Diagnose av hepatitt C-virus

Share Tweet Pin it

Hepatitt C-virus (HCV) er et RNA-inneholdende virus fra Flaviviridae-familien. Denne infeksjonen er i stand til å multiplisere i blodceller (monocytter, nøytrofiler, B-lymfocytter og makrofager), og påvirker også cellene i leveren selv - hepatocyttene. På grunn av den høye grad av mutasjonsaktivitet, er denne typen hepatitt i stand til å unngå eksponering for det menneskelige immunsystemet.

Det er 11 genotyper og massen av subtyper av et slikt virus, som varierer i graden av leverskade og påvirker varigheten av behandlingen av hepatitt. Et slikt utvalg av hepatitt C krever forskjellige metoder for antiviral terapi. For eksempel må hepatitt 1 og 4 genotyper behandles i 48 uker, og for et behandlingsforløp mot virus av 2. og 3. type, kan det ta bare 24 uker.

Etter at den raske testen for hepatitt C ga et positivt resultat, utføres PCR-analyse for å detektere RNA av viruset i blodprøver.

PCR-diagnostikk

Polymeraskjedereaksjon (PCR) er en eksperimentell teknikk for å detektere virus. En slik analyse av hepatitt C kan signifikant øke konsentrasjonen av noen DNA-fragmenter eller RNA av viruset i de overførte prøver. Dette gjør det mulig å gjenkjenne dem og til og med telle tallet.

Denne hepatitt C-testen utføres i henhold til følgende fremgangsmåte:

  1. En blodprøve (genetisk materiale) som kan inneholde det ønskede hepatittgenet, settes inn i et reagensrør. Spesielle stoffer, primere, er plassert på den, de er korte lengdesegmenter fra det ønskede genet, som kjemisk syntetiseres. DNA eller RNA-polymerase er også tilsatt dette fartøyet, det er i stand til å bygge opp kjeder av nukleinsyre som er helt identiske med originalen. Et utvalg av frie nukleotider, som er spesielle byggematerialer for DNA og RNA, tilsettes sammensetningen, og en av dem inneholder små partikler av radioaktivt fosfor.
  2. Den resulterende blanding oppvarmes opprinnelig til 95 grader, hvilket resulterer i at begge DNA-helixene sammenflettet i normal tilstand blir viklet.
  3. For å fortsette analysen, blir stoffet avkjølt, hvorpå primrene fester til ønsket del av hepatittvirusgenomet, som forhindrer DNA i å dannes i en dobbelt helix. Når blandingen avkjøles, ser polymerasen etter enkle kjeder av nukleotider. Under vedlegget av dette enzymet glir det langs DNA-kjeden (som en blokk langs tauet), og på dobbeltspiralen er det ikke i stand til å "arbeide", for dette formål oppvarmes blandingen.
  4. For å forlenge analysen utføres reheat, noe som igjen fører til separasjon av nukleotidkjedene. Når slike PCR-sykluser utføres i prøven, øker antallet av de ønskede hepatittgenene i en geometrisk andel, og de gjenværende genetiske materialer blir bare dannet (dannet) i et lineært mønster.
  5. For å fullføre studien, rengjøres løsningen fra resterende nukleotidpartikler. De separeres ved elektroforese, med separasjon av parametrene for molekylvekten til DNA-kjedene. Slike tester for hepatitt C ved bruk av PCR lar deg bestemme om de ønskede virusgenene er tilstede i prøven eller ikke.

Fordelen med denne testen er den høye terskelen av PCR-reaksjonen. En slik teknikk for diagnose, ideelt sett, kreves av bare ett virusgenom for hele prøven.

I tillegg er denne PCR helt spesifikk. I hvert av gener er det en unik sekvens av nukleotider som, som et fingeravtrykk, ikke kan gjentas hvor som helst. For denne analysen på hepatitt C, blir primere syntetisert slik at de helt svarer til de unike områdene av genene som er søkt, som ingen annen sekvens har.

Denne teknikken lar deg også analysere for hepatitt C og bestemme dem, og bidra til å etablere den endelige diagnosen.

En slik laboratorieanalyse gir informasjon mer enn bare nærvær eller fravær av RNA av hepatitt C-virus eller en annen type i blodprøver. Ved å bestemme parameteren for radioaktiv stråling, er det mulig å identifisere hvor mye av det ønskede genetiske materialet som opprinnelig var i prøven under studien. Dette lar deg bestemme parameteren for den såkalte virale belastningen - konsentrasjonen av partikler av RNA av hepatitt i et bestemt volum.

Kvalitativ analyse av PCR

Denne analysen tillater å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt B-virus i blodprøver. Det bør utføres for alle mennesker som har funnet antistoffer mot hepatitt.

Som et resultat av slik forskning kan det bare være to verdier:

  • "Oppdaget". Et slikt positivt testresultat tolkes som følger: I den analyserte prøven fra biologisk materiale ble det funnet fragmenter av RNA fra hepatittviruset. Det følger av dette at det var det faktum at pasienten var infisert med dette viruset. Dette kan indikere at patogen hepatitt multipliserer i kroppen og smitter nye celler, som ødelegger leveren.
  • "Ikke oppdaget." Dette resultatet sier at i en prøve som ble analysert i dette laboratoriet, ble det ikke påvist noen RNA-fragmenter som er spesifikke for hepatitt C-viruset. Det er også en mulighet for at konsentrasjonen av RNA i patogenviruset i prøven var så liten at testen ikke kunne oppdage det.. I slike tilfeller er det sagt at konsentrasjonsnivået er under sensitivitetstrømen for analysen.

En slik test kan også være falsk positiv eller falsk-negativ på grunn av forurensning av biomaterialet eller tilstedeværelsen i prøver av bestemte stoffer som reagerer med de kjemiske komponenter som er nødvendige for analysen.

Det bør understrekes at i den akutte fasen av hepatitt C kan en kvalitativ studie ved hjelp av PCR-metoden oppdage RNA etter 1-2 uker fra organismens øyeblikk. Dette betyr at sykdommen kan oppdages lenge før utseendet av dets ytre symptomer eller utseendet av antistoffer mot hepatitt i kroppen.

Blodprøvetaking (fra en vene) utføres fortrinnsvis på tom mage.

PCR kvantitativ analyse

Ved hjelp av denne analysen bestemmer du nivået av konsentrasjon av hepatittviruset i pasienten (viral belastning). En slik test må bestås for å estimere mengden av virus-RNA per enhet av et visst volum.

Dekryptere tester for hepatitt C, utført i henhold til denne metoden, kan ha følgende resultater:

  • Kvantitativ indikator (i tall)

Viruskoncentrasjonen (mengden) er gitt i numeriske termer. For dette brukes ulike måleenheter: enten IE / ml (internasjonal enhet per milliliter) eller kopier / ml (antall kopier av virus-RNA per milliliter). I gjennomsnitt tilsvarer 1 IE / ml 4 kopier / ml, da forskjellige testsystemer har forskjellige konverteringsfaktorer for slike enheter.

De lave viralbelastningsverdiene anses å være mindre enn 400.000 IE / ml, og 8.000.000 IE / ml er høy.

En slik kvantitativ vurdering gjør det mulig å bestemme infeksjonsnivået av sykdommen ("smittsomhet") hos pasienten. Jo mer denne indikatoren for analyse, desto større er sannsynligheten for risikoen for overføring av patogenet til andre mennesker (gjennom seksuell kontakt eller vertikalt).

Denne dommen betyr at den kvantitative metoden ikke kunne oppdage hepatitt-RNA, men selve viruset er tilstede i kroppen, bare i svært lave konsentrasjoner. Dette ble bekreftet ved ytterligere kvalitativ analyse av PCR, og ved sitt positive resultat vitner det til forekomsten av hepatitt.

  • Resultat ikke oppdaget

    Denne positive tolkningen av analysen antyder at den kvantitative testen selv i en blodprøve ikke kunne oppdage bestemte RNA-partikler av hepatitt C-viruset.

  • En kvantitativ analyse av PCR utført ved ulike perioder med antiviral terapi (1., 4., 12. og 24. uke) tillater oss å bedømme effektiviteten av behandlingen og foreta de nødvendige endringene.

    Analyse spesifisitet

    Denne testen må bestås for å bestemme de forskjellige genotypene av hepatitt C. For tiden er det 11 genotyper av dette patogenet og mange subtyper. I vårt land er genotypene av hepatitt C av 1., 2. og 3. arten vanlige. I laboratorier kan de identifisere ulike subtyper av disse artene: 1a, 1b, 2a, 2b eller 3, 4, 5, 6 genotyper med ulike modifikasjoner av subtyper. For alle disse hepatittene er spesifisiteten av bestemmelsen 100%.

    Spesifisering av modifikasjonen av genotypen gjør det mulig å velge riktig behandling. Tilstedeværelsen av en bestemt type genotype hos en pasient indikerer ikke at sykdommen er lettere eller mer komplisert, de er bare varianter av hepatittviruset, og ikke mer.

    I de tilfellene når genotypen av viruset ikke kan isoleres i laboratoriet, kan resultatet gis: "Ikke skrevet. Ble undersøkt genotyper: slik-og-slik "(for eksempel 1a, 2c, 3av). Denne dekodningen antyder at i dette laboratoriet var det ingen passende reagenser som kunne bestemme genotypen av hepatittviruset. Studien ble testet for virus, dataene i listen, men deres overensstemmelse med RNA-prøver ble ikke identifisert.

    For å få en endelig diagnose er bare en type analyse utilstrekkelig. Hver av testene kan gi et falskt positivt resultat. For å nøyaktig bestemme type hepatitt og omfanget av skade på denne infeksjonen i kroppen, utfør en omfattende studie. Dette er gjort en leverbiopsi og testing av enzymer: ALT, ASAT, samt alkalisk fosfatase og LDH. En bilirubin-test og protrombinindeksanalyse kan også utføres.

    Bare et sett av slike tester og laboratorietester, med en generell analyse av pasientens tilstand, vil bidra til å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt i kroppen, dens form, samt alvorlighetsgraden. Legen kan avgjøre videre behandling og gjøre en mulig prognose for pasienten.

    Hva er Hepatitt C RNA?

    Studien av RNA i hepatitt C-viruset er den viktigste prosedyren, som gjør det mulig å fastsette varighet og metoder for behandling av pasienter med stor nøyaktighet. Diagnosen av sykdommen består av flere forskjellige blodprøver, for eksempel:

    • hepatitt C markører (anti-HCV);
    • bestemmelse av hepatitt C-virus RNA (HCV RNA).

    Den første studien er utført ved første mistanke om hepatitt. Det andre alternativet er den mest signifikante i behandlingen av HCV RNA, så betrakt det mer detaljert.

    Hva er viral hepatitt C?

    Viral hepatitt C, eller HCV, er en smittsom sykdom som påvirker leveren. Infeksjon med viruset skjer gjennom blodet. Du kan bli smittet ved å gjøre blodtransfusjon når regler for sterilisering av medisinske instrumenter ikke følges. Oftere er det tilfeller når sykdommen oppnås seksuelt eller fra en gravid mor til fosteret. Hepatitt C kan være av 2 typer.

    Kronisk hepatitt C er den farligste. Det er en form for sykdom som kan vare i livet. Det fører til alvorlige problemer i leverfunksjonen, som skrumplever eller kreft. I 70-90% av infiserte mennesker blir sykdommen kronisk.

    Den viktigste faren for hepatitt C er at den fortsetter skjult, uten icteric tegn. Samtidig klager de oftest på feber, kvalme og oppkast, fysisk svakhet, økt tretthet, tap av matlyst og vekt. På samme tid, på grunn av en liten herding av leverenvevet, opptrer den ondartede degenerasjonen ganske ofte. Av denne grunn blir hepatitt C ofte referert til som en "tidsbombe" eller "kjærlig morder".

    En annen funksjon av sykdommen er den svært sakte utviklingen, beregnet i dusinvis av år.

    Som regel føler de smittede ikke noen symptomer og er ikke klar over sin sanne tilstand. Ofte kan en sykdom kun oppdages ved å kontakte en lege på et annet emne.

    På risiko er:

    • barn som fikk hepatitt C-viruset fra sine mødre;
    • narkomane;
    • folk som gjennomsyret deler av kroppen eller tatoverte med ikke-sterile instrumenter;
    • mottar donorblod eller organer (fram til 1992, da hemodialyse ikke ble utført);
    • folk smittet med hiv;
    • medisinsk personale i kontakt med infiserte pasienter.

    Bestemmelse av hepatitt C RNA

    Definisjonen av hepatitt C-virus-RNA, også kalt hepatitt C-PCR, er en studie av biologisk materiale (blod) som kan brukes til å bestemme direkte tilstedeværelse av hepatittvirusgenomater i kroppen (et enkelt virus er et enkelt RNA).

    Hovedprøven er PCR, eller polymerasekjedereaksjonsmetoden.

    Det finnes to typer blodprøver for HCV RNA:

    Kvalitetstest

    Gjennomføring av en kvalitativ analyse gjør det mulig å avgjøre om viruset er i blodet. Alle pasienter der C-hepatittantistoffer er funnet, må bestå denne testen. Ifølge resultatene kan du få 2 svar: "tilstede" eller "fravær" -virus. Ved et positivt testresultat (detektert) kan man dømme den aktive reproduksjonen av et virus som infiserer friske celler i leveren.

    Testen utført på PCR av høy kvalitet er innstilt til en bestemt følsomhet, fra 10 til 500 IE / ml. Hvis hepatittviruset oppdages i blodet med et spesifikt innhold på mindre enn 10 IE / ml, kan deteksjon av viruset bli umulig. Et svært lavt spesifikt virusinnhold observeres hos pasienter som har antiviral terapi blitt foreskrevet. Derfor er det viktig at følsomheten til det medisinske systemet er høyt for å diagnostisere og sette et kvalitativt resultat i polymerasekjedereaksjonen.

    Ofte utføres polymerasekjedereaksjonen av C-hepatitt umiddelbart etter å finne de tilsvarende antistoffer. Etterfølgende tester, under gjennomføringen av antiviral terapi, utføres på 4., 12. og 24. uke. Og en annen analyse etter avslutning av HTP er gjort etter 24 uker. Så - en gang i året.

    Kvantitativ test

    Kvantitativ analyse av PCR RNA, som noen ganger kalles viral belastning, bestemmer konsentrasjonen (spesifikt innhold) av viruset i blodet. Med andre ord, viral belastning er definert som en viss mengde viralt RNA, som kan være i en bestemt mengde blod (det er vanlig å bruke 1 ml, lik 1 cm i en terning). Enhetene for testresultater er internasjonale (standard) enheter dividert med en milliliter (IE / ml). Virusets innhold forekommer noen ganger annerledes, det avhenger av laboratoriene der forskningen utføres. For hepatitt C bruker kvantitativ bestemmelse noen ganger verdier som kopier / ml.

    Du må forstå at det ikke er noen spesifikk avhengighet i alvorlighetsgraden av C-hepatitt på konsentrasjonen av denne stammen i blodet.

    Sjekk "viral load" lar deg bestemme graden av smittsomhet av sykdommen. Dermed øker risikoen for å infisere en annen person med et virus med en økning i konsentrasjonen av hepatitt i blodet. I tillegg reduserer det høye innholdet av viruset effekten av behandlingen. Derfor er lav viral belastning en svært gunstig faktor for vellykket behandling.

    I tillegg har hepatitt C-testen og dens bestemmelse ved PCR en stor rolle i anvendelsen av terapi for sykdommen og bestemmer suksessen av behandlingen. Basert på testresultatene er det planlagt et rehabiliteringskurs. For eksempel, hvis den spesifikke konsentrasjonen av hepatittviruset er for sakte, er antiviral terapi forlenget, og vice versa.

    I moderne medisin antas det at belastningen på mer enn 800000 ME / ml er høy. En belastning på over 10 000 000 ME / ml anses kritisk. Men eksperter fra forskjellige land har fortsatt ikke den samme oppfatningen om grensene for virusbelastningen.

    Frekvensen av den kvantitative testen

    I generelle tilfeller utføres en kvantitativ analyse av hepatitt før antiviral terapi og 3 måneder etter avslutning av medisinske prosedyrer for å bestemme kvaliteten på den utførte behandlingen.

    Som et resultat vil en kvantitativ test bli vurdert som en kvantitativ vurdering av resultatene for prøven spesifisert ovenfor. Som et resultat vil dommen "under det målte området" eller "ikke oppdaget i blodet" bli utstedt.

    Sensitivitetsparameteren til en kvalitativ test er vanligvis lavere enn sensitiviteten til en kvantitativ analyse. Den "Manglende" transkripsjonen viser at begge typer analyser ikke fant virus-RNA. Når testindeksen var "under det målte området", fant en kvantitativ type analyse sannsynligvis ikke hepatitt-RNA, selv om dette bekrefter tilstedeværelsen av et virus med et svært lite spesifikt innhold.

    Hepatitt C og dens genotyper

    Hepatitt C-virus RNA-genotyping diagnostiserer tilstedeværelsen av forskjellige genetiske typer hepatitt C. Mer enn 10 typer av det virale genomet er kjent for vitenskap, men for medisinsk praksis er det tilstrekkelig å utelukke flere genotyper som har størst andel i regionen. Å bestemme den genetiske typen spiller en nøkkelrolle i valg av behandlingstidspunktet, noe som er svært nødvendig dersom du tar hensyn til det store antallet bivirkninger av medisiner for hepatitt.

    Metoder for behandling av viral hepatitt C

    Den eneste effektive måten å kurere hepatittviruset, er som regel en kombinasjon av 2 medisiner: interferon-alfa sammen med ribavirin. Individuelt er disse stoffene ikke like effektive. Den anbefalte dosen av legemidler og tidspunktet for bruk bør kun foreskrives av lege og individuelt for hver pasient. Behandling med disse legemidlene kan ta fra 6 til 12 måneder.

    I dag ikke oppfunnet narkotika som garanterer et hundre prosent utvinning fra viruset. Men med riktig behandling kan helbredelse av pasienter nå opptil 90% av antall tilfeller.

    Varianter og behovet for å søke forskning ved PCR

    Hepatitt C-virus er et virus som inneholder et RNA-molekyl. Han er i stand til å unngå immunresponsen i kroppen på grunn av sin høye evne til å mutere. Det er seks hovedgenotyper av viruset og mange subtyper. I vår region distribueres hovedsakelig 1, 2 og 3 genotyper.

    I 75-80% blir sykdommen kronisk, noe som forårsaker leverfibrose, en tilstand der levervev erstattes av bindevev. Fibrose fører igjen til kreft eller cirrhose. Hovedmodus for overføring av sykdommen er gjennom blodet. Hvis en person har indikasjoner på å utføre en test for hepatitt C, får han to hovedtester. Antistoffer mot viruset er bestemt, og i deres fravær antas det at han ikke har hepatitt. Hvis det oppdages tilstedeværelse av antistoffer mot hepatittviruset i blodet, utføres en PCR-analyse.

    RNA ved denne metoden er bestemt i blodet innen 10-12 dager etter infeksjon og indikerer at viruset reagerer aktivt i kroppen. I løpet av denne perioden er det ganske enkelt umulig å oppdage viruset på en annen måte, siden det fremdeles ikke produserer spesifikke antistoffer, og leverskade er ikke synlig med biokjemiske tester og biopsier.

    Varianter av studier ved bruk av PCR

    Polymerase kjedereaksjonsanalyse har visse fordeler:

    1. I denne studien er selve viruset bestemt, og ikke dets metabolske produkter. I dette tilfellet er det mulig å bestemme typen av patogen.
    2. Teknikken har høy spesifisitet på grunn av det faktum at bare en bestemt del av DNA blir studert, reduseres sannsynligheten for å få feilaktige resultater.
    3. Den har en svært høy følsomhet, det er bestemt selv den minste mengden av virus i blodet.

    Det er to hovedmetoder for å teste blod for hepatitt C ved bruk av PCR: kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Den kvalitative metoden brukes til å avgjøre om et virus er tilstede. Alle med antistoffer mot hepatitt har blitt detektert i blodet, slik en analyse utføres. Resultatet kan bare være av to typer: "oppdaget" og "ikke oppdaget", sistnevnte verdi regnes som normen.

    Et positivt testresultat betyr at fragmenter av virus-RNA ble funnet i prøven, som igjen indikerer at personen var infisert med hepatitt. Ved et negativt resultat er det to muligheter: det var ingen infeksjon eller konsentrasjonen er så lav at den ikke oppdages av denne teknikken.

    Den kvantitative metoden er forskjellig i substansen av forskningen, i sine oppgaver og i indikasjoner. Ikke alle pasienter med hepatitt gjennomgår en slik analyse. Han, som alle andre, har visse mål. Bestemmelse av viral belastning eller kvantitativ analyse av PCR for virus RNA er brukt:

    • å bestemme RNA for viruset i blodet og diagnosen "viral hepatitt";
    • å forutsi kroniskheten av hepatitt og sykdomsforløpet;
    • å overvåke antiviral behandling og avgjøre om forlengelse, reduksjon eller endring i behandlingstaktikk.

    Studien utføres i nærvær av slike indikasjoner:

    • Hepatitt C ble påvist ved en kvalitativ studie og antistoffer ble detektert i blodet;
    • med blandet hepatitt;
    • hvis antiviral terapi er planlagt;
    • under og etter behandling for hepatitt C;
    • i nærvær av kronisk og akutt hepatitt C.

    Testen utføres for å estimere antall virusenheter i et gitt volum av en blodprøve på 1 cm3 eller 1 ml. Resultatene er gitt i tall. Indikatorene som brukes er: IE / ml, som betyr internasjonal enhet per milliliter og kopier per ml, antall kopier av RNA i 1 ml prøve. Jo høyere kvantitative indikatoren for analysen er, desto større er sannsynligheten for overføring av viruset til en annen person.

    R-DNA er en forgrenet DNA-metode. Mer enkel og billig metode. Brukes for et større antall prøver, har lav følsomhet, fra 500 IE / ml. Med slik følsomhet er det en sjanse til ikke å identifisere viruset, selv om det er tilstede i blodet.

    TMA er en transkripsjonal amplifikasjonsmetode. Denne teknikken oppdager nukleinsyrer i blodet. Den har lav kostnad og høy følsomhet, fra 5-10 IE / ml. En relativt ny teknikk som gjør at du kan øke hastigheten og redusere kostnadene ved testprosessen.

    Resultatene av den kvantitative analysen av definisjonen av virus RNA, presentert av laboratoriet, tolkes som følger:

    Medinfo.club

    Portal om leveren

    HCV kvantitativ analyse og dekoding

    Hepatitt C er en sykdom som kan formere seg i friske leverceller og provosere forekomsten av proliferative sykdommer. I den moderne verden, når hepatittviruset har passert en bestemt mutasjon, er det menneskelige immunsystem truet, siden det er ubetydelig sammenlignet med en infeksjon. Det er også verdt å merke seg at ikke alle pasienter vil oppleve de første tegn på sykdommen, særlig i de tidlige stadier.

    RNA-analyse av hepatitt C-virus er en kvantitativ studie, hvis norm ligger i den moderate mengden av tilstedeværelsen av virusceller i pasientens blod. Ifølge statistikken er ca 31% av pasientene fullstendig herdet av denne sykdommen, hvis den er i utgangspunktet.

    I medisinsk praksis merker leger at 4 millioner infiserte symptomer og første tegn ikke synes i det hele tatt, selv om den forsømte form for hepatitt kan føre til levercirrhose eller kreft.

    For tiden, under blodtransfusjonsprosedyren, kontrolleres dette blodet for tilstedeværelsen av hepatitt C-viruset, siden denne sykdommen overføres gjennom donorblod.

    I dag har medisiner for hepatitt C allerede oppstått i verden med en effektivitet nær 100%. Moderne farmasøytisk industri har skapt stoffer som har nesten ingen bivirkninger. Mange pasienter får de første resultatene i form av å lindre symptomene og redusere virusbelastningen etter en uke med inntak. Les mer om medisiner for hepatitt fra indisk produksjon, les vår egen artikkel.

    Sofosbuvir Express har bevist seg i markedet for transport av indianhepatitt C-legemidler. Dette selskapet hjelper med suksess folk til å gjenopprette fra sykdommen i mer enn 2 år. Anmeldelser og videoer av fornøyde pasienter kan du se her. På deres konto er det mer enn 4000 mennesker som gjenvunnet takket være kjøpte stoffer. Ikke legg helsen din på vent, gå til www.sofosbuvir-express.com eller ring 8-800-200-59-21

    Typer av PCR-studier

    PCR (polymerasekjedereaksjon) er den mest moderne og effektive metoden for å studere virusgenet og dets evner. Slike diagnostikk er i stand til å etablere en type sykdom og bestemme dens videre mutasjon i pasientens kropp.

    Analysen utføres ved å ta blod, som deretter plasseres i spesielle reagenser der kloning av celler finner sted.

    Fra en celle viser det seg to, og så videre. Som et resultat er det hundrevis av DNA, der du kan diagnostisere patogenet og identifisere viruset på et tidlig stadium.

    Derfor er PCR delt inn i flere typer:

    • kvalitativ analyse - gjenkjenner gener infeksjon i blodet. Hvis sykdommen under den kvalitative analysen av pasienten bekreftes, bør en kvantitativ analyse utføres for å fastslå infeksjonens omfang. Som et resultat av denne diagnosen skriver eksperter "oppdaget / ikke oppdaget". "Oppdaget" - sier at sykdommen er tilstede i kroppen og dens RNA allerede er identifisert. "Ikke oppdaget" - indikerer fraværet av et virusgen i prøven, det vil si, det er ingen hepatitt-RNA. Men leger anbefaler at de testes etter 10 dager.
    • kvantitativ analyse - bestemmer mengden av genetisk materiale av infeksjon i blodet. En slik diagnose bidrar til å fastslå alvorlighetsgraden av sykdommen og hele klinisk historie. Som et resultat av en slik analyse kan bare "Positiv / Negativ / Ugyldig" skrives. "Positiv" - representerer den smittsomme belastningen. Legene foreskriver denne metoden for å diagnostisere sykdommen for å bestemme effektiviteten av behandlingen ved 4, 12, 16 og 24 ukers sykdom. Hvis virusindikatoren er i området 8x10 IE / ml, er behandlingen effektiv hvis prisene er høyere, så nei. "Negativ" - infeksjonsgenet blir ikke oppdaget. "Ugyldig" - dette skjer hvis virusgenet ble oppdaget i kvalitative, men det ble ikke avslørt i kvantitativ analyse. Det er en lignende, forutsatt at infeksjonsvolumet er under nivået.

    Forskjeller i kvalitative og kvantitative analyser

    Hepatitt C-viruset diagnostiseres først og fremst ved å gjennomføre en kvantitativ analyse, hvor dekoding er nødvendig for korrekt tolkning av sykdommen. Til tross for dette har de kvalitative og kvantitative diagnostiske metodene sine forskjeller, for eksempel: rollen og oppgavene som er tildelt forskningen - kvalitativ - bekrefter tilstedeværelsen av infeksjon etter virusets detekterte antistoffer og kvantitativ - en sekundær metode som refuterer eller bekrefter sykdommen for å få den riktige og eneste diagnosen.

    Tolkning av kvantitativ forskning

    Etter diagnosen kan bare leger tolke resultatet, slik det ikke skal vises i figurer, men i ord. Ifølge statistikk er kvantitativ PCR den mest sensitive analysen. For å forstå om et virus er til stede i kroppen, er det nødvendig å forstå og vite at en kvantitativ analyse av hepatitt C tolkes ved hjelp av den digitale betegnelsen (standard) for infeksjon:

    Rna hepatitt med kvantifiseringsnorm

    Hepatitt C-viruset kan multiplisere i blodceller og forårsake lymfoproliferative sykdommer. Takket være de mange mutasjonene, svetter kroppens immunforsvar, og genotyper og subtyper av viruset opptrer. Med riktig og rettidig bestemmelse av en bestemt type, avhenger effekten av antiviral terapi. Faren for infeksjon er at sykdommen er asymptomatisk. Kun 15 prosent av 100 kan oppleve kvalme og oppkast, vekttap og feber.

    Definisjon av hepatitt C-virus

    Standardhastigheten til hepatitt C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskade som skyldes et akutt eller kronisk sykdomsforløp. Hepatitt C, nemlig RNA-viruset til Togaviridae-familien, er ekstremt vedvarende, overføres ved blodtransfusjon eller bruk av ikke-sterile objekter, feil hygieneforsyning, etc. Kvantitativ analyse lar deg undersøke blodet og identifisere den genetiske strukturen til det infiserte viruset.

    For å bestemme hepatitt C og dens genotyper utføres kvantitativ analyse. Avhengig av analysatoren kan tre nivåer av RNA virus forekomst bestemmes.

    Subtypene kan produsere ulike modifikasjoner, så spesifisiteten og følsomheten til analysatoren må være hundre prosent. I tillegg til å oppdage sykdommen hos en pasient, er det nødvendig å bestemme graden av alvorlighetsgraden. Noen laboratorier har ikke alle dataene om RNA-virusdekoding, det er en mulighet for en falsk positiv respons.

    Forskning på hepatitt C vil være mer nøyaktig når man studerer disse indikatorene:

    AlAT, AsAT; Alkalisk skjold; LDH.

    Ved å gi oppmerksomhet til resultatene av disse indikatorene og kroppens generelle tilstand, vises et resultat som viser infeksjonsgraden, formen og antall hepatitt C-celler i blodet. Dette bidrar til helbredelsesprosessen og effektiviteten av antiviral terapi.

    Typer av analyse for hepatitt C

    En flerdimensjonal kjedereaksjon (PCR) gir en ide om antall DNA-partikler i pasientanalyser tatt, og vil riktig identifisere det smittefarlige middel.

    Årsaker til smittsomme sykdommer kan forekomme. En infeksjon i leveren, som hepatitt C, kan behandles i vår tid når den oppdages i tide. Hvis et virus er mistenkt, utføres PCR-analyse.

    Gitt at symptomene på viruset i lang tid kan maskeres, kan en person ikke føle sykdommenes utbrudd. Men med en grundig undersøkelse i 60-70% av tilfellene, oppdages hepatitt C, den første analysen, som er ELISA, følger PCR-diagnosen. Analysen utføres i visse perioder for å bestemme sykdomsstadiet og foreskrive riktig behandling. For å unngå det, uten å anvende alle disse prosedyrene, er det mulig å bli vaccinert mot hepatitt.

    En analyse som involverer PCR-diagnostikk gir et bilde av sykdommen, hvor aktiv viruset er i ulike utviklingsperioder.

    For det første er det en kvalitativ analyse som kun bekrefter hypotesen om infeksjonen, og deretter en kvantitativ, som bestemmer belastningen på leveren. Det ideelle alternativet ville være et negativt resultat for hepatitt C i pasientens genetiske materiale.

    Kvalitativ og kvantitativ analyse

    Det er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen av den første er at den bestemmer tilstedeværelsen av infeksjon i blodet. Og det betyr at viruset infiserer friske leverceller. Når antistoffer mot hepatitt C er funnet hos en pasient, utføres en kvalitativ test umiddelbart. Hastigheten som resultatet skal gi er "ikke oppdaget i blodet". Ved bestemmelse av konsentrasjonen av et virus, er det behov for å kjenne følsomheten til diagnosesystemet, siden folk som gjennomgår antiviral terapi kan gjøre analysen. Analysatorens følsomhetsgrad bør ikke være mindre enn 50 IE / ml.

    Når et virus oppdages, utføres en kvantitativ analyse, det vil si virusbelastningen, som bestemmer virusets konsentrasjon i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen.

    Viral RNA, som er i en viss mengde blod, er definert som normen med en hastighet på 1 ml per 1 cm kubikk. Etter kvantifisering av virusbelastningen er det mulig å bedømme infeksjonsgraden av det fortsatt uinfiserte miljøet. Så snart konsentrasjonen av hepatitt C stiger i blodet, er det nødvendig å isolere fra miljøet.

    Det er viktig i de første stadiene å oppdage graden av konsentrasjon av hepatitt, for å bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis graden av hepatitt C overskrides med mer enn 800 000 IE / ml, anses den for høy, med en økning på opptil en million kritisk. Hvis det kvantitative området er mindre enn 400 000 IE / ml, anses det at infeksjonen av de som er rundt, er mindre sannsynlig. Denne figuren gjør det klart at hepatitt C er tilstede i kroppen i svært små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative verdien av RNA-partiklene av viruset, så det blir gjenutnevnt flere ganger for nøyaktigheten av diagnosen.

    Resultater av kvantitativ analyse

    Oppgaven med å bestemme mengden av virusbelastning i blodet til en pasient er identifikasjonen av infeksjonsgraden til andre.

    Hepatitt C-test

    lar deg evaluere effektiviteten av antiviral terapi, nivået av smittsomhet og antall infiserte vev.

    Det er viktig å forhindre sykdomsprogresjonen, for å ta forebyggende tiltak i tide, for å foreskrive riktig behandling basert på PCR-diagnostikk. Dersom resultatet av virusbelastningen er mindre enn 400 000 IE / ml, kan konsentrasjonen være minimal, noe som indikerer en mulig fullstendig gjenoppretting. Normen for et positivt resultat er fraværet av infeksjon.

    Resultatene av PCR-analysen:

    Et positivt svar betyr at det er infeksjon i det biologiske materialet. Analysen tillater å bestemme eksakt antall infiserte celler. Det negative svaret indikerer fraværet av infeksjon, som er nøye søkt i kroppen.

    Metoden for kvantitativ bestemmelse av hepatitt C er nøyaktig og informativ, utført på utstyr med høy følsomhet. Dekryptering av resultatene av analysen lar deg finne ut om infeksjonen og dens spesifikasjoner, for å se det minste antallet infiserte celler på svært sensitive analysatorer.

    False-positive eller motsatte resultater er sjelden gitt av analysen, oftere skjer dette i immunanalyser.

    Nylig har søket etter "kvantitativ analyse av hepatitt med avkodning" i økende grad oppstått i søkemotorer av Internett-ressurser.

    Faktisk er hepatittviruset spredt og farlig, sykdommen påvirker leveren. Navnet kommer fra lat. hepatitt er betennelse i leveren. Infeksjon oppstår gjennom blodet eller seksuelt. Oftere er voksne i alderen 25 til 50 år.

    Det er flere typer av denne sykdommen. Hepatitt C har ikke en klar alvorlighetsgrad, men i 40-70% av tilfellene blir det kronisk, kan forårsake skrumplever og kreft. Denne sykdommen krever nøyaktig diagnose og tolkning av dataene, for hvilke teknikker som er blitt utviklet. En av dem er RNA-analyse av HCV RNA ved PCR.

    RNA analyse av HCV RNA ved PCR

    RNA (ribonukleinsyre) er en type makromolekyl, en av komponentene i en levende celle. RNA er ansvarlig for koding av genetisk informasjon. Hepatitt C-viruset inneholder et RNA-molekyl og har en tendens til å mutere. 6 av dens undertyper er kjent, så vel som mange undertyper.

    Sykdommen i kronisk stadium fører til fibrose i leveren - bindevev vokser, organets struktur blir gradvis forstyrret. Fibrose er egnet til rettidig behandling, siden leveren ikke har gjennomgått destruktive prosesser. I motsetning til cirrhosis, alvorlig irreversibel leversykdom der fibrose kan utvikles uten å ta de nødvendige tiltakene i tide.

    En person med mistanke om å ha et hepatitt B-virus bestemmes av antistoffer mot det. Hvis de ikke er, er sykdommen utelukket, hvis de er tilgjengelige, går de til PCR (polymerasekjedereaksjonen) metoden. I molekylærbiologi er det eksperimentell, men opptar et ledende sted blant metodene for å diagnostisere smittsomme sykdommer. Med den kan du øke konsentrasjonen av molekylfragmenter i prøven betydelig. 10 dager etter infeksjon, er RNA allerede mulig å bestemme i blodet.

    Denne metoden er den eneste som kan oppdage sykdommen i sine tidlige stadier. På andre måter (for eksempel ved biokjemiske blodprøver) kan dette ikke gjøres, siden leveren ikke er påvirket ennå.

    Hepatitt C-tester med dekoding (PCR) er en pålitelig indikator for tilstedeværelsen av viruset i humant blod.

    Metoden ble oppdaget i 1993 av biokjemiker Kerry Mullis, som han vant Nobelprisen. PCR var et gjennombrudd i medisin og vitenskap, da det ble tillatt å raskt og nøyaktig identifisere infeksjoner i blodet og andre biologiske materialer av mennesker. Metoden har med andre ord akselerert utviklingen av diagnosen infeksjonssykdommer.

    RNA analyse av HCV RNA ved PCR er effektiv av følgende årsaker:

    har god følsomhet - selv en liten mengde virus i blodet oppdages; selve viruset er bestemt, ikke biprodukter som er opprettet av det; Typen av patogen er bestemt.

    Forskjeller i kvantitativ analyse av HCV RNA fra kvalitativ

    PCR-metoden inkluderer to hovedveier for å studere det biologiske materialet for søket etter hepatitt C-viruset:

    Disse studiene har forskjellige oppgaver.

    En kvalitativ analyse av hepatitt ved dekoding bekrefter tilstedeværelsen av viruset etter at antistoffer mot sykdommen allerede er funnet i blodet. Hvis studien ga et positivt resultat, så oppdages sykdommen. Med andre ord er en person smittet. Hvis det oppnås et negativt resultat, betyr dette at personen ikke er infisert, eller virusets konsentrasjon er for liten. Denne konsentrasjonen oppdages ikke på denne måten.

    I tillegg er det kliniske bildet av sykdommen basert på hepatitt C markører og tolkning av analysen. Hovedmerkene er immunglobuliner (antistoffer) M og G. Deres tilstedeværelse i pasientens blod indikerer en ikke-karakteristisk prosess for en sunn organisme. På grunnlag av tilstedeværelsen av disse antistoffene etablerer pasienten som hovedregel den primære diagnosen.

    Kvantitativ analyse er foreskrevet for primær deteksjon av antistoffer og om nødvendig behandling.

    Også er kvantitativ analyse av hepatitt C foreskrevet for påvisning av blandet hepatitt (infeksjon med flere virus samtidig).

    Kvantitativ analyse med dekoding utføres for å:

    klargjøring av den endelige diagnosen; bygge spådommer om sykdomsforløpet og dets behandling - utvidelse, reduksjon av behandling eller taktikkendring; overvåkningsterapi.

    Den internasjonale indikatoren på IE / ml betyr at mengden RNA i 1 ml blod undersøkes. En høy kvantitativ indikator indikerer en økt sannsynlighet for å infisere en annen person.

    For at resultatene skal være sanne, må du følge det etablerte regimet før du donerer blod:

    kom til laboratoriet på tom mage, siste gang du kan spise 8 timer før prosedyren; To dager før studien alkohol, er fett og stekt mat forbudt; ultralyd, massasje, fysioterapi før studien ikke kan utføres; medisinering er forbudt for dagen, hvis det er umulig å avbryte inntaket av visse legemidler, rapporteres dette før blodprøvetaking; Før prosedyren anbefales det å redusere fysiske og nervøse belastninger så mye som mulig.

    Oppfyllelsen av disse kravene vil være nøkkelen til å oppnå korrekte resultater av en kvantitativ analyse av hepatitt C.

    Tolkning av kvantitativ analyse

    Etter å ha oppnådd kvantitative analyseindikatorer, er det nødvendig å dechiffrere resultatene av tester for hepatitt C. Resultatene beregnes både i enheter i IE / ml og i eksemplarer per ml. For å få resultatene, konvertert til kopier, bruk flere teknikker.

    HCV Monitor (konverteringsfaktor til ME - 2,7); LCX HCV RNA (konverteringsfaktor til ME - 3,8).

    Tabell. Tolkning av den kvantitative analysen av HCV RNA ved PCR.

    Hepatitt C markører og tolkning av HCV RNA kvantitasjonsresultater

    Nylig har søket etter "kvantitativ analyse av hepatitt med avkodning" i økende grad oppstått i søkemotorer av Internett-ressurser.

    Faktisk er hepatittviruset spredt og farlig, sykdommen påvirker leveren. Navnet kommer fra lat. hepatitt er betennelse i leveren. Infeksjon oppstår gjennom blodet eller seksuelt. Oftere er voksne i alderen 25 til 50 år.

    Det er flere typer av denne sykdommen. Hepatitt C har ikke en klar alvorlighetsgrad, men i 40-70% av tilfellene blir det kronisk, kan forårsake skrumplever og kreft. Denne sykdommen krever nøyaktig diagnose og tolkning av dataene, for hvilke teknikker som er blitt utviklet. En av dem er RNA-analyse av HCV RNA ved PCR.

    RNA analyse av HCV RNA ved PCR

    RNA (ribonukleinsyre) er en type makromolekyl, en av komponentene i en levende celle. RNA er ansvarlig for koding av genetisk informasjon. Hepatitt C-viruset inneholder et RNA-molekyl og har en tendens til å mutere. 6 av dens undertyper er kjent, så vel som mange undertyper.

    Sykdommen i kronisk stadium fører til fibrose i leveren - bindevev vokser, organets struktur blir gradvis forstyrret. Fibrose er egnet til rettidig behandling, siden leveren ikke har gjennomgått destruktive prosesser. I motsetning til cirrhosis, alvorlig irreversibel leversykdom der fibrose kan utvikles uten å ta de nødvendige tiltakene i tide.

    En person med mistanke om å ha et hepatitt B-virus bestemmes av antistoffer mot det. Hvis de ikke er, er sykdommen utelukket, hvis de er tilgjengelige, går de til PCR (polymerasekjedereaksjonen) metoden. I molekylærbiologi er det eksperimentell, men opptar et ledende sted blant metodene for å diagnostisere smittsomme sykdommer. Med den kan du øke konsentrasjonen av molekylfragmenter i prøven betydelig. 10 dager etter infeksjon, er RNA allerede mulig å bestemme i blodet.

    Denne metoden er den eneste som kan oppdage sykdommen i sine tidlige stadier. På andre måter (for eksempel ved biokjemiske blodprøver) kan dette ikke gjøres, siden leveren ikke er påvirket ennå.

    Metoden ble oppdaget i 1993 av biokjemiker Kerry Mullis, som han vant Nobelprisen. PCR var et gjennombrudd i medisin og vitenskap, da det ble tillatt å raskt og nøyaktig identifisere infeksjoner i blodet og andre biologiske materialer av mennesker. Metoden har med andre ord akselerert utviklingen av diagnosen infeksjonssykdommer.

    RNA analyse av HCV RNA ved PCR er effektiv av følgende årsaker:

    • har god følsomhet - selv en liten mengde virus i blodet oppdages;
    • selve viruset er bestemt, ikke biprodukter som er opprettet av det;
    • Typen av patogen er bestemt.

    Forskjeller i kvantitativ analyse av HCV RNA fra kvalitativ

    PCR-metoden inkluderer to hovedveier for å studere det biologiske materialet for søket etter hepatitt C-viruset:

    Disse studiene har forskjellige oppgaver.

    En kvalitativ analyse av hepatitt ved dekoding bekrefter tilstedeværelsen av viruset etter at antistoffer mot sykdommen allerede er funnet i blodet. Hvis studien ga et positivt resultat, så oppdages sykdommen. Med andre ord er en person smittet. Hvis det oppnås et negativt resultat, betyr dette at personen ikke er infisert, eller virusets konsentrasjon er for liten. Denne konsentrasjonen oppdages ikke på denne måten.

    I tillegg er det kliniske bildet av sykdommen basert på hepatitt C markører og tolkning av analysen. Hovedmerkene er immunglobuliner (antistoffer) M og G. Deres tilstedeværelse i pasientens blod indikerer en ikke-karakteristisk prosess for en sunn organisme. På grunnlag av tilstedeværelsen av disse antistoffene etablerer pasienten som hovedregel den primære diagnosen.

    Kvantitativ analyse er foreskrevet for primær deteksjon av antistoffer og om nødvendig behandling.

    Også er kvantitativ analyse av hepatitt C foreskrevet for påvisning av blandet hepatitt (infeksjon med flere virus samtidig).

    Kvantitativ analyse med dekoding utføres for å:

    • klargjøring av den endelige diagnosen;
    • bygge spådommer om sykdomsforløpet og dets behandling - utvidelse, reduksjon av behandling eller taktikkendring;
    • overvåkningsterapi.

    For at resultatene skal være sanne, må du følge det etablerte regimet før du donerer blod:

    • kom til laboratoriet på tom mage, siste gang du kan spise 8 timer før prosedyren;
    • To dager før studien alkohol, er fett og stekt mat forbudt;
    • ultralyd, massasje, fysioterapi før studien ikke kan utføres;
    • medisinering er forbudt for dagen, hvis det er umulig å avbryte inntaket av visse legemidler, rapporteres dette før blodprøvetaking;
    • Før prosedyren anbefales det å redusere fysiske og nervøse belastninger så mye som mulig.

    Oppfyllelsen av disse kravene vil være nøkkelen til å oppnå korrekte resultater av en kvantitativ analyse av hepatitt C.

    Tolkning av kvantitativ analyse

    Etter å ha oppnådd kvantitative analyseindikatorer, er det nødvendig å dechiffrere resultatene av tester for hepatitt C. Resultatene beregnes både i enheter i IE / ml og i eksemplarer per ml. For å få resultatene, konvertert til kopier, bruk flere teknikker.

    • HCV Monitor (konverteringsfaktor til ME - 2,7);
    • LCX HCV RNA (konverteringsfaktor til ME - 3,8).

    Tabell. Tolkning av den kvantitative analysen av HCV RNA ved PCR.

    Kvantitativ bestemmelse av RNA i hepatitt C-viruset

    "Identifisering av gener av hepatitt C-viruset (HVC) i pasientens blod er den andre fasen av laboratoriediagnosen av denne smittsomme patologien. For å oppdage et patogen som ikke har en cellemembran og følgelig overflateantigener, anvendes fremgangsmåten for polymerasekjedereaksjon. Ved hjelp av denne metoden er molekylet direkte bestemt, der all dens genetiske informasjon er kodet - RNA.

    RNA - Ribonukleinsyre, sammen med DNA, er en del av cellene i alle levende organismer. Hepatitt C-viruset inneholder et RNA-molekyl og har evnen til å mutere det.

    En HVC-genomprøve er vanligvis foreskrevet etter at en generell, biokjemisk blodprøve er utført og en positiv respons på antistoffer (anti-HVC) er oppnådd.

    Hva betyr dette?

    Studien av antistoffer mot HVC er en screening, det vil si det kan brukes til å undersøke store populasjoner av mennesker (leger, gravide, sykehuspasienter, givere, injeksjonsbrukere, HIV-smittet). Et negativt resultat av laboratorieanalyse av anti-HVC indikerer at ingen immunrespons på viruset ble oppdaget i pasientens blod. Et negativt resultat kan oppnås i slike tilfeller:

    Hvis en person aldri har blitt smittet med hepatitt C.

    Hvis følsomheten til laboratorietestsystemet var lavere enn konsentrasjonen av anti-HVC.

    Hvis infeksjonen skjedde mindre enn 2 måneder siden, og anti-HVC i blodet ikke er nok til å bestemme. Når en falsk negativ respons på grunn av menneskelige faktorer.

    Hvis resultatet er at antistoffene til HVC ble funnet i pasienten, betyr dette at hepatitt C-viruset var i pasientens kropp på tidspunktet for studien eller var i blodet for en tid siden. Med et positivt resultat på anti-HVC er det behov for ytterligere laboratorieundersøkelser som vil påvise det genetiske materialet til selve patogenet, bestemme konsentrasjonen av dets gener (viral load, viremia) og etablere genotypen.

    Analyse av Hepatitt C Virus RNA

    HVC-genomet under laboratorieforhold kan påvises ved å bruke flere studier:

    forgrenet DNA (p-DNA);

    transkripsjonal amplifikasjon (TMA);

    polymerasekjedereaksjon (PCR).

    P-DNA-metoden er en billig og enkel måte å oppdage virusgenomet hos et stort antall undersøkte personer. Dens viktigste ulempe er lav følsomhet: det viser kun HVC når konsentrasjonen overstiger 500 IE / ml.

    Metoden for transkripsjonal amplifikasjon detekterer virusnukleinsyrer i serum. Analysen har en høy følsomhet (5-10 IE / ml), men den er ennå ikke tilstrekkelig innarbeidet i allestedsnærværende laboratoriepraksis.

    PCR-metoden i Russland er den vanligste og tilgjengelige laboratorieundersøkelsen med høy følsomhet (fra 50-60 IE / ml).

    PCR-studien utføres i et hvilket som helst klinisk laboratorium som har riktig akkreditering. En svært viktig nyanse av denne diagnostiske metoden, som påvirker resultatet av analysen, er følsomheten til testsystemet som brukes i laboratoriet. For eksempel tillater diagnostisk følsomhet på 60 IE / ml, som i Invitro Laboratories, deteksjon av viralt RNA 3 måneder etter infeksjon. Ved lav følsomhet i testsystemet, kan patogenene ikke bli detektert selv 4 måneder etter infeksjon.

    Hepatitt C-virus RNA: PCR-metode

    PCR-metoden har mange fordeler i forhold til andre laboratorietester for påvisning av HVC-gener:

    høy følsomhet. Metoden tillater å bestemme patogenets genetiske materiale selv med minimumskonsentrasjonen i prøven;

    stor spesifisitet. Identifiserer gener av et virus av en bestemt genotype blant en rekke DNA og RNA av andre patogener, som tillater genotyping av patogenet;

    fartshastighet. Fraværet av en lang prosess med dyrking av patogenet forkorter tiden for å oppnå resultatet opptil flere timer; universality of analysis.

    Den universelle forskningsmetoden muliggjør samtidig bruk av en human blodprøve for å detektere det genetiske materialet til forskjellige patogener. Disse fordelene gjør det mulig å vurdere PCR som "gullstandard" for laboratoriediagnostisering av viral hepatitt C sammen med en enzymimmunanalyse for anti-HVC.

    PCR er en studie som brukes til å bestemme HVC-gener i et individs blod. Studien består av flere faser:

    Prøvetaking av biomaterialet.

    Gjentatt økning av konsentrasjonen av RNA-kopier i den utvalgte prøve.

    Påvisning av genetisk materiale ved hjelp av spesielle testsystemer.

    Etter å ha tatt det venøse blod fra pasienten, utføres kunstig initiering av prosessen med multiple replikasjoner (amplifisering, kopiering) av HVC-gener.

    For å gjøre dette må du på en bestemt måte endre temperaturen inne i røret med biomaterialet flere ganger. Når antall kopier av RNA i testrøret når ønsket verdi, utfør deteksjonen av patogenet ved hjelp av spesiell testdiagnostikk.

    kvalitativ (oppdager tilstedeværelsen av et virus),

    kvantitativ (bestemmer konsentrasjonen av virale gener per volumdel)

    genotypisk (etablerer genotypen av patogenet).

    Hepatitt C RNA: Kvalitativ analyse

    Oppgaven med kvalitets-PCR er å bestemme tilstedeværelsen av HVC i det presenterte biomaterialet. Denne studien utføres vanligvis for screening diagnose av sykdommen eller påvisning av vogn. Tilordne det etter at et anti-HVC er detektert av ELISA.

    For å diagnostisere hepatitt C er det tilstrekkelig å oppdage det genetiske materialet HCV kvalitativt, det vil si uten å telle sin konsentrasjon i blodvolumet. Resultatet av høyverdig PCR kan være: "RNA er detektert" eller "RNA er ikke detektert."

    Nøyaktigheten av metoden tilsvarer 95%. Samtidig når nøyaktigheten til testdiagnosen seg selv 100%, og 5% er den menneskelige faktoren, som alltid er tilstede i laboratorieundersøkelser. For å unngå en falsk-negativ analyse, særlig hos personer med lav viremi, er en høy følsomhet av det diagnostiske systemet som brukes i studien, nødvendig. Sensibiliteten til testsystemet bør ikke være mindre enn 60 IE / ml.

    Hepatitt C RNA: Kvantitativ analyse

    Kvantitativ analyse er foreskrevet når du trenger å vite nivået av viremia i menneskekroppen. Indikasjonene for å gjennomføre denne studien er:

    positivt resultat av høyverdig PCR, gitt deteksjon av antistoffer mot viruset;

    etablere scenen av patologi;

    bestemmelse av viral belastning i hepatitt;

    valget av kombinasjons antivirale legemidler;

    overvåke en virologisk respons på antiviral terapi;

    vurdering av sannsynligheten for overgang fra akutt hepatitt C til kronisk.

    Resultatet av analysen er uttrykt i IE / ml (internasjonale enheter i 1 ml serum) eller i kopier / ml (antall kopier av virusgener i 1 ml serum). Kvantitativ PCR er ikke normal: HVC-genet i humant blod bør normalt ikke oppdages. Resultatene fra undersøkelsen sammenlignes med referanseverdiene som er fastlagt for en varierende grad av viral belastning.

    Dermed er indikatorene (i IE / ml):

    under 4 × 10 * 5 betraktes som lav viremia;

    fra 4 × 10 * 5 til 8 × 10 * 5 - gjennomsnittlig;

    over 8 × 10 * 5 - høy.

    Jo flere kopier av virus RNA i blodet, jo mer aggressive sykdommen og jo større er risikoen for overføring av viruset til andre. Men nivået av viral belastning er ikke den eneste indikatoren som påvirker patologiens alvorlighetsgrad og den videre prognosen for pasienten: Genotypen av patogenet er også viktig.

    Etablering av en genotype er nødvendig for å tilordne riktig behandlingsregime. Det bestemmer også prognosen for pasientens helse og liv. For eksempel fører virusgenotype 3 ofte til fibrose eller skrumplever i leveren, sammenlignet med pasienter med bærere av genotype 1.

    Hepatitt C: analyser og transkripsjon

    RNA Diagnosen av hepatitt C kan ikke bare gjøres ved resultatene av kun kvalitativ og / eller kvantitativ analyse av PCR: bestemmelsen av HVC og nivået av viral belastning er ikke nok til å foreskrive tilstrekkelig antiviral terapi. En potensiell pasient bør undersøkes grundig (klinisk, laboratorium, instrumentelt) for å få et objektivt bilde av patologien. Riktig tilordne et sett med undersøkelser for å etablere diagnosen hepatitt C, og så kan legen kun dekode resultatene riktig.


    Forrige Artikkel

    Bomov Pavel Olegovich

    Relaterte Artikler Hepatitt