyr at pasienten hadde akutt hepatitt C og gjenopprettet alene. Omtrent tjue tilfeller av infeksjon resulterer i spontan utvinning dersom pasientens kropp har tilstrekkelig motstand mot infeksjonen.

    Selv om PCR er en svært nøyaktig analyse, kan resultatet bli forvrengt i følgende situasjoner:

    • blodet ble transportert til laboratoriet under upassende forhold, temperaturen ble brutt;
    • biomaterialprøven var forurenset;
    • det var rester av heparin og andre antikoagulantia i blodet;
    • Undersøkere ble funnet å være inhibitorer - stoffer som reduserer eller stopper polymerasekjedereaksjonen.

    Fordelene med PCR over andre metoder

    1. Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materialet til det forårsakende middel. Ved hjelp av immunfluorescensanalyse kan bare immunoglobuliner bestemmes - stoffer som kroppen produserer som svar på en infeksjon. I tilfelle infeksjon med hepatitt C, kan intervallet mellom infeksjon og utbruddet av immunresponsen være flere uker og måneder, da vil ELISA være ineffektivt. PCR vil gi svar i den første uken etter infeksjon.

  • Lav sannsynlighet for feil. I materialet som studeres, bestemmer området for genetisk materiale, som er karakteristisk for bare en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-feil er mulige, siden samme type antistoffer kan frigjøres mot forskjellige virus - slike antistoffer kalles kryssantistoffer.

  • Høy følsomhet. PCR gjør det mulig å oppdage forårsakerens RNA selv i små mengder. Dette gjør det mulig å identifisere skjulte infeksjoner.
  • Hvordan forberede seg på bloddonasjon for PCR-studier

    For PCR-analysen av hepatitt C samles venøs blod. Vanligvis tas to porsjoner blod fra pasientens vene om gangen: den første sendes til PCR og den andre av ELISA. Dette er gjort for å mer nøyaktig vurdere hvor mye en pasient er infisert med et virus, og hvordan immunitet bekjemper den.

    Vanligvis er pasienten pålagt å følge følgende regler:

    • en blodprøve blir tatt om morgenen;
    • Intervallet mellom det siste måltidet og bloddonasjonen skal være åtte til ti timer;
    • to eller tre dager før analysen, er det nødvendig å forlate stekte og fete matvarer og alkohol;
    • i tjuefire timer før analysen, bør pasienten unngå fysisk anstrengelse: ikke bære vekter, ikke gå til treningsstudio eller svømmebasseng.

    Relaterte Artikler Hepatitt