Bruk av PCR-diagnostikk

Share Tweet Pin it

Polymeraskjedereaksjon (PCR) i molekylærbiologi er en eksperimentell metode for å oppdage virus. Det lar deg øke konsentrasjonen av bestemte nukleinsyrefragmenter (DNA) i prøver av biologisk materiale, noe som gjør det mulig å bestemme dem (gjenkjenne) og telle.

Analysen utføres som følger. Genetisk materiale (en blodprøve), som potensielt kan inkludere det ønskede genet, blir introdusert i røret. Det er også plassert primere - kjemisk syntetiserte segmenter av en liten lengde av ønsket gen.

DNA- eller RNA-polymerase er også tilsatt til karet, det er i stand til å lineere opp en nukleinsyrekjede som er helt identisk med originalen. Den resulterende sammensetning injiseres og et sett med fire fri nukleotider - et spesielt byggemateriale for RNA eller DNA, hvorav den ene inneholder radioaktive fosforpartikler.

Den resulterende blanding oppvarmes til 95-96 ° C, og derfor er to DNA-spiraler, som normalt er sammenflettet, vevd. Deretter avkjøles legemidlet, hvorpå primene selv fester seg til den ønskede regionen av virusgenomet, og hindrer at RNA (eller DNA) danner en dobbelt helix igjen.

Under kjøleprosessen søker polymerasen etter en fri nukleotidkjede. For funksjonen av dette enzymet er det nødvendig en enkelt kjede av nukleotider. Siden polymerase glir langs DNA-kjeden (som en ring på et tau), er den ikke i stand til å arbeide på en dobbelt helix.

Etter dette utføres en gjentatt varmesyklus som skyldes hvilke kjeder av nukleotider som er separert. Ved hver av disse syklusene av PCR øker mengden i prøven av det ønskede hepatittgenet eksponentielt, og resten av det genetiske materialet blir produsert (vokser) lineært.

Etter rensing av løsningen fra nukleotidrester og separasjon ved elektroforese av DNA-kjeder av molekylvektsparameteren, kan man lett bestemme om det er et ønsket gen i prøven under studie eller ikke.

Fordeler med PCR

Laboratorietesting ved hjelp av PCR tillater enda mer informasjon enn tilstedeværelsen av virus-RNA. Ved å bestemme parameteren for nivået av radioaktiv stråling, er det mulig å identifisere hvor mye genetisk materiale som opprinnelig var inneholdt i prøven under studien. I tilfelle av hepatitt, bestem indikatoren for nivået av viral belastning.

En annen fordel ved denne metoden er den meget høye følsomhetsgrad av CR-reaksjonen. Det er mye høyere enn klassiske metoder for å oppdage virus. Ideelt sett, for å identifisere ønsket gen, for PCR, er bare ett virus i prøven tilstrekkelig.

I tillegg er PCR helt spesifikt. Dens primere er utformet på en slik måte at de stemmer fullt overens med de unike områdene av de ønskede gener som ingen annen sekvens har. Som fingeravtrykk er unike, er det unike nukleotidsekvenser i hvert gen.

Kvalitativ analyse av PCR

Kvalitativ analyse lar deg bare identifisere tilstedeværelsen av et virus i blodet. Denne testen skal utføres for alle pasienter i hvilke antistoffer mot hepatitt C ble funnet i blodet. Det kan resultere i bare én av to verdier: "detektert" eller "ikke oppdaget". I en sunn person skal normen (referanseverdi) "ikke oppdages".

Det er en spesiell tolkning av slike resultater av kvalitativ forskning:

  • Resultatet er "oppdaget". Dette betyr at et fragment av RNA som er spesifikt for hepatitt C-viruset ble funnet i den analyserte prøven av biologisk materiale tatt. Det er derfor et faktum at pasienten er infisert med hepatitt C-viruset. Hvis resultatet av høyverdig PCR er "detektert", indikerer dette at viruset multipliserer og på denne tiden smitter det nye leverceller i kroppen.
  • Resultatet er "ikke oppdaget." En slik dom indikerer at i den analyserte prøven av biologisk materiale som er oppnådd i dette laboratoriet, ble det ikke funnet noe fragment av RNA som er spesifikt for hepatitt C-viruset. Alternativt var konsentrasjonen av RNA av patogeninfeksjonen i denne prøven under sensitivitetsgrensen for testen.

I den akutte fasen av RNA i hepatitt C-viruset kan slike kvalitative studier ved PCR-metoden detekteres allerede etter 1-2 uker umiddelbart etter kroppsinfeksjon, det vil si lenge før utseendet av antistoffer mot hepatitt selv.

Unøyaktige testresultater fra denne studien kan fås ved å:

  • forurenset biomateriale;
  • tilstedeværelsen av heparin i pasientens blod;
  • Tilstedeværelsen i prøven av kjemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) som påvirker de ulike komponentene i PCR.

For å gjennomføre en kvalitativ analyse av PCR, er det ikke nødvendig med spesiell forberedelse av pasienten for studien. Venøst ​​blod brukes som et materiale.

Evaluering av resultater

HPR-test av høy kvalitet har en viss grad av følsomhet, og avhengig av nøyaktigheten av forskningen og nivået på utstyret i laboratoriet kan variere fra 10 til 500 IE / ml.

Dette betyr at hvis viruset i blodprøven er tilstede i en meget lav konsentrasjon (mindre enn terskelverdien av følsomheten til dette laboratoriet), kan resultatet bestemmes som "ikke detektert" hos en pasientpatient. På grunn av dette, når det utføres en kvalitativ analyse av PCR med lavt nivå av viremia (lav viruskonsentrasjon), for eksempel for pasienter som gjennomgår antiviral terapi, er det svært viktig å kjenne følsomhetsgrensen for dette diagnostiske systemet.

Varianter av diagnostiske systemer

For å kontrollere den virologiske responsen, anbefales det å bruke diagnostiske systemer med en følsomhetsgrense på minst 50 IE / ml for antiviral behandling. Disse kriteriene er oppfylt, for eksempel med Cobas Ampicolor HCV-test-analysatorer (nøyaktig til 50 IE / ml), samt RealBest HCV RNA (med følsomhet på 15 IE / ml).

I henhold til WHO-anbefalinger, for å etablere en endelig diagnose av hepatitt C, er det nødvendig å basere seg bare på tre ganger deteksjon av C-virus-RNA i pasientens serumprøver, uten andre varianter av hepatittmarkører.

I tillegg til PCR-metoder, brukes en TMA-analyse (transkripsjonal amplifikasjonsmetode) til å detektere HCV RNA hos pasienter. Den har den beste følsomhetsgrensen (5-10 IE / ml), men i vårt land er en slik testmetode ikke særlig vanlig.

Utvalg av detekterbare virusmodifikasjoner

En slik kvalitativ bestemmelse i serum av tilstedeværelsen av RNA i hepatitt C-viruset gjør det mulig å bestemme flere genotyper av dette viruset. For tiden vet vitenskapen mer enn seks genotyper av dette viruset, så vel som om 10 subtyper av denne sykdommen.

I vårt land er vanlige virus 1, 2, 3 genotyper. Laboratorier kan oppdage følgende genotyper: 1a og 1b, 2a, 2b og 2c, samt 3, 4, 5a og 6, uavhengig av undertyper. For alle virusmodifikasjoner er deteksjonsspecifikiteten 100%.

PCR kvantitativ analyse

Ved hjelp av en kvantitativ PCR-test bestemmes nivået av konsentrasjon av hepatittviruset i blodprøver (virusbelastning). Denne testen for viremia (viruskonsentrasjon) lar deg bestemme antall enheter av et bestemt genetisk materiale (det mest virale RNA) som detekteres i en viss mengde. I dette tilfellet bestemme konsentrasjonen i 1 ml, som tilsvarer 1 cu. cm.

De kvantitative parametrene til analysen er uttrykt i figurer, for dette formål brukes internasjonale enheter (IE) per ml (ml), referert til som IE / ml, som måleenheter. Nå i noen laboratorier kan mengden av virus bestemmes i andre enheter: Antall kopier per ml er angitt som kopier / ml.

  • Datoer. For hepatitt C, gjøres en slik kvantitativ analyse av PCR umiddelbart før starten av behandlingen. Deretter 1., 4., 12. og 24. uke. Evaluering på 12. uke er indikativ, det gjør det mulig å bestemme effektiviteten av terapien.
  • Forberedelse for analyse. For å utføre en kvantitativ analyse av PCR, er det ikke nødvendig med spesiell forberedelse av pasienten til studien. En halv time før prøvetaking bør ikke røyke. Venøst ​​blod brukes som laboratoriemateriale.

Evaluering av resultater

For ulike laboratorietestsystemer er det forskjellige konverteringskvoter for denne indikatoren i IE / ml. I gjennomsnitt tar de en konverteringsparameter, der 4 kopier / ml = 1 IE / ml. Det vil si at hvis laboratoriet gir resultatet av PCR-analyse 2,4 * 10 6 kopier / ml, så skal denne parameteren deles inn i 4 og vi får 6 * 10 5 IE / ml.

En belastning på 800.000 IE / ml regnes som høy, noe som tilsvarer omtrent 3.000.000 eksemplarer / ml. Lav viremia, ifølge noen forfattere, tilsvarer parametrene for kvantitativ PCR under 400 000 IE / ml.

Som resultat av den kvantitative testen kan de endelige resultatene ikke leveres i form av en digital verdi, men: "under måleområdet" eller "ikke detektert".

  • Vurdering: "under måleområdet." Dette antyder at den kvantitative testen ikke kunne oppdage hepatitt C viral RNA, men selve viruset er tilstede i kroppen i svært lave konsentrasjoner. Dette fremgår av en ytterligere kvalitativ test, som bekrefter faktumet av tilstedeværelsen av viruset.
  • Vurdering: ikke oppdaget. Dette resultatet indikerer at den kvantitative testen ikke ble funnet i prøven av virus-RNA.

Parameteren for viral belastning bestemmer først og fremst graden av infeksiøsitet av sykdommen, nivået av "infeksjon" av pasienten. Jo høyere pasientens viruskonsentrasjon er, jo større er sannsynligheten for at den overføres til andre mennesker. For eksempel, under samleie med en syke person, eller vertikalt. Denne kvantitative indikatoren bidrar også til å bestemme effekten av behandlingen av pasienten.

Å gjennomføre en kvantitativ analyse av KKP er viktig for antiviral terapi, vurderer suksess og planlegger varighet på kurset. Med en rask respons fra kroppen til behandling og en lav grad av viremi, kan varigheten av behandlingen forkortes.

Hvis den kvantitative PCR-parameteren reduseres sakte, bør antiviral terapi forlenges eller modifiseres. Hvis nivået av viral belastning er lav, er dette en gunstig faktor for terapi, men hvis forhøyet, er metoden for behandling som brukes, ineffektiv og legemidlene eller metoder for deres bruk bør endres.

Kvalitativ analyse for hepatitt C

Legg igjen en kommentar 7,180

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold studeres strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden forsømmet tilstand av leveren vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres også etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Tilordnet for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av kausjonsmiddelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller den milde formen, utføres PCR ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Ved donering av blod til hepatitt undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). Studier av PCR bidrar til å finne patogenmaterialet i strukturen av RNA og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

  • påvisning av tegn på betennelse i leveren;
  • screening studier for forebygging;
  • undersøkelse av personer i kontakt
  • diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
  • bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
  • levercirrhose;
  • for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.
Studier av PCR foreskrives av en lege for å bestemme effektiviteten av et behandlingsforløp for hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA til virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt nivå av konsentrasjon av det forårsakende middelet av hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lavt antall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse med polymerasekjedereaksjonsindeksen er tildelt alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å bestå testen for hepatitt B, da i en positiv konklusjon, og for hepatitt D. Også kvalitativt analysert reaksjon skal utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikatoren bør man huske på at analysens følsomhet for diagnostiske systemer er forskjellig, og at RNA hepatitt C fortsatt kan være i blodet, men ikke manifestert i analysen.

Spesielt sensitiv PCR-metode viser ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

  • mistenkte skjulte former for hepatitt C;
  • PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
  • i tilfelle gjenoppretting
  • å oppdage tidlig infeksjon.
Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekodingen av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, spesielt med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid selvtillit et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene fra den serologiske analysen tilstedeværelsen av antistoffer mot C-viruset, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er bare svært sjeldne tilfeller av falske positiver som finnes i diagnosen. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

PCR-analyse for hepatitt C

Diagnose av hepatitt inkluderer en rekke tester for å bestemme tilstedeværelsen av et virus i blodet. En av måtene å oppdage en sykdom er en slik undersøkelsesmetode som PCR for hepatitt C. Hva er det, hvorfor er analysen av PCR for hepatitt så viktig som den utføres og dechifrert?

Hva er det

Polymerase kjede reaksjon, eller PCR, brukes til å diagnostisere magesår, kolitt, enteritt. Men den største fordelen ligger i det faktum at det bidrar til å oppdage både hepatitt C-viruset og antistoffene i kroppen, noe som har evnen til ikke å forårsake immunsystemet reaksjoner på grunn av deres evne til å mutere.

Studien og dens essens ligger i etableringen av visse forhold under hvilke kjedereaksjonen av hepatitt-RNA forekommer. Hvis det, når det sammenlignes med nukleotidsekvensen for hepatitt C-viruset, forekommer tilfeldigheter, dette indikerer at det er virale partikler i blodet, og desintegreringsprosesser forekommer i leveren. Hvis mengden av virus er under et visst nivå, blir en negativ diagnose, og hvis høyere, en positiv en.

Det finnes to typer blodprøver ved hjelp av PCR-metoden for hepatitt: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.

Kvantitativ PCR, som nevnt ovenfor, bestemmer konsentrasjonen av RNA i hepatittviruset. I tillegg er han i stand til å gi informasjon om intensiteten som patologien utvikler, og effektiviteten av den foreskrevne behandlingen. En kvantitativ analyse av hepatitt C er ekstremt viktig fordi det løser motstand mot virkningen av antivirale legemidler og lar deg justere behandlingen.

Etter at pasienten har gjennomgått en behandling, bidrar PCR til å bestemme den videre rekkefølgen av avtaler. I noen tilfeller er behovet for ytterligere undersøkelser. For eksempel, hvis nivået av ALP økes (men ikke mer enn 2 ganger innen seks måneder), og transkripsjonen av analysen indikerer en virusbelastning over 105 IE / ml, foreskrives pasienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse av PCR avslører en sterk betennelse og fibrose, foreskrives pasienten et behandlingsforløp med antivirale legemidler.

I situasjoner hvor et stort antall virale partikler kombineres med høy ALT, bør pasienten umiddelbart behandles uten ytterligere diagnostiske tiltak.

Ta denne testen og finn ut om du har leverproblemer.

Kun kvalifiserte og erfarne spesialister kan deififere kvalitativt i kvantitativ analyse av blod for hepatitt, og moderne teknologier bidrar til å gjøre dette med lav konsentrasjon av viruset i blodet.

Kvalitativ analyse av PCR er rettet mot å bestemme og bekrefte den faktiske forekomsten av viruset i kroppen. Det utføres når antistoffer mot hepatitt detekteres i blodet. Det er en kvalitativ analyse av hepatitt som garanterer nøyaktigheten av resultatet med 100%, og lar deg gjøre diagnose i de tidlige stadiene av sykdommen, som gjør det mulig å starte kampen mot hepatitt allerede i de første ukene etter infeksjon og øker sjansene for fullstendig gjenoppretting (i tilfelle sykdommen B).

Fordeler med PCR

I studien ved PCR og deklarering av en blodprøve for hepatitt, kan du også bestemme genotypen av patogenet. Totalt er det 6 genotyper av viruset og et stort antall subtyper, men i vår region er 1, 2 og 3 genotyper blitt vanlige.

Andre fordeler med denne typen diagnose er:

  • høy nøyaktighet av de innhentede indikatorene og lav sannsynlighet for feil i dem;
  • høyt følsomhetsnivå for virale partikler i blodet;
  • muligheten til å identifisere flere patogener samtidig;
  • diagnose av patogene intracellulære mikroorganismer med høy antigenvariabilitet;
  • Ved å arbeide med dekoding av analysen for hepatitt, kan du oppdage skjulte nåværende infeksjoner.

Hvem er utnevnt

Følgende kategorier av mennesker må passere PCR-analysen for hepatitt:

  • gravide kvinner;
  • helsepersonell;
  • potensielle blod- og organdonorer;
  • de som har karakteristiske tegn på sykdommen;
  • HIV-infiserte individer;
  • rusmisbrukere
  • person promiskuøse.

Hvordan utføres analysen og er det nødvendig å forberede seg på det

Blodprøvetaking for PCR er utført fra en vene. Som regel skjer dette om morgenen før personen har spist, fordi etter å ha spist et måltid, skal minst 8 timer passere. I ekstreme tilfeller kan blod tas til undersøkelse om dagen eller kvelden, men tidsgapet mellom analyse og inntak av mat bør være minst 5 timer.

Den menneskelige faktoren kan kvantitativt påvirke resultatene: Nøyaktigheten i noen tilfeller reduseres fra 100% til 95%, derfor er det nødvendig å forberede bloddonasjon på forhånd. Kvaliteten på biomaterialet for analyse vil være hensiktsmessig når pasienten følger følgende regler:

  • før du gir blod, kan du bare drikke rent vann;
  • To dager før studien er det nødvendig å nekte å godta stekte og fete matvarer, samt alkoholholdige drikker;
  • En dag før besøket til laboratoriet bør slutte å ta medisiner. Hvis dette ikke er mulig, er det viktig å informere laboratorietekniker og behandlende lege.
  • dagen før du trenger å unngå stressende situasjoner og fysisk anstrengelse;
  • ultralyd, røntgen og instrumentelle undersøkelser bør ikke utføres kort før bloddonasjon;
  • i timen før analysen må du avstå fra å røyke;
  • 20 minutter før du donerer blod, må du bli distrahert, roe ned og puste ut.

Hvis et barn under 5 år passerer studien, bør foreldrene sørge for at han drikker kokt vann hvert 10. minutt i en halv time før du tar biomaterialet.

Dekryptering av mottatte data

Dekoding av analysen kan representeres av ord (i tilfelle av en kvalitativ studie), for eksempel "ikke oppdaget" eller "under rekkevidden av endringer". I det første tilfellet indikerer dette at infeksjonen ikke ble oppdaget. I det andre - at viruset er tilstede, men i små mengder. Denne situasjonen krever re-forskning.

Viral belastning bestemmes av mengden infeksiøs RNA og refereres til som IE / ml eller kopier / ml.

En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitt C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.

Konsentrasjonen av virus i blodet kan være:

  • lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
  • medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
  • høy: mer enn 8x10 5 IE / ml.

Kvantitativ og kvalitativ analyse av PCR for hepatitt tillater å bestemme tilstedeværelsen av viruset i kroppen og nivået av konsentrasjonen. En flerdimensjonal kjedereaksjon er i stand til å diagnostisere sykdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendig at pasientene så snart som mulig kontakter medisinske institusjoner for å få hjelp og følg nøye anbefalingene fra den behandlende legen.

Kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR for hepatitt C: negativ, positiv, transkripsjon

Hepatitt C er en viral leversykdom forårsaket av flavivirus HCV (fra det engelske ordet hepatitt C-virus), hvis struktur inneholder et ribonukleinsyremolekyl (RNA). RNA bærer virusets genetiske kode. Dens tilstedeværelse tillater analyse av PCR for hepatitt C.

Faren for HCV for en person ligger i det faktum at det såkalte serologiske vinduet (tiden mellom infeksjon og utseendet av en reaksjon fra immunsystemet) kan være ganske lang - fra flere uker til seks måneder.

Det registrerer ikke infeksjon og starter behandling i tide.

Avhengig av organismens individuelle egenskaper kan bæreren av HCV manifestere seg i en akutt form, så vel som oppstå som en kronisk sykdom som vil kreve en lang og kostbar behandling. Når antistoffer mot HCV oppdages, utføres en rekke laboratorietester, inkludert PCR for hepatitt C. Denne testen er utført for alle personer i hvis blodantistoffer mot HCV er funnet.

Hva er PCR-analyse?

Laboratorieanalyse av PCR for hepatitt C - studiet av biologisk materiale for å oppdage nærvær av flavavirus.

Polymerasekjedereaksjonen (som forkortelsen står for) viser den kvantitative verdien av kroppens virale lesjon, dets kvalitative egenskaper, samt genotypen av viruset som inneholder RNA.

På grunnlag av dem, samt på grunnlag av ytterligere analyser, bestemmes metoden og varigheten av behandlingen, samt den epidemiologiske faktoren (grad av risiko for overføring til en annen bærer).

Hva er Hepatitt C RNA-analyse?

Hepatitt C-PCR kalles også RNA-analyse (HCV RNA), fordi Flavaviruset inneholder en RNA-partikkel med en virionsstørrelse på 30-60 nm. En av egenskapene til denne mikroorganismen er en høy tilbøyelighet til mutasjoner.

Hver av virusens underarter (genotyper) har en annen motstand, noe som medfører forskjellige behandlingsmetoder og arten av den videre prognosen for pasienten.

Biologisk materiale (venøst ​​blod) er gitt på tom mage og er som regel undersøkt med realtids-PCR-metoden (svært sensitiv sanntidsdiagnostikk med en lavere deteksjonsgrense på 15 IE / ml ved bruk av lukkede automatiserte systemer).

Det finnes andre tester, for eksempel COBAS AMPLICOR med en følsomhet på 50-100 IE / ml. For enhver laboratorietest er terskelen for følsomhet viktig, dvs. Reagens evne til å oppdage minimal konsentrasjon av virus i biologisk materiale.

Typer av analyse for hepatitt C ved PCR

Hepatitt C PCR inneholder tre viktige komponenter:

  • kvalitativ analyse;
  • kvantitativ analyse;
  • genotyping.

Disse tester tillater deg å bestemme arten av viremia, samt patogenens genetiske egenskaper. Avhengig av diagnostikkens følsomhet utføres studien en gang, og noen ganger utføres en andre test med et mer sensitivt reagens for å bekrefte eller finjustere resultatene.

Høykvalitets PCR av hepatitt C

Hepatitt C PCR-analyse kvalitativ er et annet vanlig navn for analysen av polymerasekjedereaksjonen. Standard følsomhet av testen, som gjør det mulig å oppdage tilstedeværelsen av virale lesjoner, ligger i området 10-500 IE / ml.

En negativ PCR-analyse for hepatitt C viser at viruskonsentrasjonen i pasientens blod er under følsomhetstrømen til diagnosesystemet.

Hvis høyverdig PCR ga svaret "ikke oppdaget", så for etterfølgende behandling er det viktig å finne ut av terskelen for følsomheten til reagenset.

Proteinfraksjoner til flavavirus fremkommer mye senere.

Hepatitt C Kvantitativ PCR

PCR hepatitt C kvantitativ er en indikator på virusbelastning, som reflekterer nivået av RNA-konsentrasjon av flavavirus i kroppen. Dette er en indikator som viser hvor mange fragmenter av virus RNA som finnes i kubikkcentimeter av blod. Resultatene av PCR av hepatitt C RNA i en kvantitativ test i det konvensjonelle systemet er indikert i internasjonale enheter per milliliter (IE / ml) og kan registreres på forskjellige måter, for eksempel 1,7 millioner eller 1,700,000 IE / ml.

Kvantitativ PCR-diagnostikk av hepatitt C er foreskrevet for pasienter før behandling med antiviralbehandling, og i uke 12 i behandling, for å evaluere resultatene av den valgte metoden for behandling av HCV. Viral belastning gjør det mulig å bestemme tre viktige indikatorer for sykdommen:

  • smittsomhet, dvs. graden av risiko for virusoverføring fra en bærer til en annen (jo høyere konsentrasjonen av flavavirus-RNA, desto større er sannsynligheten for å infisere en annen person, for eksempel gjennom seksuell kontakt);
  • metode og effektivitet av behandlingen;
  • Varighet og prognose for antiviral terapi (jo høyere viral belastning, jo lenger behandling varer).

Kvantitativ PCR-diagnostikk av hepatitt C er avhengig av type laboratorietest og terskelen for følsomheten. Den nedre grensen til normen anses å være indikatoren opptil 600.000 IE / ml, gjennomsnittsverdien er innenfor 600.000-700.000 IE / ml. Resultater på 800.000 IE / ml og over anses høye nivåer av RNA-holdig virus.

genotyping

På grunn av den høye mutasjonsaktiviteten til HCV i naturen, er det viktig å identifisere hvilken virusgenotype som er i pasientens blod ved testing. Totalt har 11 genotyper av hepatitt C-viruset blitt registrert på planeten, som inkluderer mange underarter (undertyper). På territoriet i Russland distribuert 1,2 og 3.

Hepatitt C PCR RNA sammen med genotyping er en svært viktig del av analysen siden gjør det mulig for legen å bestemme motstanden (motstanden) av viruset, velg de aktuelle legemidlene og foreskrive et behandlingsforløp.

Genotyping lar deg også indirekte bestemme tilstanden i leveren. For eksempel er 3 genotypen av HCV ofte ledsaget av steatosis, hvor fett akkumuleres i organets celler.

En blodprøve for PCR for hepatitt C bør produsere en figur som bestemmer genotypen. Laboratorie svar kan si "ikke skrevet" - og det betyr at et virus er i humant blod som ikke oppdages av testsystemet. Dette kan tyde på at genotypen ikke er typisk for et gitt geografisk område. I dette tilfellet bør du gjenta analysen med en høyere følsomhet for diagnosesystemet.

Dekoding av PCR-analyse for hepatitt C

Testen for hepatitt C PCR kvantitativ dekryptering kan baseres på dataene ovenfor. Når man får resultater fra laboratorietester, skrives vanligvis følgende data:

  • "Found" / "not found" (høy kvalitet PCR for hepatitt C);
  • antall RNA-holdige fraksjoner, for eksempel 831,680 ME / ml (kvantitativ PCR-analyse);
  • figuren som bestemmer genotypen for HCV, for eksempel - 1, 2, 3, 4;
  • Navnet på testen er oftest sanntid.

Det viktigste ved å dekode analysen av PCR for hepatitt C er andre leddet, som viser virusbelastningen, som bestemmer prognosen, metoden og varigheten av behandlingen.

Hvis PCR-testen for hepatitt C er negativ, og ELISA er positiv - hva betyr dette?

For å dekode laboratorietester, er det viktig å kontakte en hepatolog eller en smittsom sykdomsspesialist som vil forklare informasjonen som er oppnådd i henhold til type diagnostisk system og dens følsomhetsgrense. I medisinsk praksis er det mange data om blodprøver som kan villede en person uten medisinsk utdanning.

For eksempel, hvis testen for hepatitt C-PCR er negativ, og ELISA er positiv, kan det bety at det ikke er noen HCV i pasientens blod for øyeblikket, men tidligere har han hatt en akutt form for hepatitt C. Det antas at en positiv enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) viser at Det er antistoffer i blodet som er produsert etter invasjonen av viruset tidligere. Men i moderne medisinsk praksis anses ELISA-analyse å være utilstrekkelig pålitelig og gir ofte ujevne resultater, slik at leger bruker det som en primær screening. Ved diagnostisering av en sykdom styres spesialister nettopp ved PCR-test.

Nyttig video

Følgende video gir en svært detaljert og interessant beskrivelse av essensen av PCR-metoden, hvordan analysen utføres:

konklusjon

For analyse av PCR for hepatitt C, er vanligvis venøs blod tatt. Ofte er det et dobbelt inntak av biologisk materiale - for ELISA, og direkte for PCR-test. For riktige testresultater kreves det i samsvar med grunnleggende regler for laboratorieprøvetaking av biologisk materiale:

  • Blod for analyse er gitt i første halvdel av dagen på tom mage;
  • mellom måltid og blodprøver bør ta minst 8 timer;
  • alkohol og stekt mat bør også utelukkes før testen utføres;
  • i løpet av dagen før du donerer blod, er det nødvendig å unngå høy fysisk anstrengelse.

Blodtestresultater er vanligvis klare neste dag.

PCR-studie for hepatitt C: typer, indikasjoner, transkripsjon

Viral hepatitt C er en alvorlig sykdom som oppstår med skade på leveren. I åtti prosent av pasientene blir det kronisk. Viruset multipliserer i leveren celler - hepatocytter - og forårsaker deres død. Dødt vev erstattes av bindevev, fibrose utvikler seg.

Etter hvert som fibrose utvikler seg, lever ikke i stand til å utføre sine funksjoner, begynner levercirrhose, noe som er farlig på grunn av komplikasjoner: økt trykk i portalveinsystemet, gastrointestinal blødning, nedsatt blodkoagulasjon, mentale forandringer på grunn av skade på hjernekjerner ved giftige produkter.

Årsaken til sykdommen er infeksjon av et virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen RNA-virus. Dette betyr at det genetiske materialet ved hvilket patogenene av patogenet syntetiseres, er kodet i ribonukleinsyremolekylet. Infeksjon skjer gjennom blod, seksuelt, og fra en gravid kvinne til fosteret. Dessverre kan en tilstrekkelig stor mengde tid passere mellom infeksjon og begynnelsen av antistoffproduksjonen - fra to uker til seks måneder. Dette tillater ikke å bestemme infeksjonen ved hjelp av metoden for immunoassay og begynne behandling i de tidlige stadier.

Hva er PCR-analyse?

PCR er en metode for molekylær analyse, som gjør det mulig å oppdage patogenes genetiske materiale allerede i den første uken etter infeksjon ved bruk av polymerasekjedereaksjon. Studien har høy spesifisitet, nøyaktighet, og tillater ikke bare å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også dets konsentrasjon og genotype.

For studien tas en pasients blod der virus-RNA kan være lokalisert. Primerer legges til de kunstig syntetiserte regioner av det ønskede gen av liten lengde, og RNA-polymerase er et spesielt enzym som øker mengden av genetisk materiale av patogenet flere ganger. Ved hjelp av et spesielt apparat, utføres flere sykluser av oppvarming og kjøling. Deretter analyseres materialet og sammenlignes med de kjente genene til viruset, på basis av hvilket det dannes en konklusjon om nærvær eller fravær av infeksjon.

Typer av PCR-analyse for hepatitt C

Det finnes tre typer PCR-analyse:

  1. Kvalitativ analyse av PCR. Den første fasen av studien. Det lar deg identifisere genetisk materiale av viruset i blodet.

  • Kvantitativ analyse av PCR. Lar deg bestemme virusbelastningen - konsentrasjonen av det genetiske materialet til patogenet i en milliliter blod. Denne studien utføres før behandlingsstart, og deretter i første, fjerde, tolvte, og (hvis løpet er lang), tjuefire uke med behandling for å evaluere effektiviteten.

  • Genotyping. Den forårsakende agensen av hepatitt C muterer ofte og raskt. Det var syv varianter av denne virusgenotypen funnet på planeten. I Russland er den første, andre og tredje typen vanlige. Hver av genotypene har en annen motstand mot terapi, for eksempel er effektiviteten av behandlingen av den første typen seksti prosent, og for den andre og tredje når denne tallet åttifem. Derfor, for å kunne velge de riktige stoffene og foreskrive et behandlingsforløp av tilstrekkelig varighet, er det nødvendig å avgjøre nøyaktig hvilken type virus pasienten er infisert med.
  • Indikasjoner for PCR-analyse for hepatitt C

    PCR-studien er foreskrevet i følgende tilfeller:

    • kontakt med en syk person der infeksjon kan oppstå;
    • positiv enzymimmunoassay;
    • tegn på skrumplever: endringer i leverens størrelse, utbredelse av milten, utseende på underlivet av subkutan venøs plexus;
    • Utseendet på symptomer på leverskade: smerte i høyre underliv, guling av huden;
    • økt aktivitet av ALT og AST i den biokjemiske analysen av blod;
    • før behandling begynner å bestemme viral belastning;
    • å overvåke effekten av antiviral terapi;
    • etter behandling for å kontrollere tilbakefall
    • i nærvær av diagnostisert hepatitt B, for å utelukke blandet leverskade.

    Forklaring av PCR-studier på hepatitt C

    Dekoding av PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitt C skal utføres av en spesialist på hepatolog eller smittsomme sykdommer. Analysere resultatene av PCR er nødvendig i kombinasjon med data om biokjemisk analyse av blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalifisert lege vil kunne analysere resultatene av forskning og, basert på dem, foreskrive riktig behandling.

    Dekoding av kvalitativ analyse.

    I det analyserte biologiske materialet fant det genetiske materialet til patogenet. Infeksjon bekreftet.

    Infeksjon er fraværende, eller mengden av patogenens RNA er under følsomhetsgrensen.

    Dekoding av kvantitativ analyse.

    Normal sats for friske mennesker. Det betyr at det ikke finnes hepatitt C-RNA i materialet som er studert, eller konsentrasjonen er under følsomhetsgrensen for studien.

    RNA-konsentrasjonen er under rekkevidden av kvantifisering. Disse resultatene tolkes svært nøye, korrelerer dem med data fra andre studier, ofte gjenstudier.

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon regnes som lav. Vanligvis betyr en reduksjon i mengden virus at terapien er vellykket.

    Mer enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon anses høy.

    Mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

    Mengden av RNA er over den øvre grense for kvantifikasjonsområdet. Det er umulig å trekke konklusjoner om graden av virusbelastning med dette resultatet. Vanligvis i slike tilfeller gjentas testen med fortynning av en blodprøve.

    Dekoding av genotyping.

    Oppdaget RNA av en bestemt genotype

    Hepatitt C-virus av en bestemt genotype og subtype ble påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romerske tall og latinske bokstaver, for eksempel - 1a, 2b. Totalt er det syv genotyper og sekstisju subtyper, men i Russland er det bare tre første typer.

    Hepatitt C virus RNA oppdaget

    RNA ble funnet i blodet av en sjelden genotype for Russland, som ikke kan tilskrives den første, andre eller tredje typen. Mer forskning er nødvendig.

    Dette resultatet indikerer at pasienten er sunn, eller at mengden av patogen-RNA er for liten.

    Det er mulig at PCR-analyse for hepatitt C er negativ, og enzymbundet immunosorbentanalyse gjenkjenner antistoffer mot viruset. Dette betyr at pasienten hadde akutt hepatitt C og gjenopprettet alene. Omtrent tjue tilfeller av infeksjon resulterer i spontan utvinning dersom pasientens kropp har tilstrekkelig motstand mot infeksjonen.

    Selv om PCR er en svært nøyaktig analyse, kan resultatet bli forvrengt i følgende situasjoner:

    • blodet ble transportert til laboratoriet under upassende forhold, temperaturen ble brutt;
    • biomaterialprøven var forurenset;
    • det var rester av heparin og andre antikoagulantia i blodet;
    • Undersøkere ble funnet å være inhibitorer - stoffer som reduserer eller stopper polymerasekjedereaksjonen.

    Fordelene med PCR over andre metoder

    1. Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materialet til det forårsakende middel. Ved hjelp av immunfluorescensanalyse kan bare immunoglobuliner bestemmes - stoffer som kroppen produserer som svar på en infeksjon. I tilfelle infeksjon med hepatitt C, kan intervallet mellom infeksjon og utbruddet av immunresponsen være flere uker og måneder, da vil ELISA være ineffektivt. PCR vil gi svar i den første uken etter infeksjon.

  • Lav sannsynlighet for feil. I materialet som studeres, bestemmer området for genetisk materiale, som er karakteristisk for bare en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-feil er mulige, siden samme type antistoffer kan frigjøres mot forskjellige virus - slike antistoffer kalles kryssantistoffer.

  • Høy følsomhet. PCR gjør det mulig å oppdage forårsakerens RNA selv i små mengder. Dette gjør det mulig å identifisere skjulte infeksjoner.
  • Hvordan forberede seg på bloddonasjon for PCR-studier

    For PCR-analysen av hepatitt C samles venøs blod. Vanligvis tas to porsjoner blod fra pasientens vene om gangen: den første sendes til PCR og den andre av ELISA. Dette er gjort for å mer nøyaktig vurdere hvor mye en pasient er infisert med et virus, og hvordan immunitet bekjemper den.

    Vanligvis er pasienten pålagt å følge følgende regler:

    • en blodprøve blir tatt om morgenen;
    • Intervallet mellom det siste måltidet og bloddonasjonen skal være åtte til ti timer;
    • to eller tre dager før analysen, er det nødvendig å forlate stekte og fete matvarer og alkohol;
    • i tjuefire timer før analysen, bør pasienten unngå fysisk anstrengelse: ikke bære vekter, ikke gå til treningsstudio eller svømmebasseng.

    Diagnose av hepatitt C ved bruk av PCR-studier

    Polymerasekjedereaksjon (PCR) brukes i økende grad i klinisk praksis for å bestemme årsakene til ulike virussykdommer, inkludert diagnose av viral hepatitt C.

    Råd fra hepatologer

    I 2012 var det et gjennombrudd i behandlingen av hepatitt C. Nye direktevirkende antivirale legemidler ble utviklet, som med en 97% sannsynlighet fullstendig befri deg fra sykdommen. Helt fremdeles er hepatitt C offisielt ansett som en fullstendig behandlingsbar sykdom i det medisinske samfunnet. I Russland og CIS-landene er stoffene representert av sofosbuvir, daclatasvir og ledipasvir. For øyeblikket er det mange feil på markedet. Legemidler av god kvalitet kan kun kjøpes fra lisensierte selskaper og relevant dokumentasjon.
    Gå til nettsiden til den offisielle leverandøren >>

    For sin diagnose blir PCR aktivt brukt i sine forskjellige modifikasjoner. Ved hjelp av PCR for hepatitt C er det mulig å fastslå faktumet av tilstedeværelsen i pasientens blod i RNA i hepatitt C-viruset og nøyaktig lage en diagnose.

    Analysevarianter

    PCR-teknikken ble tilgjengelig for leger flere tiår siden. Den er basert på flere kopier av et spesifikt fragment av viralt eller bakterielt RNA eller DNA, etterfulgt av deteksjon (gjenkjenning av dette fragmentet) i pasientens blodserum.

    Det er to fundamentalt forskjellige metoder for PCR-forskning: kvantitativ og kvalitativ.

    Den kvalitative metoden tillater bare å svare på spørsmålet: inneholder det biologiske materialet (serum, spytt, sædvæske, etc.) det genetiske materialet til et bestemt virus?

    Den kvantitative metoden tillater i sin tur å bestemme mengden av dette genetiske materialet, hvilket i noen tilfeller er nødvendig for å bestemme sykdomsstadiet eller for å evaluere effektiviteten av behandlingen.

    Kvalitativ versjon av PCR i sykdommen

    Bruken av en kvalitativ variant av PCR-analyse i denne sykdommen gjør det mulig å påvise tilstedeværelse av RNA av viral hepatitt C i biologiske væsker (blodserum, spytt, etc.) til pasienten. I dette tilfellet kan resultatet av analysen kun være av to typer: positiv eller negativ. Det er veldig viktig i dette tilfellet, riktig dekoding.

    • et positivt resultat i bestemmelsen av viral hepatitt C RNA forteller legen at det aktuelle viruset er i det biologiske væsken som studeres. Følgelig er pasienten smittet med dem, og derfor er det mulig med en diagnose av viral hepatitt C. Det er imidlertid alltid verdt å huske på muligheten for falske positive testresultater.
    • et negativt resultat av PCR-analyse indikerer fraværet av hepatitt C-virus-RNA i den studerte biologiske væsken, eller innholdet av RNA-molekyler i testfluidet var for lite og lå under følsomhetsgrensen for PCR-metoden. Et negativt testresultat kan ikke alltid indikere mangel på et virus i blodet. Muligheten for falsk negativ analyse bør alltid vurderes av den behandlende legen.

    Med utviklingen av den akutte form for hepatitt C-sykdom, kan utførelsen av høykvalitets PCR-studier fastslå faktumet av sykdommen så tidlig som 1-3 uker etter at viruset kommer inn i kroppen.

    Falske negative resultater kan skyldes:

    • inntrengning i det biologiske materialet (blod) av forurensende stoffer;
    • bruken av heparin for å forhindre koagulering av blod i røret eller bruk av pasienten;
    • penetrasjon av stoffer fra miljøet inn i testmaterialet som blokkerer enzymer som brukes i PCR.

    Pasienten trenger ikke å overholde spesielle anbefalinger før man utfører en kvalitativ metode for PCR-diagnostikk. For å gjøre dette trenger du bare å ta blod fra pasientens blodår for analyse.

    Kvantitativt PCR-alternativ

    Ved hjelp av kvantitativ PCR-analyse for å bestemme ikke bare det faktum av tilstedeværelsen av virus i blod, men også mengden av viruspartikler i en hvilken som helst biologisk væske (såkalt virusmengde). Ved hjelp av denne typen PCR kan du bestemme antall kopier av RNA i hepatitt C-viruset som sirkulerer i et bestemt volum.

    Resultatet av denne typen PCR er uttrykt i tallverdier, hvor enheten er internasjonale enheter per milliliter - IE / ml.

    Gjennomføring av denne type PCR-diagnose brukes på visse dager med behandling av viral hepatitt C. Den første definisjonen av viral belastning oppstår når en syke person går inn på et sykehus. Ytterligere analyser utføres 1., 4., 12. og 24. uke fra begynnelsen av bruk av medisiner. Allerede i 12. uke kan vi si om behandling er effektiv eller ikke.

    Nylig leste jeg en artikkel som forteller om bruk av komplekset av stoffer "SOFOSBUVIR DAKLATASVIR "for behandling av hepatitt C. Ved hjelp av dette komplekset kan du ALTID bli kvitt HEPATITIS C.

    Jeg var ikke vant til å stole på noen informasjon, men bestemte seg for å sjekke og bestilte. Narkotika er ikke billig, men livet er dyrere! Jeg følte ikke noen bivirkninger fra resepsjonen, jeg trodde allerede at alt var forgjeves, men en måned senere passerte jeg testene og PCR ble ikke detektert, ikke oppdaget etter en måned med behandling. Dramatisk forbedret stemning, igjen var det et ønske om å leve og nyte livet! Jeg tok medisiner i 3 måneder, og som et resultat ble viruset gjort. Prøv det og deg, og hvis noen er interessert, så lenken til artikkelen under.

    Spesielt forbered pasienten til studien er ikke nødvendig. Det anbefales ikke å røyke på analysedagen. Blod fra en vene brukes som testmateriale.

    Etter at kvantitativ PCR er utført, er det nødvendig å oversette de oppnådde resultatene. Begrepet "norm" i slike tilfeller eksisterer ikke. For dekoding brukes en spesielt utviklet grad av indikatorer:

    • forskningsresultat: ikke oppdaget - RNA av viral hepatitt C ble ikke detektert i pasientens venøse blod (resultatet er negativt), eller det er inneholdt i svært liten mengde som ikke tillater metoden å bestemme den (5 ME / ml - et positivt testresultat. Dette nivået av virusbelastning er veldig lav. Det er en indikator på effektiviteten av behandlingen og den vellykkede løpet av sykdommen;
    • testresultat:> 8 * 10 5 ME / ml - et positivt testresultat. Lastnivået er veldig høyt. Dårlig prognose av sykdommen og behovet for korreksjon eller erstatning av brukte stoffer.

    Det er viktig å huske at nivået av virusvekt som oppnås ikke gjenspeiler alvorlighetsgraden av patologien og graden av ødeleggelse av leveren. For dette er det andre metoder for biokjemisk forskning. For riktig valg av behandlingsmetoder er det nødvendig å kjenne genotypen av hepatitt C-viruset.

    Hva viser viral belastning:

    1. En høy konsentrasjon av virale partikler i biologiske væsker, spesielt i blodet, er forbundet med høy risiko for overføring av viruset under samleie eller under graviditet fra mor til fosteret.
    2. Antall virale partikler er en refleksjon av effektiviteten av de brukte stoffene, og lar deg rasjonelt velge medisiner og doser som brukes.

    Ultra-sensitiv PCR diagnostisk metode

    I dag er det mulig å gjennomgå den såkalte ultra-PCR for å bestemme hepatitt C-viruset. Denne metoden kalles fullstendig PCR med en real-time hybridiserings-fluorescensstudie.

    Når ultra PCR er indikert:

    1. I tilfeller av mistanke om viral hepatitt C hos pasienter med skjulte former av sykdommen.
    2. I tilfeller der pasienten har antistoffer mot hepatitt C-viruset, men ikke bekreftet av PCR-diagnostikk.
    3. For å vurdere effektiviteten av behandlingen og bekrefte det faktum av utvinning.
    4. Som en screeningsteknikk for tidlig påvisning av sykdommen hos mennesker i befolkningen.

    For studien brukte vanligvis venøs blod av pasienten. Sensibiliteten til ultra-metoden er mindre enn 10 IE / l, som er flere ganger høyere enn standard kvantitative og kvalitative varianter av PCR-diagnostikk. Ultra PCR administreres av en smittsom lege eller en hepatolog.

    Det avgjørende trinnet i diagnose og evaluering av behandling er korrekt tolkning av resultatene oppnådd ved ultra-PCR. Det er alltid verdt å huske at det er liten sannsynlighet for å få falske negative og falske positive resultater.

    For å eliminere slike situasjoner er det nødvendig å utelukke forurensning av blodprøver og laboratoriematerialer. Ved bruk av ultra PCR er det mulig å unngå situasjoner som fører til falske negative resultater, og dermed kompliserer diagnosen.


    Relaterte Artikler Hepatitt