Dekoding av PCR-analyse for hepatitt C

Share Tweet Pin it

En spesiell laboratorieundersøkelse - analysen av PCR for hepatitt C - forenkler i stor grad diagnosen av denne virussykdommen. Hepatitt C er ikke et unntak. En liten blodprøve kan testes for innholdet av rna og annet genetisk materiale av viruset. Alle individer med antistoffer mot hepatitt C som sirkulerer i blodplasmaet, blir underkastet analyse med PCR, hvis tilstedeværelse bekreftet den kvalitative deteksjonen.

Fortolkningen av resultatene tolkes i kolonnen i forskningsformen som en "positiv" eller "negativ" analyse. I tillegg er det mulig å ikke bare bestemme minimumsvirusinnholdet, men også å telle antall partikler. Det er således mulig å bestemme estimert viral belastning og bestemme medisinsk behandling taktikk så nøyaktig som mulig.

Viral leverskade

Lever som et element i fordøyelseskanalen tar stor byrde. I sine celler forekommer de fleste metabolske reaksjoner av alle typer metabolisme, som sikrer optimal funksjon av alle organer og systemer. Samtidig er dens avgiftningsverdi flott for fjerning av slagg og metabolske produkter med enzymatisk galle.

Tapet av leveren av virus av forskjellig natur er ekstremt farlig for kroppen. Et mangfoldig klinisk bilde og manglende overholdelse av behandling fører hepatitt til det første når det gjelder helserisiko. Hepatitt C er kronisk og kan være negativ i lang tid, sakte parasitere i menneskekroppen. Viruset overføres gjennom biologiske væsker: blod og sjeldnere gjennom sæd. Narkotikamisbruk av ikke-sterile sprøyter, naturlig levering av smittede kvinner, utilsiktede skader eller kutt av helsepersonell kan føre til overføring av viruset til friske mennesker.

Tidlig diagnose av sykdommen er hemmet av det skjulte kliniske bildet og den usystematiske patologien. Et positivt resultat kan ganske enkelt gå glipp av dårlige analyser. Bare en betydelig skade på leverenceller forårsaker en viss symptomatologi, men den negative effekten av viremia gir da ingen sjanse til å gjenopprette orgelet.

Moderne medisin har utviklet spesielle metoder for å gjenkjenne de minste sporene av viruset. PCR, IFA, leverbiopsi kan oppdage den minste skade på leveren og minimumsnivået av antistoffer mot viruset. Analysen ved hjelp av PCR er den enkleste og mest pålitelige i diagnostisk praksis.

Kvalitativ analyse

Essensen av polymerasereaksjonen er genereringen av en sekvens av rna. Reaksjonen utføres i nærvær av de samme virale proteiner i blodplasmaet.

Spesielle katalysatorer lar deg syntetisere en lignende viral sekvens av kjeden, som sammenlignes med de kjente nukleotidene av viralt RNA. Basert på dette, bestemmer de viral belastning og leverskade.

PCR er i stand til å fange selv en eneste tilstedeværelse av det ønskede gen i det tatt blod. En slik diagnostisk kjedereaksjon er også meget spesifikk. Sekvensen av nukleotidkjeder er unik for hver skapning, slik at enzymatiske primere oppretter identiske sekvenser av ønsket genetisk informasjon. Dermed kan noe virus oppdages med den minste nøyaktighet, selv om den kvantitative indikatoren er ekstremt liten.

Pasienter i hvis blod ble funnet antistoffer produsert mot viral hepatitt, gjennomføre en kvalitativ studie av PCR eller Eph. Resultatet av analysen kan være både positivt og negativt, som i begge tilfeller krever behandling.

Den positive responsen til kjedereaksjonen skal deklareres som tilstedeværelsen av RNA-fragmenter av hepatittviruset eller som fenomenet infeksjon.

I blodplasmaet for øyeblikket virker viruset aktivt og parasitter over leveren celler. PCR-diagnostikk kan gi et negativt svar hvis det er få partikler av viralt RNA tilstede i plasma, under følsomhetsnivået av testen, eller slet ikke. Etter direkte infeksjon, blir virusmengden relativt langsomt, og først etter 1-2 uker, om eller annen kvalitativ forskning er i stand til å isolere dem.

Negativ analyse kan fås i følgende tilfeller:

  1. Når du tar materiale i ujevne forhold, får du en blodprøve med forurensning;
  2. Når en pasient tidligere har fått heparin injeksjoner.
  3. Med tilstedeværelsen av andre enzymer og substrater i prøvene tatt som forstyrrer løpet av kjedereaksjonen.

Kvantitativ analyse

Kvantitativ test som en mikrobiologisk diagnose er utformet for å bestemme virusbelastningen. En bekreftet kvalitativ analyse for viremia tjener som grunnlag for å bestemme mengden av genetisk materiale og dets konsentrasjon. Antallet detektert viral rna bestemmes i en enhet av blodvolum, vanligvis i 1 milliliter. De nødvendige materialene er uttrykt i internasjonale enheter, enkelte laboratorier bruker antall kopier i analysen av eif.

Vanligvis, før noen terapeutisk behandling, analyseres PCR kvantitativt. Telling av viral rna utføres ganske ofte: etter en, fire, tolv og tjuefire uker. 12. uke betraktes som veiledende, siden analysen i løpet av denne perioden utføres tolkning av effektiviteten av terapeutiske tiltak.

Kvantitativ analyse ved bruk av PCR eller IFA involverer å ta prøver fra en ven.

Tolkning av resultater som høy viral belastning starter fra en figur på 800.000 IE / ml. Et slikt positivt resultat for hepatitt C reflekterer tilstedeværelsen av minst 3.000.000 eksemplarer per milliliter blod. Det lave nivået av viremi stopper ved 400.000 IE / ml. Resultatene av studien kan være verdier som et negativt svar, samt indikatoren "under måleområdet."

En kvantitativ test med et estimat av "under måleområdet" sier at under reaksjonen var det ikke mulig å beregne RNA. Viruset er fortsatt sirkulerende i kroppen, som indikert ved en positiv kvalitativ test. En negativ indikator for kvantitativ analyse av PCR eller ifa indikerer fraværet av rna i denne blodprøven.

Til tross for begrensede metoder for overføring av viruset gjennom blodet øker risikoen for overføring av viruset gjennom sekretene fra kjønnskjertlene fra mor til barn.

Kvantitativ analyse gir betydelig hjelp til evaluering av terapeutiske inngrep. Ifa og PCR reflekterer virkningen av antivirale legemidler, bidrar til å etablere tidspunktet for behandling og vurderer dannelsen av pasientens immunitet. Den tidlige negative responsen av laboratorietester indikerer vellykket behandling og behovet for å redusere varigheten av behandlingen. Langsom nedgang i viremia kan tolkes som behovet for å modifisere terapeutisk kurs. Nivået på viral belastning bestemmer prognosen for sykdommen. Hepatitt med lav hastighet er sannsynligvis ganske enkelt behandlet og viruset kan fjernes helt fra kroppen. Høye nivåer av viral tilstedeværelse i blodet krever forsiktig oppmerksomhet og allsidig behandling.

Kvalitativ analyse for hepatitt C

Legg igjen en kommentar 7,180

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold studeres strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden forsømmet tilstand av leveren vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres også etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Tilordnet for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av kausjonsmiddelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller den milde formen, utføres PCR ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Ved donering av blod til hepatitt undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). Studier av PCR bidrar til å finne patogenmaterialet i strukturen av RNA og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

  • påvisning av tegn på betennelse i leveren;
  • screening studier for forebygging;
  • undersøkelse av personer i kontakt
  • diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
  • bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
  • levercirrhose;
  • for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.
Studier av PCR foreskrives av en lege for å bestemme effektiviteten av et behandlingsforløp for hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA til virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt nivå av konsentrasjon av det forårsakende middelet av hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lavt antall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse med polymerasekjedereaksjonsindeksen er tildelt alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å bestå testen for hepatitt B, da i en positiv konklusjon, og for hepatitt D. Også kvalitativt analysert reaksjon skal utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikatoren bør man huske på at analysens følsomhet for diagnostiske systemer er forskjellig, og at RNA hepatitt C fortsatt kan være i blodet, men ikke manifestert i analysen.

Spesielt sensitiv PCR-metode viser ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

  • mistenkte skjulte former for hepatitt C;
  • PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
  • i tilfelle gjenoppretting
  • å oppdage tidlig infeksjon.
Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekodingen av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, spesielt med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid selvtillit et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene fra den serologiske analysen tilstedeværelsen av antistoffer mot C-viruset, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er bare svært sjeldne tilfeller av falske positiver som finnes i diagnosen. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

Hva er PCR-analyse og viral belastning?

Polymerasekjedereaksjon (PCR) er en laboratoriemetode for å bestemme DNA og RNA. Det ble først testet for nesten et halvt århundre siden av den amerikanske Carey Mullis. Denne overfølsomme analysen er i stand til å identifisere genombæreren ved et enkeltkildemolekyl inneholdt i blod, spytt eller hud.

PCR-metoden har gode utsikter, brukes ikke bare i medisin, men også innen genteknologi og rettsmedisin. Med det, klone og lage nye typer DNA, bestemme graden av slektskap. En kriminell er identifisert av et epitel som ble funnet på forbrytelsesstedet.

PCR-analyse for hepatitt - hva gjør de og hvorfor?

Hvorfor er en PCR-analyse nødvendig for mistanke om hepatitt C, hva er det?

Hepatitt C-virus er et RNA-virus som inneholder 6 genotyper og opptil 500 undertyper. Av alle hepatitt har dette viruset den høyeste mutasjonskapasiteten og overvinter beskyttelsesbarrieren til immunsystemet. Av det totale antall hepatitt tilfeller forårsaket C-virus 70% av tilfellene av kronisk form og 30% av skrumplever og leverkreft.

Essensen av metoden: En del av genet under studien ved hjelp av spesielle enzymer og forhold som er tvunget til å formere seg in vitro. PCR-analyse tillater å bestemme virusstammen, uten hvilken det er umulig å utføre effektiv behandling: hver genotype er forskjellig følsom for antivirale legemidler. To typer PCR brukes:

Antiviral terapi krever konstant overvåking for raskt å justere behandlingen, og for disse formål brukes polymerasekjedereaksjon også.

Kvalitativ og kvantitativ PCR

PCR-kvalitativ på hepatitt C gir svaret: Er det en stamme av virus C i pasientens blod og hvilken. Genotyping er nødvendig for å klargjøre diagnosen, prognosen for sykdommen og bestemme tidspunktet for behandlingen.

I henhold til den aksepterte klassifiseringen er et gen angitt med et tall, og en undertype er et lite latinsk brev.

Spesiell forberedelse basert på naturlige stoffer.

Prisen på stoffet

Behandling vurderinger

De første resultatene er følt etter en uke med administrasjon.

Les mer om stoffet

Bare 1 gang per dag, 3 dråper

Instruksjoner for bruk

Dekryptere genotype C-virustabellen:

  • Genotype 1a, 1b, 1c
  • Genotype 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotype 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotype 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotype 5 a
  • Genotype 6 a

De vanligste genotypene 1,2,3. I Russland er de vanligste 1a, 1b, 2 og 3 stammer av virus C.

Genotypen av virus 1b er vanskeligere enn andre å behandle, i 90% blir det kronisk, hvorav 30% gjenfødes som leverkreft eller cirrhose.

Genotyper 2a og 3a har en grad av kroniskitet på 33-50%, mer responsive mot antiviral terapi.

Ved bekreftelse av virusets tilstedeværelse utføres en kvantitativ PCR-test for hepatitt C, som brukes til å beregne antall RNA-molekyler som er tilstede i pasientens laboratorieprøve.

Dekoding analyse

Kvalitets PCR analyse har to svar:

PCR-negativ betyr at patogenet ikke oppdages i blodprøver.
Et positivt svar antyder motsatt: RNA av en eller annen genotype av virus C er funnet.

Sannsynligheten for pålitelighet av resultatet er 95%. De resterende 5% er en feil forårsaket av en person. Denne muligheten er tillatt på grunn av de høye kravene til studien:

  • regler for lagring av reagenser;
  • passende kvalifikasjoner av medisinsk personale;
  • biomaterial renhet.

PCR-settet har 100% diagnostisk nøyaktighet.

Kvantitativ PCR av Hepatitt C RNA gjør det mulig å bestemme virusbelastningen på pasientens kropp. Med sin hjelp:

  • stadium av sykdommen er spesifisert (akutt, kronisk);
  • bestemmer effekten av antiviral behandling
  • Behovet for leverbiopsi undersøkes.

I noen tilfeller føler pasienten ingen tegn på sykdommen, mens HCV-infeksjonen oppdages ved PCR-metoden. Dette betyr at sykdommen er i et tidlig stadium av utvikling eller i kronisk form. Ytterligere studier er nødvendig for å klargjøre diagnosen, for tidlig antiviralbehandling.

Hepatitt C virusvekt

Viral belastning viser aktiviteten til hepatisk virus, hvor aktiv reproduksjonen oppstår.

Hva er dette?

PCR-kvantitativ hepatitt C måles i internasjonale enheter per 1 ml eller IE / ml, hvilket betyr hvor mange kopier av ribonukleinsyre av en bestemt stamme av virus C finnes i 1 ml blod under test.

Hva er høyt, hva er lavt?

Den virale lastanalysen tillater å bestemme tilstedeværelsen av viralt RNA i en konsentrasjon på 50 IE / ml. Normal viral belastning er når ingen HCV RNA-molekyl oppdages av PCR.

Viral load table:

  • lav konsentrasjon på 600 IE / ml 3 * 104 IE / ml;
  • middels konsentrasjon fra 3 * 104 IE / ml til 8 * 105 MM;
  • høyt nivå mer enn 8 * 105 IE / ml.

Lav viral belastning er et signal om at terapeutisk behandling er valgt riktig, og prognosen for en kur for hepatitt C er gunstig.

En høy konsentrasjon av virusceller indikerer at sykdommen er i den akutte fasen. Pasientens blod er en farlig infeksjonskilde.

Viral belastning, indikatorer av hvilke er på gjennomsnittlig nivå, kjennetegner enten den kroniske scenen av HWS, eller kan ha to utviklings trender: å øke eller redusere.

Etter ferdigstillelse, etter 6 måneder, utføres kontroll PCR.

Kostnad for PCR-diagnostikk

Følgende symptomer bør være årsak til bekymring:

  • generell svakhet;
  • misfarging av hud, øye sclera, utslipp;
  • kvalme;
  • redusert appetitt;
  • smerter i muskler og ledd;
  • tyngde i høyre hypokondrium;
  • forhøyede blodnivåer av AST og ALT.

I kontakt med infiserte pasienter, i den preoperative perioden, anbefales også hemodialyse undersøkelse.

Offentlige klinikker gjør en blodprøve for PCR gratis hvis det er en henvisning fra en smittsom spesialist eller en hepatolog.

Betalte tjenester for PCR-diagnostikk er gitt i alle større russiske byer. Kostnaden avhenger av type test, tilgjengelig utstyr, timing og andre faktorer.

Høykvalitets PCR analyse i Moskva og St. Petersburg vil koste fra 600 til 900 rubler. I regionene - fra 300 til 800 rubler.

Bestemmelsen av hepatitt C viral belastning vil koste 17 000-22 000 rubler. For andre typer infeksjoner prisen på kvantitativ forskning: 1200-10000 rubler.

Fordeler og ulemper ved PCR-metoden

Hva er fordelene med polymerasekjedereaksjonsmetoden over andre diagnostiske metoder?

  1. Et bredt spekter av applikasjoner. Ved å bruke PCR, ved hjelp av standardutstyr, kan du identifisere noe virus.
  2. Nøyaktighet av bestemmelse av patogenet. Ved hjelp av ulike kombinasjoner av enzymer og analyseteknikker oppnås en 100% spesifikasjon av studien for den angitte infeksjonen.
  3. Høy følsomhet. Metoden gjør det mulig å oppdage tilstedeværelsen av ett virusmolekyl i blodet.
  4. Effektivitet. Kvalitativ analyse er klar om noen timer, kvantitativ - om to dager.
  5. Diagnose av viruset i inkubasjonsperioden. Under PCR bestemmes patogenet ikke ved tilstedeværelse av antistoffer, når kroppen har en immunrespons, men før starten av den patologiske prosessen, noe som letter behandlingen.

Ulemper med PCR er resultatet av fordelene:

  • Analysens renhet krever høyeste grad av renhet, inkludert luft i laboratoriet, slik at "fremmed" DNA ikke kommer inn i prøven under studien;
  • høye krav til personell engasjert i innsamling og analyse av biomateriale.

PCR-studie for hepatitt C: typer, indikasjoner, transkripsjon

Viral hepatitt C er en alvorlig sykdom som oppstår med skade på leveren. I åtti prosent av pasientene blir det kronisk. Viruset multipliserer i leveren celler - hepatocytter - og forårsaker deres død. Dødt vev erstattes av bindevev, fibrose utvikler seg.

Etter hvert som fibrose utvikler seg, lever ikke i stand til å utføre sine funksjoner, begynner levercirrhose, noe som er farlig på grunn av komplikasjoner: økt trykk i portalveinsystemet, gastrointestinal blødning, nedsatt blodkoagulasjon, mentale forandringer på grunn av skade på hjernekjerner ved giftige produkter.

Årsaken til sykdommen er infeksjon av et virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen RNA-virus. Dette betyr at det genetiske materialet ved hvilket patogenene av patogenet syntetiseres, er kodet i ribonukleinsyremolekylet. Infeksjon skjer gjennom blod, seksuelt, og fra en gravid kvinne til fosteret. Dessverre kan en tilstrekkelig stor mengde tid passere mellom infeksjon og begynnelsen av antistoffproduksjonen - fra to uker til seks måneder. Dette tillater ikke å bestemme infeksjonen ved hjelp av metoden for immunoassay og begynne behandling i de tidlige stadier.

Hva er PCR-analyse?

PCR er en metode for molekylær analyse, som gjør det mulig å oppdage patogenes genetiske materiale allerede i den første uken etter infeksjon ved bruk av polymerasekjedereaksjon. Studien har høy spesifisitet, nøyaktighet, og tillater ikke bare å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også dets konsentrasjon og genotype.

For studien tas en pasients blod der virus-RNA kan være lokalisert. Primerer legges til de kunstig syntetiserte regioner av det ønskede gen av liten lengde, og RNA-polymerase er et spesielt enzym som øker mengden av genetisk materiale av patogenet flere ganger. Ved hjelp av et spesielt apparat, utføres flere sykluser av oppvarming og kjøling. Deretter analyseres materialet og sammenlignes med de kjente genene til viruset, på basis av hvilket det dannes en konklusjon om nærvær eller fravær av infeksjon.

Typer av PCR-analyse for hepatitt C

Det finnes tre typer PCR-analyse:

  1. Kvalitativ analyse av PCR. Den første fasen av studien. Det lar deg identifisere genetisk materiale av viruset i blodet.

  • Kvantitativ analyse av PCR. Lar deg bestemme virusbelastningen - konsentrasjonen av det genetiske materialet til patogenet i en milliliter blod. Denne studien utføres før behandlingsstart, og deretter i første, fjerde, tolvte, og (hvis løpet er lang), tjuefire uke med behandling for å evaluere effektiviteten.

  • Genotyping. Den forårsakende agensen av hepatitt C muterer ofte og raskt. Det var syv varianter av denne virusgenotypen funnet på planeten. I Russland er den første, andre og tredje typen vanlige. Hver av genotypene har en annen motstand mot terapi, for eksempel er effektiviteten av behandlingen av den første typen seksti prosent, og for den andre og tredje når denne tallet åttifem. Derfor, for å kunne velge de riktige stoffene og foreskrive et behandlingsforløp av tilstrekkelig varighet, er det nødvendig å avgjøre nøyaktig hvilken type virus pasienten er infisert med.
  • Indikasjoner for PCR-analyse for hepatitt C

    PCR-studien er foreskrevet i følgende tilfeller:

    • kontakt med en syk person der infeksjon kan oppstå;
    • positiv enzymimmunoassay;
    • tegn på skrumplever: endringer i leverens størrelse, utbredelse av milten, utseende på underlivet av subkutan venøs plexus;
    • Utseendet på symptomer på leverskade: smerte i høyre underliv, guling av huden;
    • økt aktivitet av ALT og AST i den biokjemiske analysen av blod;
    • før behandling begynner å bestemme viral belastning;
    • å overvåke effekten av antiviral terapi;
    • etter behandling for å kontrollere tilbakefall
    • i nærvær av diagnostisert hepatitt B, for å utelukke blandet leverskade.

    Forklaring av PCR-studier på hepatitt C

    Dekoding av PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitt C skal utføres av en spesialist på hepatolog eller smittsomme sykdommer. Analysere resultatene av PCR er nødvendig i kombinasjon med data om biokjemisk analyse av blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalifisert lege vil kunne analysere resultatene av forskning og, basert på dem, foreskrive riktig behandling.

    Dekoding av kvalitativ analyse.

    I det analyserte biologiske materialet fant det genetiske materialet til patogenet. Infeksjon bekreftet.

    Infeksjon er fraværende, eller mengden av patogenens RNA er under følsomhetsgrensen.

    Dekoding av kvantitativ analyse.

    Normal sats for friske mennesker. Det betyr at det ikke finnes hepatitt C-RNA i materialet som er studert, eller konsentrasjonen er under følsomhetsgrensen for studien.

    RNA-konsentrasjonen er under rekkevidden av kvantifisering. Disse resultatene tolkes svært nøye, korrelerer dem med data fra andre studier, ofte gjenstudier.

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon regnes som lav. Vanligvis betyr en reduksjon i mengden virus at terapien er vellykket.

    Mer enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon anses høy.

    Mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

    Mengden av RNA er over den øvre grense for kvantifikasjonsområdet. Det er umulig å trekke konklusjoner om graden av virusbelastning med dette resultatet. Vanligvis i slike tilfeller gjentas testen med fortynning av en blodprøve.

    Dekoding av genotyping.

    Oppdaget RNA av en bestemt genotype

    Hepatitt C-virus av en bestemt genotype og subtype ble påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romerske tall og latinske bokstaver, for eksempel - 1a, 2b. Totalt er det syv genotyper og sekstisju subtyper, men i Russland er det bare tre første typer.

    Hepatitt C virus RNA oppdaget

    RNA ble funnet i blodet av en sjelden genotype for Russland, som ikke kan tilskrives den første, andre eller tredje typen. Mer forskning er nødvendig.

    Dette resultatet indikerer at pasienten er sunn, eller at mengden av patogen-RNA er for liten.

    Det er mulig at PCR-analyse for hepatitt C er negativ, og enzymbundet immunosorbentanalyse gjenkjenner antistoffer mot viruset. Dette betyr at pasienten hadde akutt hepatitt C og gjenopprettet alene. Omtrent tjue tilfeller av infeksjon resulterer i spontan utvinning dersom pasientens kropp har tilstrekkelig motstand mot infeksjonen.

    Selv om PCR er en svært nøyaktig analyse, kan resultatet bli forvrengt i følgende situasjoner:

    • blodet ble transportert til laboratoriet under upassende forhold, temperaturen ble brutt;
    • biomaterialprøven var forurenset;
    • det var rester av heparin og andre antikoagulantia i blodet;
    • Undersøkere ble funnet å være inhibitorer - stoffer som reduserer eller stopper polymerasekjedereaksjonen.

    Fordelene med PCR over andre metoder

    1. Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materialet til det forårsakende middel. Ved hjelp av immunfluorescensanalyse kan bare immunoglobuliner bestemmes - stoffer som kroppen produserer som svar på en infeksjon. I tilfelle infeksjon med hepatitt C, kan intervallet mellom infeksjon og utbruddet av immunresponsen være flere uker og måneder, da vil ELISA være ineffektivt. PCR vil gi svar i den første uken etter infeksjon.

  • Lav sannsynlighet for feil. I materialet som studeres, bestemmer området for genetisk materiale, som er karakteristisk for bare en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-feil er mulige, siden samme type antistoffer kan frigjøres mot forskjellige virus - slike antistoffer kalles kryssantistoffer.

  • Høy følsomhet. PCR gjør det mulig å oppdage forårsakerens RNA selv i små mengder. Dette gjør det mulig å identifisere skjulte infeksjoner.
  • Hvordan forberede seg på bloddonasjon for PCR-studier

    For PCR-analysen av hepatitt C samles venøs blod. Vanligvis tas to porsjoner blod fra pasientens vene om gangen: den første sendes til PCR og den andre av ELISA. Dette er gjort for å mer nøyaktig vurdere hvor mye en pasient er infisert med et virus, og hvordan immunitet bekjemper den.

    Vanligvis er pasienten pålagt å følge følgende regler:

    • en blodprøve blir tatt om morgenen;
    • Intervallet mellom det siste måltidet og bloddonasjonen skal være åtte til ti timer;
    • to eller tre dager før analysen, er det nødvendig å forlate stekte og fete matvarer og alkohol;
    • i tjuefire timer før analysen, bør pasienten unngå fysisk anstrengelse: ikke bære vekter, ikke gå til treningsstudio eller svømmebasseng.

    Hepatitt C kvantitativ analyse transkripsjon

    Hepatitt C-viruset kan multiplisere i blodceller og forårsake lymfoproliferative sykdommer. Takket være de mange mutasjonene, svetter kroppens immunforsvar, og genotyper og subtyper av viruset opptrer. Med riktig og rettidig bestemmelse av en bestemt type, avhenger effekten av antiviral terapi. Faren for infeksjon er at sykdommen er asymptomatisk. Kun 15 prosent av 100 kan oppleve kvalme og oppkast, vekttap og feber.

    Definisjon av hepatitt C-virus

    Standardhastigheten til hepatitt C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskade som skyldes et akutt eller kronisk sykdomsforløp. Hepatitt C, nemlig RNA-viruset til Togaviridae-familien, er ekstremt vedvarende, overføres ved blodtransfusjon eller bruk av ikke-sterile objekter, feil hygieneforsyning, etc. Kvantitativ analyse lar deg undersøke blodet og identifisere den genetiske strukturen til det infiserte viruset.

    For å bestemme hepatitt C og dens genotyper utføres kvantitativ analyse. Avhengig av analysatoren kan tre nivåer av RNA virus forekomst bestemmes.

    Subtypene kan produsere ulike modifikasjoner, så spesifisiteten og følsomheten til analysatoren må være hundre prosent. I tillegg til å oppdage sykdommen hos en pasient, er det nødvendig å bestemme graden av alvorlighetsgraden. Noen laboratorier har ikke alle dataene om RNA-virusdekoding, det er en mulighet for en falsk positiv respons.

    Forskning på hepatitt C vil være mer nøyaktig når man studerer disse indikatorene:

    Ved å gi oppmerksomhet til resultatene av disse indikatorene og kroppens generelle tilstand, vises et resultat som viser infeksjonsgraden, formen og antall hepatitt C-celler i blodet. Dette bidrar til helbredelsesprosessen og effektiviteten av antiviral terapi.

    Typer av analyse for hepatitt C

    En flerdimensjonal kjedereaksjon (PCR) gir en ide om antall DNA-partikler i pasientanalyser tatt, og vil riktig identifisere det smittefarlige middel.

    Årsaker til smittsomme sykdommer kan forekomme. En infeksjon i leveren, som hepatitt C, kan behandles i vår tid når den oppdages i tide. Hvis et virus er mistenkt, utføres PCR-analyse.

    Gitt at symptomene på viruset i lang tid kan maskeres, kan en person ikke føle sykdommenes utbrudd. Men med en grundig undersøkelse i 60-70% av tilfellene, oppdages hepatitt C, den første analysen, som er ELISA, følger PCR-diagnosen. Analysen utføres i visse perioder for å bestemme sykdomsstadiet og foreskrive riktig behandling. For å unngå det, uten å anvende alle disse prosedyrene, er det mulig å bli vaccinert mot hepatitt.

    For det første er det en kvalitativ analyse som kun bekrefter hypotesen om infeksjonen, og deretter en kvantitativ, som bestemmer belastningen på leveren. Det ideelle alternativet ville være et negativt resultat for hepatitt C i pasientens genetiske materiale.

    Kvalitativ og kvantitativ analyse

    Det er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen av den første er at den bestemmer tilstedeværelsen av infeksjon i blodet. Og det betyr at viruset infiserer friske leverceller. Når antistoffer mot hepatitt C er funnet hos en pasient, utføres en kvalitativ test umiddelbart. Hastigheten som resultatet skal gi er "ikke oppdaget i blodet". Ved bestemmelse av konsentrasjonen av et virus, er det behov for å kjenne følsomheten til diagnosesystemet, siden folk som gjennomgår antiviral terapi kan gjøre analysen. Analysatorens følsomhetsgrad bør ikke være mindre enn 50 IE / ml.

    Når et virus oppdages, utføres en kvantitativ analyse, det vil si virusbelastningen, som bestemmer virusets konsentrasjon i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen.

    Viral RNA, som er i en viss mengde blod, er definert som normen med en hastighet på 1 ml per 1 cm kubikk. Etter kvantifisering av virusbelastningen er det mulig å bedømme infeksjonsgraden av det fortsatt uinfiserte miljøet. Så snart konsentrasjonen av hepatitt C stiger i blodet, er det nødvendig å isolere fra miljøet.

    Det er viktig i de første stadiene å oppdage graden av konsentrasjon av hepatitt, for å bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis graden av hepatitt C overskrides med mer enn 800 000 IE / ml, anses den for høy, med en økning på opptil en million kritisk. Hvis det kvantitative området er mindre enn 400 000 IE / ml, anses det at infeksjonen av de som er rundt, er mindre sannsynlig. Denne figuren gjør det klart at hepatitt C er tilstede i kroppen i svært små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative verdien av RNA-partiklene av viruset, så det blir gjenutnevnt flere ganger for nøyaktigheten av diagnosen.

    Hva er PCR?

    I dag er det et stort antall ulike sykdommer. Og ikke et mindre antall metoder for deres besluttsomhet. Siden infeksjonsagenter har lært å slå rot i miljøet og utvikle seg lett, er de nyeste teknologiene brukt til å diagnostisere dem. Polymerasekjedereaksjon (PCR) er en raskere og mer nøyaktig metode som søker å finne årsaken til sykdommen ved å øke delen av hepatittvirus DNA i prøven betydelig. Om han skriver ofte: leter etter en nål i en høstak, og bygger deretter en stabel nåler.

    Typer av PCR-metode

    Allokere kvalitativ og kvantitativ analyse av hepatitt. For å avgjøre om viruset er i kroppen, og de som har funnet antistoffer mot hepatitt C, utfører test av høy kvalitet. Dekoderingsanalyse gir resultatet: "positivt"; "Negative". Negativ mening betyr: enten personen er sunn eller det er ikke nok midler i blodet og de kan ikke bli funnet. Derfor er det verdt å gjennomføre en omprøving etter en stund.

    Et positivt resultat indikerer eksistensen av en infeksjon. Dette er nesten alltid den eksakte verdien. Feilfulle resultater er vanligvis avhengig av den menneskelige faktoren (feil lagring eller manglende overholdelse av metodens regler). Når frekvensen er, er resultatet negativt. Før testingen er det ingen spesielle regler, bare ta blod fra en blodåre.

    Hvis det er funnet, utfør en kvantitativ analyse (viral belastning) - den gir numeriske verdier: hvor mye RNA i hepatittviruset er for tiden i det foreskrevne volumet av materialet som er studert. Med den aktive utviklingen av infeksjon, kan den detekteres 1-2 uker i en infisert person. Blod er også vanligvis undersøkt fordi agenser sirkulerer fritt i den.

    Egenskaper ved kvantitativ PCR analyse

    Forskjellen i kvantitativ analyse er at ikke alt passerer. Kvalitativ - bestemmer tilstedeværelsen og kvantitativ - hjelper med å bekrefte konklusjonen av "hepatittvirus", prognosen for sykdomsforløpet og bestemme løpet av behandlingen. Hvor effektiv behandlingen er, er ved antall RNA før og under behandlingen. Også med sin hjelp bestemme utnevnelsen av doser av narkotika.

    vitnesbyrd

    Som regel blir det produsert før behandlingsstart. De viktigste indikasjonene kan være:

    • bestemmelse av viral belastning og kontroll av antiviral terapi;
    • PCR av høy kvalitet funnet antistoffer av hepatitt C;
    • finne akutt og kronisk hepatitt C;
    • eksistensen av blandet hepatitt;
    • når du planlegger en behandling
    • hvis en kvalitativ studie fortsatt finner sykdommenes tilstedeværelse etter den tolvte uken av behandlingen.

    Se også hvilken viral belastning i hepatitt: lav terapi utføres med hell; økt - behandlingen er ikke effektiv og må endres.

    Hva utføres på ulike stadier av sykdommen?

    I ulike faser av sykdommen utføres forskning for å gi en gjennomgang av fordelene ved behandling og planlegging av varigheten. Med gode svar på terapi er det forkortet. Ellers, med langsom tilbaketrekking av viruset, er behandlingsforløpet forlenget. PCR for hepatitt gjør 1,4, 12, 24 ukers behandling. Når indikatorer ikke faller etter 12 uker, konkluderer de at terapi ikke passer for denne organismen. Denne analysen brukes til å bestemme hvor aktiv infeksjonen er og hvor sannsynlig det er å overføre det. For eksempel, under graviditet er det fare for å infisere en baby. Etter terapi identifiserer du risikoen for sykdomsfall.

    transkripsjon

    Etter å ha gjennomført en studie, kan analysen deklareres ikke i tall, men med ordene: "under måleområdet" og "ikke oppdaget". Kvantitativ PCR er mer kvalitativ sensitiv. Konklusjonen "ikke oppdaget" kan si at infeksjonen ikke ble funnet. "Under måleområdet" - testen fant ikke viruset, men det har en liten verdi. I denne situasjonen, gjør en andre studie.

    Viral belastning er bestemmelsen av antall infeksiøse RNA i et foreskrevet volum blod (kvantitativt 1 ml = 1 kubikkcentimeter). Formulert i internasjonale målinger IE / ml. Separate laboratorier angir kopier / ml. Ulike testsystemer kan tyde på oversettelsen av komponenter i internasjonale verdier på egen måte. Tabell 1. Dekryptering av kvantitativ analyse av virus RNA

    Graden av kvantitativ analyse for hepatitt C

    Når en person er sunn, er normen - "ikke oppdaget". Hos syke mennesker vil reduksjonen i virusdose i resultatene per logaritmisk enhet være normen, noe som manifesteres av en reduksjon i antall nuller i analysen med en (for eksempel fra 1 * 106 IE / ml til 1 * 105 IE / ml). Grensene for omfanget av viruskonsentrasjon som bestemmer forsterkeren er innenfor området 1,8 * 102-2,4 * 107 IE / ml. Behandling av utfallet:

    • lav konsentrasjon - fra 600 IE / ml til 3 * 104 IE / ml;
    • medium - fra 3 * 104 IE / ml til 8 * 105 IE / ml;
    • høyt - over 8 * 105 IE / ml.

    avvik

    Når endringer i testresultater er ute av normen, kan dette tyde på sykdomsavkastning og multiplikasjon av viruset. Visse faktorer kan påvirke mottak av et upålitelig resultat, for eksempel forurensning av prøver; tilstedeværelsen i blodet av heparin og stoffer som reduserer virkningen av komponentene i PCR; laboratoriefeil; manglende overholdelse av testens regler.

    Også resultatet i flere laboratorier kan variere, kanskje det var en annen forskningsmetode. For å finne ut hvordan påvirket leveren er og faren for sykdommen, er det ikke nok å utføre kvantitativ PCR av hepatitt. I tillegg gjennomgår biokjemiske prosedyrer og biopsi.

    Når du planlegger en behandling, er viruset genotypet. På grunn av at hepatitt C er i stand til å forandre, er det flere grupper. For ulike behandlingstyper kan variere. Det er situasjoner når flere arter er tilstede, men analysen finner en som hersker. Deretter gjenopptas testen.

    Fordeler med metoden

    PCR-metoden gjør det mulig å gi en mening og foreskrive riktig behandling. Fordeler med teknikken:

    • Resultatets hastighet - krever ikke skillet og dyrking av arter av patogenet. Ved å automatisere prosessen kan du behandle og studere materialet med resultatet i 4-5 timer.
    • Direktiteten til å bestemme patogenet - å finne en spesiell del av DNA, indikerer direkte forekomsten av sykdommen. For eksempel finner ELISA - proteinmarkører (avfallsprodukter av bakterier), som ikke gir nøyaktig bevis på forekomsten av sykdommen.
    • Specificitet - Et stoff er studert som bare er karakteristisk for et spesifikt patogen, som utelukker reaksjonen på falske ko-reagerende midler.
    • Følsomhet - kan oppdage den minste mengden virusDescription av totalen.
    • Universitet - er basert på å finne DNA-fragmenter eller RNA av bestemte organismer. Dette gjør det mulig å utføre diagnostikk for noen agenter fra ett biomateriale, hvis andre metoder er maktløse.
    • Detekterer ikke bare åpenbare, men også latente infeksjoner - effektive for å studere agenter av vanskelig å vokse, ikke vokse, vedvarende.
    • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

    Gjennom denne studien kan alle bli diagnostisert for å verifisere fraværet av sykdommen. Men for pålitelige fakta må du følge instruksjonene strengt. PCR brukes i ulike felt: rettsmedisin, for faderskapsbestemmelse, for diagnostisering av ulike virus, for å oppdage narkotikaallergier, genkloning, mutagenese, DNA-sekvensering.

    Når er en virusbelastningstest tildelt?

    Denne studien er foreskrevet av en lege i tilfelle en positiv respons i diagnosen hepatitt C. Som regel utnevnes det samtidig med analysen for å bestemme genotypen av hepatitt C-viruset. Hva viser dekoding av en kvantitativ analyse for hepatitt C? Først av alt, viser denne analysen hvordan smittet pasienten er og følgelig er smittsom. Kvantitativ bestemmelse av viruset i blodet gir deg også mulighet til å bestemme hvor effektiv den påførte regimet er. Legene foreskriver det etter 4, 12 og 24 ukers behandling. En reduksjon i viral belastning indikerer at terapien er valgt riktig. Analysen er også utnevnt etter 24 uker fra slutten av behandlingen.

    Studier har vist at graden av virusbelastning ikke alltid påvirker utviklingsgraden av patologiske prosesser i leveren. Tilfeller av transport av viruset indikerer at personen selv ikke kan være syk med hepatitt C, men være en kilde til infeksjon for andre mennesker. I tillegg kan transportører når som helst bli syk. Hepatitt C-virus aktiveres når immuniteten minker, for eksempel etter akutt luftveisinfeksjon, influensa, alvorlig stress eller hypotermi.

    Hepatitt C overføringsmetoder

    Du kan få hepatitt C:

    • gjennom blodet. Infeksjon er mulig under transfusjon av forurenset blod, under operasjoner og manipulasjoner med blod, tannbehandling, fjerning av mull og vorter, dersom det ble gjort feil i steriliseringsinstrumenter;
    • i skjønnhetssalonger når du utfører tatoveringer, piercinger, trimmet manikyr og pedikyr, ansiktsrensing, etc.;
    • fra mor til barn under fødsel (5%);
    • under ubeskyttet sex med en smittet person;
    • mens du tar injeksjon av legemidler med ikke-engangs sprøyter;
    • under førstehjelp til en person som er infisert med et virus, om ikke å overholde sikkerhetsforanstaltninger

    I motsetning til annen hepatitt, er overføringsmetoder for hepatitt C hovedsakelig forbundet med blod. Innenriks måte å få hepatitt C er umulig! Hverken håndtrykk eller vanlig kyss (av ikke-seksuell art) og kommunikasjon, eller bruk av husholdningsartikler, kan overføre hepatitt C! Ikke bare ta manikyr og barberingstilbehør fra en person som lider av hepatitt C! Når du gjør førstehjelp til skader på pasienter med hepatitt C, må du alltid bruke hansker! Viruset dør når kokt etter et par minutter, og når det vaskes ved 60 ° C - etter tretti minutter. Frysing dreper ikke viruset. Viral effekt på viruset UV-stråling. Etter 16 timer dør viruset ved romtemperatur!

    PCR-diagnostikk

    PCR er den vanligste og nøyaktige metoden for å bestemme et virus og dets kvantitative evner. Metoden er i stand til å identifisere virus i ulike former og diagnostisere lite kjente sykdommer.

    PCR (polymerasekjedereaksjon) analyse utføres ved å ta blod og bestemme viralt RNA i det.

    Spesifikke enzymer blir tilsatt til blodprøver og bestemt i en spesiell reaktor. Det er en kloning av celler.

    Den første cellen er delt inn i to eksemplarer, og hver kopi er delt inn i to eksemplarer. Således, etter syntese av kopier, vises hundrevis av DNA-celler.

    DNA kan sammenlignes med en database med informasjon om alle slags patogener og identifisere infeksjonen i de tidlige stadiene av sykdommen.

    Fordelene ved PCR-metoden:

    • Mange diagnostiske metoder avslører bare forekomsten av viruset ved å isolere avfallsprodukter fra smittsomme mikroorganismer i blodet. PCR-metoden indikerer direkte årsaken til infeksjonen;
    • Specificiteten av PCR er at et unikt DNA-fragment påvises i blodprøven som skal undersøkes. Dette eliminerer sjansen for et falskt resultat;
    • PCR kan til og med oppdage enkeltceller av en infeksjon og diagnostisere flere patogener i en enkelt blodprøve.

    Kvalitativ analyse

    Hjelper med å oppdage viruset i blodet. Med et positivt resultat bør du fortsette undersøkelsen og gjennomføre en kvantitativ analyse som bestemmer sykdomsstadiet, og gi leger muligheten til å planlegge den mest gunstige behandlingstaktikken. Når denne analysen gjennomføres, tillates bare to konklusjoner:

    • "Oppdaget". Indikerer tilstedeværelsen av et virus i blodet. Et lignende resultat anses positivt. I blodet har virus RNA allerede blitt detektert, som allerede har begynt å utvikle, smitte friske celler og infisere leveren.
    • "Ikke oppdaget." Han sier at det ikke finnes Hepatitt C RNA i blodprøven. Det er også tilfeller at viruskonsentrasjonen i testprøven er ubetydelig og ikke faller innenfor sensitivitetsområdet for analysen. Det er verdt å merke seg at analysen avslører en infeksjon på den tiende dagen etter infeksjon, noe som gjør det mulig å bestemme viruset selv før dets betydelige eksterne manifestasjoner.

    Kvantitativ analyse

    Detekterer konsentrasjonen av det genetiske materialet til viruset i et bestemt volum blod. Dette gjør det ikke bare mulig å bestemme alvorlighetsgraden av sykdommen, men lar deg også se det komplette kliniske bildet av sykdommen (inkludert under behandlingen). Som et resultat av denne analysen kan det kun tre konklusjoner:

    Resultatet er "Positivt." Resultatet i en numerisk indikator reflekterer virusbelastningen. Konsentrasjonen av viruset bestemmer mengden av virus i 1 milliliter, som er lik 1 kubikkcentimeter blod. Måleenhetene for denne analysen er IE / ml (internasjonalt aksepterte enheter per milliliter). Hvis konsentrasjonen av viruspartikler er mindre enn 8x10 000 IE / ml, så er behandlingen effektiv, hvis det tvert imot er verdt å endre behandlingstaktikken.

    Hvis virusbelastningen i løpet av de første ukene av behandlingen faller til 60%, så er effektiviteten av behandlingen høy. Lavt nivå er opp til 400.000 IE / ml, og høye er fra 1.000.000 IE / ml. Viral belastning bestemmer omfanget av sykdommen og muligheten for overføring. Med et høyt nivå av konsentrasjon av virusceller i blodet, er risikoen for overføring av sykdommen vertikalt eller seksuelt stort nok.

    • Resultatet "Ugyldig". Dette resultatet betyr at viruset ble detektert i kroppen under den kvalitative analysen, men den kvantitative analysen kunne ikke bestemme konsentrasjonen i blodet. Dette skjer når mengden av virus-RNA-partikler i blodet ligger under deteksjonsområdet.
    • Resultatet er "Ikke oppdaget." Dekoderingsanalyse betyr fravær av RNA av hepatitt C-celler i blodprøven.

    Kvantitativ analyse av CRP utføres i alle stadier av sykdommen. For å identifisere de optimale behandlingsanalysene utføres i tide: (4., 12., 16. og 24. uke). Hvis resultatene viser en reduksjon i viral belastning, kan behandlingen betraktes som effektiv. Etter fullføring av behandlingen utføres en kvantitativ analyse for å oppdage tilbakefall, det vil si deteksjon av viruset etter at aktiviteten er redusert til et minimum.

    01 Prinsipper for HCV-diagnose

    Serologisk diagnostisering av hepatitt C er basert på deteksjon av unike markører av hepatitt C-virus i humane plasmaprøver: antistoffer mot HCV-antigener som tilhører immunoglobuliner av klasse G og M (anti-HCV-IgG og anti-HCV-IgM) og nukleinsyren (RNA) HCV).

    Prinsippet for metoden er basert på deteksjonen i testmaterialet til spesifikke DNA-fragmenter (RNA) av forskjellige biologiske objekter, deres selektive syntese og videre detektering av produktene av amplifikasjonsreaksjonen av disse fragmentene.

    Kvantitative modifikasjoner av PCR gir en ide om HV, som er avgjørende for prediksjon og kontroll av terapi for viral hepatitt C.

    02 Beregning av viral belastning i viral hepatitt C

    Vanligvis kan HCV RNA detekteres i blodet så tidlig som den første uken etter infeksjon, inntil anti-HCV (anti-HCV) vises, noe som ikke kan oppdages i løpet av de første 8-12 ukene. Begge markørene av HCV-infeksjon kan detekteres i blodet i forskjellige kombinasjoner, noe som krever riktig klinisk tolkning.

    Derfor, for å danne en endelig diagnose, er det tilrådelig, spesielt når bare en av de to HCV markørene oppdages, å retestere blodprøven for anti-HCV og HCV RNA.

    Studien utførte detektering og telling av antall kopier av HCV RNA ved sanntids-PCR.

    I klinisk praksis er den mest avanserte metoden for PCR-diagnostikk REAL TIME PCR, som utelukker forurensning av prøver og gir en konklusjon om tilstedeværelsen og mengden av HCV RNA to uker etter den tilsiktede infeksjonen. Denne teknikken bestemmer blant annet genotypen av et virus med en virusbelastning i en studie. Den kliniske spesifisiteten av testen er 100%. Standardområdet av testverdier er fra 15 til 100000000 IE / ml. Identifiserte genotyper av viruset 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6). Terskelen for en positiv test når virus RNA kan detekteres er 15 IE / ml. Den største fordelen med PCR-metoden er den meget høye følsomheten til analysen - opp til 1 kopi av det genomiske DNA av det smittsomme stoffet i testprøven i den nestede modifisering av PCR.

    PCR er en moderne, svært sensitiv metode. Men dens fordel - høy følsomhet - er samtidig sårbarheten, det vil føre til falske resultater selv når analysen utføres av høyt kvalifiserte spesialister i velutstyrte laboratorier. Forskningsresultater i ulike laboratorier faller ofte ikke sammen, noe som indikerer behovet for standardisering av diagnostiske systemer for PCR-diagnostikk og økt oppmerksomhet til utførelsen av denne typen forskning. Den høye prisen, analysens varighet, metodens kompleksitet og avviket mellom resultatene oppnådd i forskjellige laboratorier begrenser bruken av PCR i en bred praksis.

    Resultatene av studien er utstedt på et skjema med et bord som angir det påvist nivået av virus RNA (antall kopier eller konsentrasjon i IE / ml). For uttrykk for IE / ml kan andre matematiske symboler brukes, for eksempel 1. 9 * 10 ^ 5 (1. 9 ved 10 i 5 grader).

    03 Indikasjoner for studier

    Hovedindikasjonene for bestemmelse av viral belastning i viral hepatitt C er:

    • laboratoriebekreftet kvalitativ tilstedeværelse av patogen-RNA i blodserumet;
    • om den behandlende legen har spørsmål angående valget av antivirale legemidler;
    • Behovet for en nøyaktig vurdering av effektiviteten av behandlingen.

    Studien krever ikke spesiell forberedelse av pasienten.

    04 Tolkning av resultater

    Normalt har en sunn person ingen patogen RNA, det vil si at BH er null. BH uttrykkes i internasjonale enheter per ml. Tilordne en stor BH (> 400 000 IE / ml) og en liten BH (100000000 IE / ml

    For å overvåke effekten av antiviral terapi, bør real-time PCR-analyse brukes med et minimumsdeteksjonsnivå på 15 IE / ml. For å skille mellom lavt BH og høyt, brukes 500.000 IE / ml viralt RNA.

    Nivået på viral belastning overvåkes for både akutt og kronisk hepatitt C. Viral belastning registreres under behandlingen, ved fullføring og 24 uker etter behandlingen.

    Hos gravide er denne indikatoren fastsatt for diagnostiske formål, siden antiviral terapi under graviditet ikke utføres.

    Data på nivået av viral belastning brukes til å velge og kontrollere antiviral terapi, men gi ingen ide om utfallet av sykdommen, spesielt når det gjelder kroniske former av HCV med normal leverfunksjon.

    Under oppfølgingsvåren gjennomgår pasienter en gang årlig en kvalitativ bestemmelse av HCV RNA i blodet. Hvis det kvalitative resultatet er positivt, utføres ytterligere kvantitativ analyse med bestemmelse av viral belastning.

    05 Konklusjon

    Til dags dato brukes en rekke forskjellige metoder for å diagnostisere HCV, blant dem er kvantitativ telling av viral belastning nøkkelen til vellykket pasientbehandling. Fordelene ved denne metoden er høy pålitelighet, følsomhet og klinisk spesifisitet. I tillegg er nivået av virusbelastning en meget klar indikator for effektiviteten av behandling med antivirale legemidler, både i monoterapi og i kombinasjoner.

    Men på grunnlag av nivået av virusbelastning, kan man i ingen tilfelle dømme kurs og utfall av sykdommen. Derfor er denne indikatoren informativ for den behandlende legen bare i kombinasjon med andre data - resultatene av fibroscanning og biopsi med mikroskopi av leverceller. Således erstatter beregningen av nivået av viral belastning på ingen måte, men kompletterer kun eksisterende diagnostiske metoder som brukes i klinisk praksis.

    Nivået på viral belastning er den mest pålitelige indikatoren, slik at det på en pålitelig måte kan etableres et virus hos en pasient og overvåke behandlingen.


    Forrige Artikkel

    Hepatitt C bærer

    Relaterte Artikler Hepatitt