Hepatitt C markører og tolkning av HCV RNA kvantitasjonsresultater
Nylig har søket etter "kvantitativ analyse av hepatitt med avkodning" i økende grad oppstått i søkemotorer av Internett-ressurser.
Faktisk er hepatittviruset spredt og farlig, sykdommen påvirker leveren. Navnet kommer fra lat. hepatitt er betennelse i leveren. Infeksjon oppstår gjennom blodet eller seksuelt. Oftere er voksne i alderen 25 til 50 år.
Det er flere typer av denne sykdommen. Hepatitt C har ikke en klar alvorlighetsgrad, men i 40-70% av tilfellene blir det kronisk, kan forårsake skrumplever og kreft. Denne sykdommen krever nøyaktig diagnose og tolkning av dataene, for hvilke teknikker som er blitt utviklet. En av dem er RNA-analyse av HCV RNA ved PCR.
RNA analyse av HCV RNA ved PCR
RNA (ribonukleinsyre) er en type makromolekyl, en av komponentene i en levende celle. RNA er ansvarlig for koding av genetisk informasjon. Hepatitt C-viruset inneholder et RNA-molekyl og har en tendens til å mutere. 6 av dens undertyper er kjent, så vel som mange undertyper.
Sykdommen i kronisk stadium fører til fibrose i leveren - bindevev vokser, organets struktur blir gradvis forstyrret. Fibrose er egnet til rettidig behandling, siden leveren ikke har gjennomgått destruktive prosesser. I motsetning til cirrhosis, alvorlig irreversibel leversykdom der fibrose kan utvikles uten å ta de nødvendige tiltakene i tide.
En person med mistanke om å ha et hepatitt B-virus bestemmes av antistoffer mot det. Hvis de ikke er, er sykdommen utelukket, hvis de er tilgjengelige, går de til PCR (polymerasekjedereaksjonen) metoden. I molekylærbiologi er det eksperimentell, men opptar et ledende sted blant metodene for å diagnostisere smittsomme sykdommer. Med den kan du øke konsentrasjonen av molekylfragmenter i prøven betydelig. 10 dager etter infeksjon, er RNA allerede mulig å bestemme i blodet.
Denne metoden er den eneste som kan oppdage sykdommen i sine tidlige stadier. På andre måter (for eksempel ved biokjemiske blodprøver) kan dette ikke gjøres, siden leveren ikke er påvirket ennå.
Metoden ble oppdaget i 1993 av biokjemiker Kerry Mullis, som han vant Nobelprisen. PCR var et gjennombrudd i medisin og vitenskap, da det ble tillatt å raskt og nøyaktig identifisere infeksjoner i blodet og andre biologiske materialer av mennesker. Metoden har med andre ord akselerert utviklingen av diagnosen infeksjonssykdommer.
RNA analyse av HCV RNA ved PCR er effektiv av følgende årsaker:
- har god følsomhet - selv en liten mengde virus i blodet oppdages;
- selve viruset er bestemt, ikke biprodukter som er opprettet av det;
- Typen av patogen er bestemt.
Forskjeller i kvantitativ analyse av HCV RNA fra kvalitativ
PCR-metoden inkluderer to hovedveier for å studere det biologiske materialet for søket etter hepatitt C-viruset:
Disse studiene har forskjellige oppgaver.
En kvalitativ analyse av hepatitt ved dekoding bekrefter tilstedeværelsen av viruset etter at antistoffer mot sykdommen allerede er funnet i blodet. Hvis studien ga et positivt resultat, så oppdages sykdommen. Med andre ord er en person smittet. Hvis det oppnås et negativt resultat, betyr dette at personen ikke er infisert, eller virusets konsentrasjon er for liten. Denne konsentrasjonen oppdages ikke på denne måten.
I tillegg er det kliniske bildet av sykdommen basert på hepatitt C markører og tolkning av analysen. Hovedmerkene er immunglobuliner (antistoffer) M og G. Deres tilstedeværelse i pasientens blod indikerer en ikke-karakteristisk prosess for en sunn organisme. På grunnlag av tilstedeværelsen av disse antistoffene etablerer pasienten som hovedregel den primære diagnosen.
Kvantitativ analyse er foreskrevet for primær deteksjon av antistoffer og om nødvendig behandling.
Også er kvantitativ analyse av hepatitt C foreskrevet for påvisning av blandet hepatitt (infeksjon med flere virus samtidig).
Kvantitativ analyse med dekoding utføres for å:
- klargjøring av den endelige diagnosen;
- bygge spådommer om sykdomsforløpet og dets behandling - utvidelse, reduksjon av behandling eller taktikkendring;
- overvåkningsterapi.
For at resultatene skal være sanne, må du følge det etablerte regimet før du donerer blod:
- kom til laboratoriet på tom mage, siste gang du kan spise 8 timer før prosedyren;
- To dager før studien alkohol, er fett og stekt mat forbudt;
- ultralyd, massasje, fysioterapi før studien ikke kan utføres;
- medisinering er forbudt for dagen, hvis det er umulig å avbryte inntaket av visse legemidler, rapporteres dette før blodprøvetaking;
- Før prosedyren anbefales det å redusere fysiske og nervøse belastninger så mye som mulig.
Oppfyllelsen av disse kravene vil være nøkkelen til å oppnå korrekte resultater av en kvantitativ analyse av hepatitt C.
Tolkning av kvantitativ analyse
Etter å ha oppnådd kvantitative analyseindikatorer, er det nødvendig å dechiffrere resultatene av tester for hepatitt C. Resultatene beregnes både i enheter i IE / ml og i eksemplarer per ml. For å få resultatene, konvertert til kopier, bruk flere teknikker.
- HCV Monitor (konverteringsfaktor til ME - 2,7);
- LCX HCV RNA (konverteringsfaktor til ME - 3,8).
Tabell. Tolkning av den kvantitative analysen av HCV RNA ved PCR.
Kvantitativ analyse av PCR for hepatitt C
Det er mange subtyper av HCV, derfor er det ikke alltid mulig å velge effektive antivirale legemidler og oppnå de ønskede resultatene i behandlingen. En rekke patogener på grunn av deres evne til å forandre strukturen, det vil si å mutere. Som et resultat har immuniteten ikke tid til å danne et kraftig respons mot det patogene middel, og legemidlene er ineffektive.
Hepatitt blir ofte diagnostisert ved skrumplever, som forutsetter sen diagnostisering av sykdommen på grunn av fravær av kliniske tegn. Kun ved laboratorieundersøkelse kan HCV detekteres i inkubasjonsperioden.
En kvantitativ analyse av hepatitt C gjør det mulig ikke bare å fastslå tilstedeværelsen av patogenet i blodet, men også for å beregne konsentrasjonen.
Anbefalinger for å forberede analysen
Spesifikt forberedelse til laboratoriediagnose er ikke nødvendig. Det er nok å følge følgende anbefalinger:
- kvantitativ analyse utføres på tom mage, med siste måltid - 8 timer før blodoppsamling;
- i to dager bør du forlate alkohol og "tunge" retter;
- Spesielt viktig er legemidlene som pasienten tar. De kan påvirke resultatet av studien, så legen skal vite om dem.
Også ikke ønskelig er tunge øvelser og fysioterapeutiske prosedyrer på dagen før blodprøvetaking. For å dekode kvantitativ analyse av hepatitt C viste seg å være pålitelig, ikke forsøm de ovennevnte anbefalingene.
Ofte mottar pasienten resultatet av analysen på en dag. Prisen på studien for å bestemme konsentrasjonen av patogenet i blodet avhenger av laboratoriet og kvaliteten på reagensene og kan nå 4000 rubler.
Laboratoriediagnose av hepatitt C
Blant de primære diagnosemetoder er ELISA, eller enzymbundet immunosorbentanalyse. Det er foreskrevet for påvisning av spesifikke antistoffer mot HCV. Dens effektivitet når 95%. Hvis transkripsjonen av studien gir et positivt resultat, er det verdt å mistenke tilstedeværelsen av patogenet i blodet.
Merk at i halvparten av emnene med en "+" -test i løpet av ytterligere diagnose, ble det ikke detektert viruset i blodet. ELISA angir i dette tilfelle en utsatt kontakt med HCV tidligere, som det fremgår av sirkulerende antistoffer.
En mer nøyaktig studie er polymerasekjedereaksjonen, eller på annen måte PCR. Det lar deg bestemme konsentrasjonen av RNA-patogen i blodet. Finne et genetisk sett av viruset i det biologiske materialet, bekrefter doktoren hepatitt C.
PCR er tildelt pasienten for å bekrefte diagnosen. Det gjør det mulig å identifisere RNA på scenen når antistoffer ikke er tilgjengelige ennå. Det finnes flere typer genetiske studier:
- kvantitativ analyse av PCR for hepatitt C, som ikke bare etablerer tilstedeværelsen av patogenet i blodet, men gir også informasjon om dens konsentrasjon;
- kvalitet - bekrefter infeksjon
- genotyping - lar deg bestemme genotypen for det patogene stoffet og velge de mest effektive legemidlene mot det.
Polymerasekjedereaksjon
Som nevnt er det flere typer laboratorietester:
- kvalitativ analyse indikerer tilstedeværelsen av et patogent middel i blodet. Denne typen diagnose har et visst nivå av respons, derfor er det ikke alltid pålitelig. For å kunne tydeliggjøre resultatene og oppnå reelle indikatorer, anbefales det å bruke et testsystem med sensitivitet på minst 50 IE / ml for forskning. Analysesatsen er "negativ respons" eller "virus ikke oppdaget." Dette indikerer fraværet av et genetisk sett av patogenet i testmaterialet. Hvis resultatet er positivt, er det nødvendig med ytterligere undersøkelse av pasienten;
- Kvantitativ analyse av PCR for hepatitt C bestemmer virusbelastningen, det vil si konsentrasjonen av det patogene middel i blodet. Resultatet av studien viser antall RNA-enheter i et fast volum biologisk væske;
Viral belastning er telling av smittsomt RNA i en milliliter av blodet som undersøkes. Måleenheter er IE / ml, men enkelte laboratorier definerer "kopier / ml", mens man peker på skjemaet for analysenorm for sammenligning og evaluering av resultater.
- genotyping. På grunn av patogenes evne til å endre valget av effektive antivirale stoffer, bør terapi baseres på genotypen. Ikke bare resultatet, men også varigheten av behandlingskurset avhenger av det. Således krever HCV 1 hepatitt utnevnelsen av medisiner i et år, men en positiv utvikling er kun observert i 60% av tilfellene. Når det gjelder andre og tredje genotyper, er de mindre resistente mot virkningen av antivirale legemidler, på grunn av hvilken effektiviteten av behandlingen overstiger 85%. Ved mottak av et slikt resultat av studien - "viruset er ikke skrevet", er det verdt å mistenke forekomsten av patogenet, som ikke er anerkjent av standard testsystemer.
Indikasjoner for analyse
Dekoding av kvantitativ analyse av hepatitt C er nødvendig for:
- videre undersøkelse av pasienten når antistoffer mot HCV ble påvist under ELISA;
- bekreftelse av diagnosen;
- etablere virusbelastning under blandet infeksjon, når en person er smittet med flere typer patogener;
- bestemme behandlingstaktikk (valg av antivirale legemidler, erstatning eller fullføring av terapi);
- vurdere dynamikken i sykdomsprogresjonen, samt effektiviteten av narkotika;
- bestemme stadiet av patologi (akutt, kronisk).
PCR har følgende fordeler:
- god følsomhet, som gjør det mulig å beregne til og med en liten mengde av viruset;
- identifikasjon av selve patogenet (RNA) og ikke antigener;
- spesifisiteten til teknikken - etablering av en bestemt type patogen agent;
- hastighet for å oppnå resultater, fordi analyse ikke krever dyrking av avlinger i næringsmedium. Svaret er klart om 5 timer;
- universalitet - lar deg identifisere det genetiske settet av ulike patogener, både RNA og DNA-holdig (hepatitt B);
- påvisning av latent infeksjon.
Laboratorieforskning bidrar til å bekrefte diagnosen og er en integrert del av en omfattende undersøkelse (analyse av kliniske symptomer, resultater av ELISA og biokjemi).
I tillegg er PCR mye brukt i allergologi, genetikk, og også for å etablere fakta om faderskap.
Dekoding av kvantitativ analyse av hepatitt C-viruset
Evalueringen av resultatene av laboratoriediagnostikk utføres av en lege ved å sammenligne dataene som er oppnådd med normen.
Hva er normer for kvantifisering av hepatitt C?
Hepatitt C-viruset kan multiplisere i blodceller og forårsake lymfoproliferative sykdommer. Takket være de mange mutasjonene, svetter kroppens immunforsvar, og genotyper og subtyper av viruset opptrer. Med riktig og rettidig bestemmelse av en bestemt type, avhenger effekten av antiviral terapi. Faren for infeksjon er at sykdommen er asymptomatisk. Kun 15 prosent av 100 kan oppleve kvalme og oppkast, vekttap og feber.
Definisjon av hepatitt C-virus
Standardhastigheten til hepatitt C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskade som skyldes et akutt eller kronisk sykdomsforløp. Hepatitt C, nemlig RNA-viruset til Togaviridae-familien, er ekstremt vedvarende, overføres ved blodtransfusjon eller bruk av ikke-sterile objekter, feil hygieneforsyning, etc. Kvantitativ analyse lar deg undersøke blodet og identifisere den genetiske strukturen til det infiserte viruset.
For å bestemme hepatitt C og dens genotyper utføres kvantitativ analyse. Avhengig av analysatoren kan tre nivåer av RNA virus forekomst bestemmes.
Subtypene kan produsere ulike modifikasjoner, så spesifisiteten og følsomheten til analysatoren må være hundre prosent. I tillegg til å oppdage sykdommen hos en pasient, er det nødvendig å bestemme graden av alvorlighetsgraden. Noen laboratorier har ikke alle dataene om RNA-virusdekoding, det er en mulighet for en falsk positiv respons.
Forskning på hepatitt C vil være mer nøyaktig når man studerer disse indikatorene:
Ved å gi oppmerksomhet til resultatene av disse indikatorene og kroppens generelle tilstand, vises et resultat som viser infeksjonsgraden, formen og antall hepatitt C-celler i blodet. Dette bidrar til helbredelsesprosessen og effektiviteten av antiviral terapi.
Typer av analyse for hepatitt C
En flerdimensjonal kjedereaksjon (PCR) gir en ide om antall DNA-partikler i pasientanalyser tatt, og vil riktig identifisere det smittefarlige middel.
Årsaker til smittsomme sykdommer kan forekomme. En infeksjon i leveren, som hepatitt C, kan behandles i vår tid når den oppdages i tide. Hvis et virus er mistenkt, utføres PCR-analyse.
Gitt at symptomene på viruset i lang tid kan maskeres, kan en person ikke føle sykdommenes utbrudd. Men med en grundig undersøkelse i 60-70% av tilfellene, oppdages hepatitt C, den første analysen, som er ELISA, følger PCR-diagnosen. Analysen utføres i visse perioder for å bestemme sykdomsstadiet og foreskrive riktig behandling. For å unngå det, uten å anvende alle disse prosedyrene, er det mulig å bli vaccinert mot hepatitt.
Kvalitativ og kvantitativ analyse
Det er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen av den første er at den bestemmer tilstedeværelsen av infeksjon i blodet. Og det betyr at viruset infiserer friske leverceller. Når antistoffer mot hepatitt C er funnet hos en pasient, utføres en kvalitativ test umiddelbart. Hastigheten som resultatet skal gi er "ikke oppdaget i blodet". Ved bestemmelse av konsentrasjonen av et virus, er det behov for å kjenne følsomheten til diagnosesystemet, siden folk som gjennomgår antiviral terapi kan gjøre analysen. Analysatorens følsomhetsgrad bør ikke være mindre enn 50 IE / ml.
Når et virus oppdages, utføres en kvantitativ analyse, det vil si virusbelastningen, som bestemmer virusets konsentrasjon i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen.
Viral RNA, som er i en viss mengde blod, er definert som normen med en hastighet på 1 ml per 1 cm kubikk. Etter kvantifisering av virusbelastningen er det mulig å bedømme infeksjonsgraden av det fortsatt uinfiserte miljøet. Så snart konsentrasjonen av hepatitt C stiger i blodet, er det nødvendig å isolere fra miljøet.
Det er viktig i de første stadiene å oppdage graden av konsentrasjon av hepatitt, for å bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis graden av hepatitt C overskrides med mer enn 800 000 IE / ml, anses den for høy, med en økning på opptil en million kritisk. Hvis det kvantitative området er mindre enn 400 000 IE / ml, anses det at infeksjonen av de som er rundt, er mindre sannsynlig. Denne figuren gjør det klart at hepatitt C er tilstede i kroppen i svært små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative verdien av RNA-partiklene av viruset, så det blir gjenutnevnt flere ganger for nøyaktigheten av diagnosen.
Resultater av kvantitativ analyse
Oppgaven med å bestemme mengden av virusbelastning i blodet til en pasient er identifikasjonen av infeksjonsgraden til andre.
Resultatene av PCR-analysen:
- Et positivt svar betyr at det er infeksjon i det biologiske materialet. Analysen tillater å bestemme eksakt antall infiserte celler.
- Det negative svaret indikerer fraværet av infeksjon, som er nøye søkt i kroppen.
Metoden for kvantitativ bestemmelse av hepatitt C er nøyaktig og informativ, utført på utstyr med høy følsomhet. Dekryptering av resultatene av analysen lar deg finne ut om infeksjonen og dens spesifikasjoner, for å se det minste antallet infiserte celler på svært sensitive analysatorer.
False-positive eller motsatte resultater er sjelden gitt av analysen, oftere skjer dette i immunanalyser.
PCR-analyse for hepatitt C
Diagnose av hepatitt inkluderer en rekke tester for å bestemme tilstedeværelsen av et virus i blodet. En av måtene å oppdage en sykdom er en slik undersøkelsesmetode som PCR for hepatitt C. Hva er det, hvorfor er analysen av PCR for hepatitt så viktig som den utføres og dechifrert?
Hva er det
Polymerase kjede reaksjon, eller PCR, brukes til å diagnostisere magesår, kolitt, enteritt. Men den største fordelen ligger i det faktum at det bidrar til å oppdage både hepatitt C-viruset og antistoffene i kroppen, noe som har evnen til ikke å forårsake immunsystemet reaksjoner på grunn av deres evne til å mutere.
Studien og dens essens ligger i etableringen av visse forhold under hvilke kjedereaksjonen av hepatitt-RNA forekommer. Hvis det, når det sammenlignes med nukleotidsekvensen for hepatitt C-viruset, forekommer tilfeldigheter, dette indikerer at det er virale partikler i blodet, og desintegreringsprosesser forekommer i leveren. Hvis mengden av virus er under et visst nivå, blir en negativ diagnose, og hvis høyere, en positiv en.
Det finnes to typer blodprøver ved hjelp av PCR-metoden for hepatitt: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.
Kvantitativ PCR, som nevnt ovenfor, bestemmer konsentrasjonen av RNA i hepatittviruset. I tillegg er han i stand til å gi informasjon om intensiteten som patologien utvikler, og effektiviteten av den foreskrevne behandlingen. En kvantitativ analyse av hepatitt C er ekstremt viktig fordi det løser motstand mot virkningen av antivirale legemidler og lar deg justere behandlingen.
Etter at pasienten har gjennomgått en behandling, bidrar PCR til å bestemme den videre rekkefølgen av avtaler. I noen tilfeller er behovet for ytterligere undersøkelser. For eksempel, hvis nivået av ALP økes (men ikke mer enn 2 ganger innen seks måneder), og transkripsjonen av analysen indikerer en virusbelastning over 105 IE / ml, foreskrives pasienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse av PCR avslører en sterk betennelse og fibrose, foreskrives pasienten et behandlingsforløp med antivirale legemidler.
I situasjoner hvor et stort antall virale partikler kombineres med høy ALT, bør pasienten umiddelbart behandles uten ytterligere diagnostiske tiltak.
Ta denne testen og finn ut om du har leverproblemer.
Kun kvalifiserte og erfarne spesialister kan deififere kvalitativt i kvantitativ analyse av blod for hepatitt, og moderne teknologier bidrar til å gjøre dette med lav konsentrasjon av viruset i blodet.
Kvalitativ analyse av PCR er rettet mot å bestemme og bekrefte den faktiske forekomsten av viruset i kroppen. Det utføres når antistoffer mot hepatitt detekteres i blodet. Det er en kvalitativ analyse av hepatitt som garanterer nøyaktigheten av resultatet med 100%, og lar deg gjøre diagnose i de tidlige stadiene av sykdommen, som gjør det mulig å starte kampen mot hepatitt allerede i de første ukene etter infeksjon og øker sjansene for fullstendig gjenoppretting (i tilfelle sykdommen B).
Fordeler med PCR
I studien ved PCR og deklarering av en blodprøve for hepatitt, kan du også bestemme genotypen av patogenet. Totalt er det 6 genotyper av viruset og et stort antall subtyper, men i vår region er 1, 2 og 3 genotyper blitt vanlige.
Andre fordeler med denne typen diagnose er:
- høy nøyaktighet av de innhentede indikatorene og lav sannsynlighet for feil i dem;
- høyt følsomhetsnivå for virale partikler i blodet;
- muligheten til å identifisere flere patogener samtidig;
- diagnose av patogene intracellulære mikroorganismer med høy antigenvariabilitet;
- Ved å arbeide med dekoding av analysen for hepatitt, kan du oppdage skjulte nåværende infeksjoner.
Hvem er utnevnt
Følgende kategorier av mennesker må passere PCR-analysen for hepatitt:
- gravide kvinner;
- helsepersonell;
- potensielle blod- og organdonorer;
- de som har karakteristiske tegn på sykdommen;
- HIV-infiserte individer;
- rusmisbrukere
- person promiskuøse.
Hvordan utføres analysen og er det nødvendig å forberede seg på det
Blodprøvetaking for PCR er utført fra en vene. Som regel skjer dette om morgenen før personen har spist, fordi etter å ha spist et måltid, skal minst 8 timer passere. I ekstreme tilfeller kan blod tas til undersøkelse om dagen eller kvelden, men tidsgapet mellom analyse og inntak av mat bør være minst 5 timer.
Den menneskelige faktoren kan kvantitativt påvirke resultatene: Nøyaktigheten i noen tilfeller reduseres fra 100% til 95%, derfor er det nødvendig å forberede bloddonasjon på forhånd. Kvaliteten på biomaterialet for analyse vil være hensiktsmessig når pasienten følger følgende regler:
- før du gir blod, kan du bare drikke rent vann;
- To dager før studien er det nødvendig å nekte å godta stekte og fete matvarer, samt alkoholholdige drikker;
- En dag før besøket til laboratoriet bør slutte å ta medisiner. Hvis dette ikke er mulig, er det viktig å informere laboratorietekniker og behandlende lege.
- dagen før du trenger å unngå stressende situasjoner og fysisk anstrengelse;
- ultralyd, røntgen og instrumentelle undersøkelser bør ikke utføres kort før bloddonasjon;
- i timen før analysen må du avstå fra å røyke;
- 20 minutter før du donerer blod, må du bli distrahert, roe ned og puste ut.
Hvis et barn under 5 år passerer studien, bør foreldrene sørge for at han drikker kokt vann hvert 10. minutt i en halv time før du tar biomaterialet.
Dekryptering av mottatte data
Dekoding av analysen kan representeres av ord (i tilfelle av en kvalitativ studie), for eksempel "ikke oppdaget" eller "under rekkevidden av endringer". I det første tilfellet indikerer dette at infeksjonen ikke ble oppdaget. I det andre - at viruset er tilstede, men i små mengder. Denne situasjonen krever re-forskning.
Viral belastning bestemmes av mengden infeksiøs RNA og refereres til som IE / ml eller kopier / ml.
En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitt C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.
Konsentrasjonen av virus i blodet kan være:
- lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
- medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
- høy: mer enn 8x10 5 IE / ml.
Kvantitativ og kvalitativ analyse av PCR for hepatitt tillater å bestemme tilstedeværelsen av viruset i kroppen og nivået av konsentrasjonen. En flerdimensjonal kjedereaksjon er i stand til å diagnostisere sykdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendig at pasientene så snart som mulig kontakter medisinske institusjoner for å få hjelp og følg nøye anbefalingene fra den behandlende legen.
Hepatitt C PCR
Legg igjen en kommentar 15,344
Hepatitt C er en av de mest farlige og vanskelig å diagnostisere virus sykdommer. For å bestemme sykdommen brukes PCR-metoden for hepatitt C. Dette er en ny høyteknologisk teknikk som lar deg undersøke genetisk materiale for eksistensen av liv i de minste partiklene (molekylene) og de minste mengdene. Hepatittviruset er svært motstandsdyktig, det kan lenge leve i miljøet og er godt etablert i menneskekroppen.
Hva er PCR?
I dag er det et stort antall ulike sykdommer. Og ikke et mindre antall metoder for deres besluttsomhet. Siden infeksjonsagenter har lært å slå rot i miljøet og utvikle seg lett, er de nyeste teknologiene brukt til å diagnostisere dem. Polymerasekjedereaksjon (PCR) er en raskere og mer nøyaktig metode som søker å finne årsaken til sykdommen ved å øke delen av hepatittvirus DNA i prøven betydelig. Om han skriver ofte: leter etter en nål i en høstak, og bygger deretter en stabel nåler.
Typer av PCR-metode
Allokere kvalitativ og kvantitativ analyse av hepatitt. For å avgjøre om viruset er i kroppen, og de som har funnet antistoffer mot hepatitt C, utfører test av høy kvalitet. Dekoderingsanalyse gir resultatet: "positivt"; "Negative". Negativ mening betyr: enten personen er sunn eller det er ikke nok midler i blodet og de kan ikke bli funnet. Derfor er det verdt å gjennomføre en omprøving etter en stund.
Et positivt resultat indikerer eksistensen av en infeksjon. Dette er nesten alltid den eksakte verdien. Feilfulle resultater er vanligvis avhengig av den menneskelige faktoren (feil lagring eller manglende overholdelse av metodens regler). Når frekvensen er, er resultatet negativt. Før testingen er det ingen spesielle regler, bare ta blod fra en blodåre.
Hvis det er funnet, utfør en kvantitativ analyse (viral belastning) - den gir numeriske verdier: hvor mye RNA i hepatittviruset er for tiden i det foreskrevne volumet av materialet som er studert. Med den aktive utviklingen av infeksjon, kan den detekteres 1-2 uker i en infisert person. Blod er også vanligvis undersøkt fordi agenser sirkulerer fritt i den.
Egenskaper ved kvantitativ PCR analyse
Forskjellen i kvantitativ analyse er at ikke alt passerer. Kvalitativ - bestemmer tilstedeværelsen og kvantitativ - hjelper med å bekrefte konklusjonen av "hepatittvirus", prognosen for sykdomsforløpet og bestemme løpet av behandlingen. Hvor effektiv behandlingen er, er ved antall RNA før og under behandlingen. Også med sin hjelp bestemme utnevnelsen av doser av narkotika.
vitnesbyrd
Som regel blir det produsert før behandlingsstart. De viktigste indikasjonene kan være:
- bestemmelse av viral belastning og kontroll av antiviral terapi;
- PCR av høy kvalitet funnet antistoffer av hepatitt C;
- finne akutt og kronisk hepatitt C;
- eksistensen av blandet hepatitt;
- når du planlegger en behandling
- hvis en kvalitativ studie fortsatt finner sykdommenes tilstedeværelse etter den tolvte uken av behandlingen.
Se også hvilken viral belastning i hepatitt: lav terapi utføres med hell; økt - behandlingen er ikke effektiv og må endres.
Hva utføres på ulike stadier av sykdommen?
I ulike faser av sykdommen utføres forskning for å gi en gjennomgang av fordelene ved behandling og planlegging av varigheten. Med gode svar på terapi er det forkortet. Ellers, med langsom tilbaketrekking av viruset, er behandlingsforløpet forlenget. PCR for hepatitt gjør 1,4, 12, 24 ukers behandling. Når indikatorer ikke faller etter 12 uker, konkluderer de at terapi ikke passer for denne organismen. Denne analysen brukes til å bestemme hvor aktiv infeksjonen er og hvor sannsynlig det er å overføre det. For eksempel, under graviditet er det fare for å infisere en baby. Etter terapi identifiserer du risikoen for sykdomsfall.
transkripsjon
Etter å ha gjennomført en studie, kan analysen deklareres ikke i tall, men med ordene: "under måleområdet" og "ikke oppdaget". Kvantitativ PCR er mer kvalitativ sensitiv. Konklusjonen "ikke oppdaget" kan si at infeksjonen ikke ble funnet. "Under måleområdet" - testen fant ikke viruset, men det har en liten verdi. I denne situasjonen, gjør en andre studie.
Viral belastning er bestemmelsen av antall infeksiøse RNA i et foreskrevet volum blod (kvantitativt 1 ml = 1 kubikkcentimeter). Formulert i internasjonale målinger IE / ml. Separate laboratorier angir kopier / ml. Ulike testsystemer kan tyde på oversettelsen av komponenter i internasjonale verdier på egen måte. Tabell 1. Dekryptering av kvantitativ analyse av virus RNA
Graden av kvantitativ analyse for hepatitt C
Når en person er sunn, er normen - "ikke oppdaget". Hos syke mennesker vil reduksjonen i virusdose i resultatene per logaritmisk enhet være normen, noe som manifesteres av en reduksjon i antall nuller i analysen med en (for eksempel fra 1 * 106 IE / ml til 1 * 105 IE / ml). Grensene for omfanget av viruskonsentrasjon som bestemmer forsterkeren er innenfor området 1,8 * 102-2,4 * 107 IE / ml. Behandling av utfallet:
- lav konsentrasjon - fra 600 IE / ml til 3 * 104 IE / ml;
- medium - fra 3 * 104 IE / ml til 8 * 105 IE / ml;
- høyt - over 8 * 105 IE / ml.
avvik
Når endringer i testresultater er ute av normen, kan dette tyde på sykdomsavkastning og multiplikasjon av viruset. Visse faktorer kan påvirke mottak av et upålitelig resultat, for eksempel forurensning av prøver; tilstedeværelsen i blodet av heparin og stoffer som reduserer virkningen av komponentene i PCR; laboratoriefeil; manglende overholdelse av testens regler.
Også resultatet i flere laboratorier kan variere, kanskje det var en annen forskningsmetode. For å finne ut hvordan påvirket leveren er og faren for sykdommen, er det ikke nok å utføre kvantitativ PCR av hepatitt. I tillegg gjennomgår biokjemiske prosedyrer og biopsi.
Når du planlegger en behandling, er viruset genotypet. På grunn av at hepatitt C er i stand til å forandre, er det flere grupper. For ulike behandlingstyper kan variere. Det er situasjoner når flere arter er tilstede, men analysen finner en som hersker. Deretter gjenopptas testen.
Fordeler med metoden
PCR-metoden gjør det mulig å gi en mening og foreskrive riktig behandling. Fordeler med teknikken:
- Resultatets hastighet - krever ikke skillet og dyrking av arter av patogenet. Ved å automatisere prosessen kan du behandle og studere materialet med resultatet i 4-5 timer.
- Direktiteten til å bestemme patogenet - å finne en spesiell del av DNA, indikerer direkte forekomsten av sykdommen. For eksempel finner ELISA - proteinmarkører (avfallsprodukter av bakterier), som ikke gir nøyaktig bevis på forekomsten av sykdommen.
- Specificitet - Et stoff er studert som bare er karakteristisk for et spesifikt patogen, som utelukker reaksjonen på falske ko-reagerende midler.
- Følsomhet - kan oppdage den minste mengden virusDescription av totalen.
- Universitet - er basert på å finne DNA-fragmenter eller RNA av bestemte organismer. Dette gjør det mulig å utføre diagnostikk for noen agenter fra ett biomateriale, hvis andre metoder er maktløse.
- Detekterer ikke bare åpenbare, men også latente infeksjoner - effektive for å studere agenter av vanskelig å vokse, ikke vokse, vedvarende.
- https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ
Gjennom denne studien kan alle bli diagnostisert for å verifisere fraværet av sykdommen. Men for pålitelige fakta må du følge instruksjonene strengt. PCR brukes i ulike felt: rettsmedisin, for faderskapsbestemmelse, for diagnostisering av ulike virus, for å oppdage narkotikaallergier, genkloning, mutagenese, DNA-sekvensering.
Hepatitt C viral belastning: dekoding
✓ Artikkel verifisert av lege
Viral belastning er mengden eller innholdet i pasientens blod av virale ribonukleinsyrer (genetisk materiale). Basert på antall RNA-celler som er funnet, er det mulig å utvikle et virus og om det er infeksjon av nye celler. Denne testen skal utføres dersom pasienten har antistoffer mot HCV. Antall celler med genetisk materiale blir målt per milliliter blod. Etter å ha utført en slik test, vil du lære om din egen diagnose av "hepatitt C", eller mangelen derav.
Hepatitt C transkripsjonsanalyse
diagnostisere
Hepatitt C-virus
Følgende typer testing brukes:
- kvalitativt tar sikte på å oppdage tilstedeværelsen av hepatitt C, nemlig virusets RNA. En slik test gjør det mulig å bekrefte eller nekte saken. Ved avkjøringen får du et positivt svar (virus oppdaget) eller negativt (resultatene går ikke utover normen);
- kvantitativt, som vi allerede har nevnt tidligere, brukes ofte til å diagnostisere tilstanden til pasienter i senere stadier av hepatitt. Testresultatene bidrar til å gjøre endringer i behandlingen i samsvar med pasientens nåværende tilstand, for å forutsi resultatene av behandling med et bestemt legemiddel. En slik test gir også et klart bilde av perioder med forverring og remisjon av hepatitt.
Testing for tilstedeværelse av antistoffer mot hepatitt C-viruset (HCV)
OraQuick HCV-Hepatitt C Rapid Test
Bruken av slike diagnostiske metoder startet relativt nylig, men den høye nøyaktigheten og kvaliteten på forskningen er allerede bevist.
Biokjemisk blodprøve
testing
Mengden av genetisk materiale i blodet er den virale belastningen. I tilfelle når det etablerte antallet virale celler er stort, er det mulig å bedømme prosessen med destruksjon av friske celler. Følgelig bør pasienten behandles på en slik måte at man raskt oppnår en periode med remisjon og stopper infeksjonen.
I medisinsk praksis utføres vanligvis vurdering av viral belastning dersom pasienten har oppdaget en mengde antistoffer som overskrider normen. For å bestemme mengden av RNA ved å bruke tre metoder.
1. PCR eller polymerasekjedereaksjon kan oppdage selv en svært liten tilstedeværelse av hepatittviruset.
PCR gjør at du kan multiplisere mengden av mikrobiell celle DNA
Den svært følsomme metoden har blitt den mest populære og populære blant personer som har blitt diagnostisert med mistanke om hepatitt C. PCR vil se antistoffer som produseres av kroppen som svar på infeksjon, selv om det er svært få av dem så langt. En uinfisert person vil få et negativt resultat, siden PCR ikke vil oppdage noen antistoffer eller genetisk materiale.
Når RNA er til stede i pasienten, legen betyr tildeler tilstrekkelig terapeutiske behandlinger og medisiner for herding virus, bærer også ytterligere diagnostikk (i det minste ultralyd lever og tar en biologisk prøve av levervev).
Diagnose av hepatitt C
2. Metoden for forgrenet DNA. Det er mye billigere i kostnaden enn den forrige testen, derfor praktiseres det i statlige laboratorier for å bestemme diagnosen. Det er praktisk at det gjør det mulig å finne ut om virus-RNA er tilstede i blodet på en gang hos et stort antall pasienter. Selvfølgelig har metoden sine ulemper, den viktigste er mindre enn den for PCR, følsomhet. Når PCR oppdager tilstedeværelsen av et virus, kan denne metoden gi et negativt resultat. Derfor brukes den av leger ofte i tilfeller der viruset er uten tvil, men det er behov for å bekrefte diagnosen.
Metoden for "forgrenet" DNA (bDNA)
3. TMA-metoden (transkripsjonal amplifikasjon) har samme mekanisme som de to tidligere metodene, oppdager Hepatitt C RNA i blodet. Dette er den rimeligste og rimeligste måten å lære om sykdommens tilstedeværelse. Det er i stand til å oppdage selv små konsentrasjoner av RNA, derfor er den aktivt brukt i diagnosen hepatitt.
Grenser for viral belastning i hepatitt
Farlig viral belastning
Hvor farlig en person er for andre er bestemt av konsentrasjonen av viral RNA i kroppen. Denne indikatoren gir også et svar på spørsmålet om hvordan effektiv behandling av behandling vil være. Derfor, hvis et svært lite antall RNA er oppdaget, kan man dømme den hurtige utvinningen av personen.
Hepatitt C-virus (HCV, HCV)
Når vi går tilbake til resultatene med høy viral belastning, bemerker vi at denne indikatoren kan føre til komplikasjoner som påvirker alle indre organer, og ikke bare leveren. For å overvinne viruset i den aktive fasen, når infeksjon av friske celler fortsetter, foreskrives pasienten en lang løpet av komplisert terapi. I løpet av behandlingen må pasienten periodisk gjennomgå en test for å bestemme virusbelastningen slik at leger er klar over effekten av enkelte stoffer og deres manglende evne til å motstå andres sykdom. I samsvar med testresultatet må behandlingen justeres. Hvis testen viser en positiv trend og mengden av RNA er redusert, reduseres behandlingen eller pasienten overføres til vedlikeholdsbehandling. Selvfølgelig kan virusbelastningstesten ikke gi et objektivt bilde av pasientens tilstand, derfor bør den utføres i forbindelse med andre tester og diagnostiske tiltak.
Strukturen av hepatitt C-viruset
Livssyklusen til hepatitt C-virus
Dato for analyse
Maksimalt en uke senere vil pasienten få resultatene av sin virale belastningstest. Hvis vi snakker om en pasient som blir behandlet for hepatitt C, må han gjøre neste test i en måned; Engangs laboratorieanalyse av denne typen utføres til mennesker i hvis blodantistoffer er blitt funnet; og en gang i året hvis det er en stabil viral respons. Ifølge resultatene fra ulike analyser kan resultatet gis i formatet av en negativ eller positiv respons eller med en indikasjon på en bestemt mengde virus RNA.
Hepatittprøver
Legen kan også forlate posten "RNA oppdaget under måleområdet." Dette betyr at RNA er tilstede i pasienten, men de er så små at metoden som brukes ikke kunne vise et bestemt beløp (ytterligere diagnostikk kreves).
Kvantitative analyser er gode fordi de hjelper leger å avgjøre i hvilken grad de trenger å flytte til neste behandlingsstadium eller trenger å endre noe i den. Og lar deg også oppdage folk som, på grunn av det høye innholdet av RNA-virus i blodet, kan være farlige for andre.
Analysen er gitt på tom mage, venøst blod er det mest informative.
Laboratoriediagnose av hepatitt C
transkripsjon
Normalt må RNA være fraværende i blodet. Måleenhet IE / ml (mengde RNA per milliliter blod). Med hensyn til tolkningen av resultatene anses innholdet av RNA over normen å være en indikator fra 800.000 IE / ml.
Noen laboratorier gir resultater av følgende form 4x110 IE / ml. I dette tilfellet anses lav viremi (virusinnhold i blodet) å være et resultat fra 600 IE / ml til 3x104 IE / ml, i gjennomsnitt 3x104 IE / ml til 8x105 IE / ml. Utenfor normen er indikatoren mer enn 8x105 IE / ml (800.000 IE / ml i henhold til en annen klassifisering).
Klar hepatittanalyse
Hepatitt C virusvekt
Analysefeil
Noen ganger endres de oppgitte resultatene i henhold til hvordan blodet som ble samlet for analyse, ble lagret og behandlet. Det er verdt å merke seg at det samme blodet kan gi forskjellige resultater i to laboratorier.
Blodtest for viral belastning
I tilfelle når blodet var forurenset med kjemiske eller proteinforbindelser, ble heparin lagret feil, vil analysen være unøyaktig eller feilaktig.
For at virusbelastningen skal justeres riktig, er det nødvendig å periodisk besøke laboratoriet og donere blod. Tross alt viser nedgangen i indeksen i behandlingsperioden vellykket bruk av stoffet. I dette tilfellet sier leger at den terapeutiske effekten førte til en virologisk respons.
RNA kan begynne å avta allerede på den tredje behandlingsdagen, som testen vil vise øyeblikkelig.
Tar blod for analyse - foto
Det antas at terapien er vellykket hvis i løpet av behandlingen faller den virale lastindeksen med minst to enheter. Hvis RNA-nivået forblir på samme nivå eller til og med økt, vil det mest sannsynlige at stoffet som brukes ikke, bli kvitt virus hepatitt C. Hvis viral belastningen har økt ved slutten av behandlingsforløpet, er det mest sannsynlig at det er et tilbakefall. Det er derfor folk som har lykkes å overvinne hepatitt, bør fortsette med jevne mellomrom å passere en virusbelastningstest for å overvåke tilstanden til kroppen.
PCR-studie for hepatitt C: typer, indikasjoner, transkripsjon
Viral hepatitt C er en alvorlig sykdom som oppstår med skade på leveren. I åtti prosent av pasientene blir det kronisk. Viruset multipliserer i leveren celler - hepatocytter - og forårsaker deres død. Dødt vev erstattes av bindevev, fibrose utvikler seg.
Etter hvert som fibrose utvikler seg, lever ikke i stand til å utføre sine funksjoner, begynner levercirrhose, noe som er farlig på grunn av komplikasjoner: økt trykk i portalveinsystemet, gastrointestinal blødning, nedsatt blodkoagulasjon, mentale forandringer på grunn av skade på hjernekjerner ved giftige produkter.
Årsaken til sykdommen er infeksjon av et virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen RNA-virus. Dette betyr at det genetiske materialet ved hvilket patogenene av patogenet syntetiseres, er kodet i ribonukleinsyremolekylet. Infeksjon skjer gjennom blod, seksuelt, og fra en gravid kvinne til fosteret. Dessverre kan en tilstrekkelig stor mengde tid passere mellom infeksjon og begynnelsen av antistoffproduksjonen - fra to uker til seks måneder. Dette tillater ikke å bestemme infeksjonen ved hjelp av metoden for immunoassay og begynne behandling i de tidlige stadier.
Hva er PCR-analyse?
PCR er en metode for molekylær analyse, som gjør det mulig å oppdage patogenes genetiske materiale allerede i den første uken etter infeksjon ved bruk av polymerasekjedereaksjon. Studien har høy spesifisitet, nøyaktighet, og tillater ikke bare å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også dets konsentrasjon og genotype.
For studien tas en pasients blod der virus-RNA kan være lokalisert. Primerer legges til de kunstig syntetiserte regioner av det ønskede gen av liten lengde, og RNA-polymerase er et spesielt enzym som øker mengden av genetisk materiale av patogenet flere ganger. Ved hjelp av et spesielt apparat, utføres flere sykluser av oppvarming og kjøling. Deretter analyseres materialet og sammenlignes med de kjente genene til viruset, på basis av hvilket det dannes en konklusjon om nærvær eller fravær av infeksjon.
Typer av PCR-analyse for hepatitt C
Det finnes tre typer PCR-analyse:
- Kvalitativ analyse av PCR. Den første fasen av studien. Det lar deg identifisere genetisk materiale av viruset i blodet.
Indikasjoner for PCR-analyse for hepatitt C
PCR-studien er foreskrevet i følgende tilfeller:
- kontakt med en syk person der infeksjon kan oppstå;
- positiv enzymimmunoassay;
- tegn på skrumplever: endringer i leverens størrelse, utbredelse av milten, utseende på underlivet av subkutan venøs plexus;
- Utseendet på symptomer på leverskade: smerte i høyre underliv, guling av huden;
- økt aktivitet av ALT og AST i den biokjemiske analysen av blod;
- før behandling begynner å bestemme viral belastning;
- å overvåke effekten av antiviral terapi;
- etter behandling for å kontrollere tilbakefall
- i nærvær av diagnostisert hepatitt B, for å utelukke blandet leverskade.
Forklaring av PCR-studier på hepatitt C
Dekoding av PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitt C skal utføres av en spesialist på hepatolog eller smittsomme sykdommer. Analysere resultatene av PCR er nødvendig i kombinasjon med data om biokjemisk analyse av blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalifisert lege vil kunne analysere resultatene av forskning og, basert på dem, foreskrive riktig behandling.
Dekoding av kvalitativ analyse.
I det analyserte biologiske materialet fant det genetiske materialet til patogenet. Infeksjon bekreftet.
Infeksjon er fraværende, eller mengden av patogenens RNA er under følsomhetsgrensen.
Dekoding av kvantitativ analyse.
Normal sats for friske mennesker. Det betyr at det ikke finnes hepatitt C-RNA i materialet som er studert, eller konsentrasjonen er under følsomhetsgrensen for studien.
RNA-konsentrasjonen er under rekkevidden av kvantifisering. Disse resultatene tolkes svært nøye, korrelerer dem med data fra andre studier, ofte gjenstudier.
Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon regnes som lav. Vanligvis betyr en reduksjon i mengden virus at terapien er vellykket.
Mer enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml
Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon anses høy.
Mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml
Mengden av RNA er over den øvre grense for kvantifikasjonsområdet. Det er umulig å trekke konklusjoner om graden av virusbelastning med dette resultatet. Vanligvis i slike tilfeller gjentas testen med fortynning av en blodprøve.
Dekoding av genotyping.
Oppdaget RNA av en bestemt genotype
Hepatitt C-virus av en bestemt genotype og subtype ble påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romerske tall og latinske bokstaver, for eksempel - 1a, 2b. Totalt er det syv genotyper og sekstisju subtyper, men i Russland er det bare tre første typer.
Hepatitt C virus RNA oppdaget
RNA ble funnet i blodet av en sjelden genotype for Russland, som ikke kan tilskrives den første, andre eller tredje typen. Mer forskning er nødvendig.
Dette resultatet indikerer at pasienten er sunn, eller at mengden av patogen-RNA er for liten.
Det er mulig at PCR-analyse for hepatitt C er negativ, og enzymbundet immunosorbentanalyse gjenkjenner antistoffer mot viruset. Dette betyr at pasienten hadde akutt hepatitt C og gjenopprettet alene. Omtrent tjue tilfeller av infeksjon resulterer i spontan utvinning dersom pasientens kropp har tilstrekkelig motstand mot infeksjonen.
Selv om PCR er en svært nøyaktig analyse, kan resultatet bli forvrengt i følgende situasjoner:
- blodet ble transportert til laboratoriet under upassende forhold, temperaturen ble brutt;
- biomaterialprøven var forurenset;
- det var rester av heparin og andre antikoagulantia i blodet;
- Undersøkere ble funnet å være inhibitorer - stoffer som reduserer eller stopper polymerasekjedereaksjonen.
Fordelene med PCR over andre metoder
- Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materialet til det forårsakende middel. Ved hjelp av immunfluorescensanalyse kan bare immunoglobuliner bestemmes - stoffer som kroppen produserer som svar på en infeksjon. I tilfelle infeksjon med hepatitt C, kan intervallet mellom infeksjon og utbruddet av immunresponsen være flere uker og måneder, da vil ELISA være ineffektivt. PCR vil gi svar i den første uken etter infeksjon.
Hvordan forberede seg på bloddonasjon for PCR-studier
For PCR-analysen av hepatitt C samles venøs blod. Vanligvis tas to porsjoner blod fra pasientens vene om gangen: den første sendes til PCR og den andre av ELISA. Dette er gjort for å mer nøyaktig vurdere hvor mye en pasient er infisert med et virus, og hvordan immunitet bekjemper den.
Vanligvis er pasienten pålagt å følge følgende regler:
- en blodprøve blir tatt om morgenen;
- Intervallet mellom det siste måltidet og bloddonasjonen skal være åtte til ti timer;
- to eller tre dager før analysen, er det nødvendig å forlate stekte og fete matvarer og alkohol;
- i tjuefire timer før analysen, bør pasienten unngå fysisk anstrengelse: ikke bære vekter, ikke gå til treningsstudio eller svømmebasseng.