Kvalitativ analyse for hepatitt C

Share Tweet Pin it

Legg igjen en kommentar 7,180

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold studeres strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden forsømmet tilstand av leveren vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres også etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Tilordnet for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av kausjonsmiddelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller den milde formen, utføres PCR ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Ved donering av blod til hepatitt undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). Studier av PCR bidrar til å finne patogenmaterialet i strukturen av RNA og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

  • påvisning av tegn på betennelse i leveren;
  • screening studier for forebygging;
  • undersøkelse av personer i kontakt
  • diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
  • bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
  • levercirrhose;
  • for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.
Studier av PCR foreskrives av en lege for å bestemme effektiviteten av et behandlingsforløp for hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA til virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt nivå av konsentrasjon av det forårsakende middelet av hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lavt antall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse med polymerasekjedereaksjonsindeksen er tildelt alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å bestå testen for hepatitt B, da i en positiv konklusjon, og for hepatitt D. Også kvalitativt analysert reaksjon skal utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikatoren bør man huske på at analysens følsomhet for diagnostiske systemer er forskjellig, og at RNA hepatitt C fortsatt kan være i blodet, men ikke manifestert i analysen.

Spesielt sensitiv PCR-metode viser ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

  • mistenkte skjulte former for hepatitt C;
  • PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
  • i tilfelle gjenoppretting
  • å oppdage tidlig infeksjon.
Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekodingen av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, spesielt med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid selvtillit et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene fra den serologiske analysen tilstedeværelsen av antistoffer mot C-viruset, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er bare svært sjeldne tilfeller av falske positiver som finnes i diagnosen. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

Hva er Hepatitt C RNA?

Studien av RNA i hepatitt C-viruset er den viktigste prosedyren, som gjør det mulig å fastsette varighet og metoder for behandling av pasienter med stor nøyaktighet. Diagnosen av sykdommen består av flere forskjellige blodprøver, for eksempel:

  • hepatitt C markører (anti-HCV);
  • bestemmelse av hepatitt C-virus RNA (HCV RNA).

Den første studien er utført ved første mistanke om hepatitt. Det andre alternativet er den mest signifikante i behandlingen av HCV RNA, så betrakt det mer detaljert.

Hva er viral hepatitt C?

Viral hepatitt C, eller HCV, er en smittsom sykdom som påvirker leveren. Infeksjon med viruset skjer gjennom blodet. Du kan bli smittet ved å gjøre blodtransfusjon når regler for sterilisering av medisinske instrumenter ikke følges. Oftere er det tilfeller når sykdommen oppnås seksuelt eller fra en gravid mor til fosteret. Hepatitt C kan være av 2 typer.

Kronisk hepatitt C er den farligste. Det er en form for sykdom som kan vare i livet. Det fører til alvorlige problemer i leverfunksjonen, som skrumplever eller kreft. I 70-90% av infiserte mennesker blir sykdommen kronisk.

Den viktigste faren for hepatitt C er at den fortsetter skjult, uten icteric tegn. Samtidig klager de oftest på feber, kvalme og oppkast, fysisk svakhet, økt tretthet, tap av matlyst og vekt. På samme tid, på grunn av en liten herding av leverenvevet, opptrer den ondartede degenerasjonen ganske ofte. Av denne grunn blir hepatitt C ofte referert til som en "tidsbombe" eller "kjærlig morder".

En annen funksjon av sykdommen er den svært sakte utviklingen, beregnet i dusinvis av år.

Som regel føler de smittede ikke noen symptomer og er ikke klar over sin sanne tilstand. Ofte kan en sykdom kun oppdages ved å kontakte en lege på et annet emne.

På risiko er:

  • barn som fikk hepatitt C-viruset fra sine mødre;
  • narkomane;
  • folk som gjennomsyret deler av kroppen eller tatoverte med ikke-sterile instrumenter;
  • mottar donorblod eller organer (fram til 1992, da hemodialyse ikke ble utført);
  • folk smittet med hiv;
  • medisinsk personale i kontakt med infiserte pasienter.

Bestemmelse av hepatitt C RNA

Definisjonen av hepatitt C-virus-RNA, også kalt hepatitt C-PCR, er en studie av biologisk materiale (blod) som kan brukes til å bestemme direkte tilstedeværelse av hepatittvirusgenomater i kroppen (et enkelt virus er et enkelt RNA).

Hovedprøven er PCR, eller polymerasekjedereaksjonsmetoden.

Det finnes to typer blodprøver for HCV RNA:

Kvalitetstest

Gjennomføring av en kvalitativ analyse gjør det mulig å avgjøre om viruset er i blodet. Alle pasienter der C-hepatittantistoffer er funnet, må bestå denne testen. Ifølge resultatene kan du få 2 svar: "tilstede" eller "fravær" -virus. Ved et positivt testresultat (detektert) kan man dømme den aktive reproduksjonen av et virus som infiserer friske celler i leveren.

Testen utført på PCR av høy kvalitet er innstilt til en bestemt følsomhet, fra 10 til 500 IE / ml. Hvis hepatittviruset oppdages i blodet med et spesifikt innhold på mindre enn 10 IE / ml, kan deteksjon av viruset bli umulig. Et svært lavt spesifikt virusinnhold observeres hos pasienter som har antiviral terapi blitt foreskrevet. Derfor er det viktig at følsomheten til det medisinske systemet er høyt for å diagnostisere og sette et kvalitativt resultat i polymerasekjedereaksjonen.

Ofte utføres polymerasekjedereaksjonen av C-hepatitt umiddelbart etter å finne de tilsvarende antistoffer. Etterfølgende tester, under gjennomføringen av antiviral terapi, utføres på 4., 12. og 24. uke. Og en annen analyse etter avslutning av HTP er gjort etter 24 uker. Så - en gang i året.

Kvantitativ test

Kvantitativ analyse av PCR RNA, som noen ganger kalles viral belastning, bestemmer konsentrasjonen (spesifikt innhold) av viruset i blodet. Med andre ord, viral belastning er definert som en viss mengde viralt RNA, som kan være i en bestemt mengde blod (det er vanlig å bruke 1 ml, lik 1 cm i en terning). Enhetene for testresultater er internasjonale (standard) enheter dividert med en milliliter (IE / ml). Virusets innhold forekommer noen ganger annerledes, det avhenger av laboratoriene der forskningen utføres. For hepatitt C bruker kvantitativ bestemmelse noen ganger verdier som kopier / ml.

Du må forstå at det ikke er noen spesifikk avhengighet i alvorlighetsgraden av C-hepatitt på konsentrasjonen av denne stammen i blodet.

Sjekk "viral load" lar deg bestemme graden av smittsomhet av sykdommen. Dermed øker risikoen for å infisere en annen person med et virus med en økning i konsentrasjonen av hepatitt i blodet. I tillegg reduserer det høye innholdet av viruset effekten av behandlingen. Derfor er lav viral belastning en svært gunstig faktor for vellykket behandling.

I tillegg har hepatitt C-testen og dens bestemmelse ved PCR en stor rolle i anvendelsen av terapi for sykdommen og bestemmer suksessen av behandlingen. Basert på testresultatene er det planlagt et rehabiliteringskurs. For eksempel, hvis den spesifikke konsentrasjonen av hepatittviruset er for sakte, er antiviral terapi forlenget, og vice versa.

I moderne medisin antas det at belastningen på mer enn 800000 ME / ml er høy. En belastning på over 10 000 000 ME / ml anses kritisk. Men eksperter fra forskjellige land har fortsatt ikke den samme oppfatningen om grensene for virusbelastningen.

Frekvensen av den kvantitative testen

I generelle tilfeller utføres en kvantitativ analyse av hepatitt før antiviral terapi og 3 måneder etter avslutning av medisinske prosedyrer for å bestemme kvaliteten på den utførte behandlingen.

Som et resultat vil en kvantitativ test bli vurdert som en kvantitativ vurdering av resultatene for prøven spesifisert ovenfor. Som et resultat vil dommen "under det målte området" eller "ikke oppdaget i blodet" bli utstedt.

Sensitivitetsparameteren til en kvalitativ test er vanligvis lavere enn sensitiviteten til en kvantitativ analyse. Den "Manglende" transkripsjonen viser at begge typer analyser ikke fant virus-RNA. Når testindeksen var "under det målte området", fant en kvantitativ type analyse sannsynligvis ikke hepatitt-RNA, selv om dette bekrefter tilstedeværelsen av et virus med et svært lite spesifikt innhold.

Hepatitt C og dens genotyper

Hepatitt C-virus RNA-genotyping diagnostiserer tilstedeværelsen av forskjellige genetiske typer hepatitt C. Mer enn 10 typer av det virale genomet er kjent for vitenskap, men for medisinsk praksis er det tilstrekkelig å utelukke flere genotyper som har størst andel i regionen. Å bestemme den genetiske typen spiller en nøkkelrolle i valg av behandlingstidspunktet, noe som er svært nødvendig dersom du tar hensyn til det store antallet bivirkninger av medisiner for hepatitt.

Metoder for behandling av viral hepatitt C

Den eneste effektive måten å kurere hepatittviruset, er som regel en kombinasjon av 2 medisiner: interferon-alfa sammen med ribavirin. Individuelt er disse stoffene ikke like effektive. Den anbefalte dosen av legemidler og tidspunktet for bruk bør kun foreskrives av lege og individuelt for hver pasient. Behandling med disse legemidlene kan ta fra 6 til 12 måneder.

I dag ikke oppfunnet narkotika som garanterer et hundre prosent utvinning fra viruset. Men med riktig behandling kan helbredelse av pasienter nå opptil 90% av antall tilfeller.

Bruk av PCR-diagnostikk

Polymeraskjedereaksjon (PCR) i molekylærbiologi er en eksperimentell metode for å oppdage virus. Det lar deg øke konsentrasjonen av bestemte nukleinsyrefragmenter (DNA) i prøver av biologisk materiale, noe som gjør det mulig å bestemme dem (gjenkjenne) og telle.

Analysen utføres som følger. Genetisk materiale (en blodprøve), som potensielt kan inkludere det ønskede genet, blir introdusert i røret. Det er også plassert primere - kjemisk syntetiserte segmenter av en liten lengde av ønsket gen.

DNA- eller RNA-polymerase er også tilsatt til karet, det er i stand til å lineere opp en nukleinsyrekjede som er helt identisk med originalen. Den resulterende sammensetning injiseres og et sett med fire fri nukleotider - et spesielt byggemateriale for RNA eller DNA, hvorav den ene inneholder radioaktive fosforpartikler.

Den resulterende blanding oppvarmes til 95-96 ° C, og derfor er to DNA-spiraler, som normalt er sammenflettet, vevd. Deretter avkjøles legemidlet, hvorpå primene selv fester seg til den ønskede regionen av virusgenomet, og hindrer at RNA (eller DNA) danner en dobbelt helix igjen.

Under kjøleprosessen søker polymerasen etter en fri nukleotidkjede. For funksjonen av dette enzymet er det nødvendig en enkelt kjede av nukleotider. Siden polymerase glir langs DNA-kjeden (som en ring på et tau), er den ikke i stand til å arbeide på en dobbelt helix.

Etter dette utføres en gjentatt varmesyklus som skyldes hvilke kjeder av nukleotider som er separert. Ved hver av disse syklusene av PCR øker mengden i prøven av det ønskede hepatittgenet eksponentielt, og resten av det genetiske materialet blir produsert (vokser) lineært.

Etter rensing av løsningen fra nukleotidrester og separasjon ved elektroforese av DNA-kjeder av molekylvektsparameteren, kan man lett bestemme om det er et ønsket gen i prøven under studie eller ikke.

Fordeler med PCR

Laboratorietesting ved hjelp av PCR tillater enda mer informasjon enn tilstedeværelsen av virus-RNA. Ved å bestemme parameteren for nivået av radioaktiv stråling, er det mulig å identifisere hvor mye genetisk materiale som opprinnelig var inneholdt i prøven under studien. I tilfelle av hepatitt, bestem indikatoren for nivået av viral belastning.

En annen fordel ved denne metoden er den meget høye følsomhetsgrad av CR-reaksjonen. Det er mye høyere enn klassiske metoder for å oppdage virus. Ideelt sett, for å identifisere ønsket gen, for PCR, er bare ett virus i prøven tilstrekkelig.

I tillegg er PCR helt spesifikt. Dens primere er utformet på en slik måte at de stemmer fullt overens med de unike områdene av de ønskede gener som ingen annen sekvens har. Som fingeravtrykk er unike, er det unike nukleotidsekvenser i hvert gen.

Kvalitativ analyse av PCR

Kvalitativ analyse lar deg bare identifisere tilstedeværelsen av et virus i blodet. Denne testen skal utføres for alle pasienter i hvilke antistoffer mot hepatitt C ble funnet i blodet. Det kan resultere i bare én av to verdier: "detektert" eller "ikke oppdaget". I en sunn person skal normen (referanseverdi) "ikke oppdages".

Det er en spesiell tolkning av slike resultater av kvalitativ forskning:

  • Resultatet er "oppdaget". Dette betyr at et fragment av RNA som er spesifikt for hepatitt C-viruset ble funnet i den analyserte prøven av biologisk materiale tatt. Det er derfor et faktum at pasienten er infisert med hepatitt C-viruset. Hvis resultatet av høyverdig PCR er "detektert", indikerer dette at viruset multipliserer og på denne tiden smitter det nye leverceller i kroppen.
  • Resultatet er "ikke oppdaget." En slik dom indikerer at i den analyserte prøven av biologisk materiale som er oppnådd i dette laboratoriet, ble det ikke funnet noe fragment av RNA som er spesifikt for hepatitt C-viruset. Alternativt var konsentrasjonen av RNA av patogeninfeksjonen i denne prøven under sensitivitetsgrensen for testen.

I den akutte fasen av RNA i hepatitt C-viruset kan slike kvalitative studier ved PCR-metoden detekteres allerede etter 1-2 uker umiddelbart etter kroppsinfeksjon, det vil si lenge før utseendet av antistoffer mot hepatitt selv.

Unøyaktige testresultater fra denne studien kan fås ved å:

  • forurenset biomateriale;
  • tilstedeværelsen av heparin i pasientens blod;
  • Tilstedeværelsen i prøven av kjemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) som påvirker de ulike komponentene i PCR.

For å gjennomføre en kvalitativ analyse av PCR, er det ikke nødvendig med spesiell forberedelse av pasienten for studien. Venøst ​​blod brukes som et materiale.

Evaluering av resultater

HPR-test av høy kvalitet har en viss grad av følsomhet, og avhengig av nøyaktigheten av forskningen og nivået på utstyret i laboratoriet kan variere fra 10 til 500 IE / ml.

Dette betyr at hvis viruset i blodprøven er tilstede i en meget lav konsentrasjon (mindre enn terskelverdien av følsomheten til dette laboratoriet), kan resultatet bestemmes som "ikke detektert" hos en pasientpatient. På grunn av dette, når det utføres en kvalitativ analyse av PCR med lavt nivå av viremia (lav viruskonsentrasjon), for eksempel for pasienter som gjennomgår antiviral terapi, er det svært viktig å kjenne følsomhetsgrensen for dette diagnostiske systemet.

Varianter av diagnostiske systemer

For å kontrollere den virologiske responsen, anbefales det å bruke diagnostiske systemer med en følsomhetsgrense på minst 50 IE / ml for antiviral behandling. Disse kriteriene er oppfylt, for eksempel med Cobas Ampicolor HCV-test-analysatorer (nøyaktig til 50 IE / ml), samt RealBest HCV RNA (med følsomhet på 15 IE / ml).

I henhold til WHO-anbefalinger, for å etablere en endelig diagnose av hepatitt C, er det nødvendig å basere seg bare på tre ganger deteksjon av C-virus-RNA i pasientens serumprøver, uten andre varianter av hepatittmarkører.

I tillegg til PCR-metoder, brukes en TMA-analyse (transkripsjonal amplifikasjonsmetode) til å detektere HCV RNA hos pasienter. Den har den beste følsomhetsgrensen (5-10 IE / ml), men i vårt land er en slik testmetode ikke særlig vanlig.

Utvalg av detekterbare virusmodifikasjoner

En slik kvalitativ bestemmelse i serum av tilstedeværelsen av RNA i hepatitt C-viruset gjør det mulig å bestemme flere genotyper av dette viruset. For tiden vet vitenskapen mer enn seks genotyper av dette viruset, så vel som om 10 subtyper av denne sykdommen.

I vårt land er vanlige virus 1, 2, 3 genotyper. Laboratorier kan oppdage følgende genotyper: 1a og 1b, 2a, 2b og 2c, samt 3, 4, 5a og 6, uavhengig av undertyper. For alle virusmodifikasjoner er deteksjonsspecifikiteten 100%.

PCR kvantitativ analyse

Ved hjelp av en kvantitativ PCR-test bestemmes nivået av konsentrasjon av hepatittviruset i blodprøver (virusbelastning). Denne testen for viremia (viruskonsentrasjon) lar deg bestemme antall enheter av et bestemt genetisk materiale (det mest virale RNA) som detekteres i en viss mengde. I dette tilfellet bestemme konsentrasjonen i 1 ml, som tilsvarer 1 cu. cm.

De kvantitative parametrene til analysen er uttrykt i figurer, for dette formål brukes internasjonale enheter (IE) per ml (ml), referert til som IE / ml, som måleenheter. Nå i noen laboratorier kan mengden av virus bestemmes i andre enheter: Antall kopier per ml er angitt som kopier / ml.

  • Datoer. For hepatitt C, gjøres en slik kvantitativ analyse av PCR umiddelbart før starten av behandlingen. Deretter 1., 4., 12. og 24. uke. Evaluering på 12. uke er indikativ, det gjør det mulig å bestemme effektiviteten av terapien.
  • Forberedelse for analyse. For å utføre en kvantitativ analyse av PCR, er det ikke nødvendig med spesiell forberedelse av pasienten til studien. En halv time før prøvetaking bør ikke røyke. Venøst ​​blod brukes som laboratoriemateriale.

Evaluering av resultater

For ulike laboratorietestsystemer er det forskjellige konverteringskvoter for denne indikatoren i IE / ml. I gjennomsnitt tar de en konverteringsparameter, der 4 kopier / ml = 1 IE / ml. Det vil si at hvis laboratoriet gir resultatet av PCR-analyse 2,4 * 10 6 kopier / ml, så skal denne parameteren deles inn i 4 og vi får 6 * 10 5 IE / ml.

En belastning på 800.000 IE / ml regnes som høy, noe som tilsvarer omtrent 3.000.000 eksemplarer / ml. Lav viremia, ifølge noen forfattere, tilsvarer parametrene for kvantitativ PCR under 400 000 IE / ml.

Som resultat av den kvantitative testen kan de endelige resultatene ikke leveres i form av en digital verdi, men: "under måleområdet" eller "ikke detektert".

  • Vurdering: "under måleområdet." Dette antyder at den kvantitative testen ikke kunne oppdage hepatitt C viral RNA, men selve viruset er tilstede i kroppen i svært lave konsentrasjoner. Dette fremgår av en ytterligere kvalitativ test, som bekrefter faktumet av tilstedeværelsen av viruset.
  • Vurdering: ikke oppdaget. Dette resultatet indikerer at den kvantitative testen ikke ble funnet i prøven av virus-RNA.

Parameteren for viral belastning bestemmer først og fremst graden av infeksiøsitet av sykdommen, nivået av "infeksjon" av pasienten. Jo høyere pasientens viruskonsentrasjon er, jo større er sannsynligheten for at den overføres til andre mennesker. For eksempel, under samleie med en syke person, eller vertikalt. Denne kvantitative indikatoren bidrar også til å bestemme effekten av behandlingen av pasienten.

Å gjennomføre en kvantitativ analyse av KKP er viktig for antiviral terapi, vurderer suksess og planlegger varighet på kurset. Med en rask respons fra kroppen til behandling og en lav grad av viremi, kan varigheten av behandlingen forkortes.

Hvis den kvantitative PCR-parameteren reduseres sakte, bør antiviral terapi forlenges eller modifiseres. Hvis nivået av viral belastning er lav, er dette en gunstig faktor for terapi, men hvis forhøyet, er metoden for behandling som brukes, ineffektiv og legemidlene eller metoder for deres bruk bør endres.

Hva er normer for kvantifisering av hepatitt C?

Hepatitt C-viruset kan multiplisere i blodceller og forårsake lymfoproliferative sykdommer. Takket være de mange mutasjonene, svetter kroppens immunforsvar, og genotyper og subtyper av viruset opptrer. Med riktig og rettidig bestemmelse av en bestemt type, avhenger effekten av antiviral terapi. Faren for infeksjon er at sykdommen er asymptomatisk. Kun 15 prosent av 100 kan oppleve kvalme og oppkast, vekttap og feber.

Definisjon av hepatitt C-virus

Standardhastigheten til hepatitt C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskade som skyldes et akutt eller kronisk sykdomsforløp. Hepatitt C, nemlig RNA-viruset til Togaviridae-familien, er ekstremt vedvarende, overføres ved blodtransfusjon eller bruk av ikke-sterile objekter, feil hygieneforsyning, etc. Kvantitativ analyse lar deg undersøke blodet og identifisere den genetiske strukturen til det infiserte viruset.

For å bestemme hepatitt C og dens genotyper utføres kvantitativ analyse. Avhengig av analysatoren kan tre nivåer av RNA virus forekomst bestemmes.

Subtypene kan produsere ulike modifikasjoner, så spesifisiteten og følsomheten til analysatoren må være hundre prosent. I tillegg til å oppdage sykdommen hos en pasient, er det nødvendig å bestemme graden av alvorlighetsgraden. Noen laboratorier har ikke alle dataene om RNA-virusdekoding, det er en mulighet for en falsk positiv respons.

Forskning på hepatitt C vil være mer nøyaktig når man studerer disse indikatorene:

Ved å gi oppmerksomhet til resultatene av disse indikatorene og kroppens generelle tilstand, vises et resultat som viser infeksjonsgraden, formen og antall hepatitt C-celler i blodet. Dette bidrar til helbredelsesprosessen og effektiviteten av antiviral terapi.

Typer av analyse for hepatitt C

En flerdimensjonal kjedereaksjon (PCR) gir en ide om antall DNA-partikler i pasientanalyser tatt, og vil riktig identifisere det smittefarlige middel.

Årsaker til smittsomme sykdommer kan forekomme. En infeksjon i leveren, som hepatitt C, kan behandles i vår tid når den oppdages i tide. Hvis et virus er mistenkt, utføres PCR-analyse.

Gitt at symptomene på viruset i lang tid kan maskeres, kan en person ikke føle sykdommenes utbrudd. Men med en grundig undersøkelse i 60-70% av tilfellene, oppdages hepatitt C, den første analysen, som er ELISA, følger PCR-diagnosen. Analysen utføres i visse perioder for å bestemme sykdomsstadiet og foreskrive riktig behandling. For å unngå det, uten å anvende alle disse prosedyrene, er det mulig å bli vaccinert mot hepatitt.

Kvalitativ og kvantitativ analyse

Det er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen av den første er at den bestemmer tilstedeværelsen av infeksjon i blodet. Og det betyr at viruset infiserer friske leverceller. Når antistoffer mot hepatitt C er funnet hos en pasient, utføres en kvalitativ test umiddelbart. Hastigheten som resultatet skal gi er "ikke oppdaget i blodet". Ved bestemmelse av konsentrasjonen av et virus, er det behov for å kjenne følsomheten til diagnosesystemet, siden folk som gjennomgår antiviral terapi kan gjøre analysen. Analysatorens følsomhetsgrad bør ikke være mindre enn 50 IE / ml.

Når et virus oppdages, utføres en kvantitativ analyse, det vil si virusbelastningen, som bestemmer virusets konsentrasjon i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen.

Viral RNA, som er i en viss mengde blod, er definert som normen med en hastighet på 1 ml per 1 cm kubikk. Etter kvantifisering av virusbelastningen er det mulig å bedømme infeksjonsgraden av det fortsatt uinfiserte miljøet. Så snart konsentrasjonen av hepatitt C stiger i blodet, er det nødvendig å isolere fra miljøet.

Det er viktig i de første stadiene å oppdage graden av konsentrasjon av hepatitt, for å bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis graden av hepatitt C overskrides med mer enn 800 000 IE / ml, anses den for høy, med en økning på opptil en million kritisk. Hvis det kvantitative området er mindre enn 400 000 IE / ml, anses det at infeksjonen av de som er rundt, er mindre sannsynlig. Denne figuren gjør det klart at hepatitt C er tilstede i kroppen i svært små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative verdien av RNA-partiklene av viruset, så det blir gjenutnevnt flere ganger for nøyaktigheten av diagnosen.

Resultater av kvantitativ analyse

Oppgaven med å bestemme mengden av virusbelastning i blodet til en pasient er identifikasjonen av infeksjonsgraden til andre.

Resultatene av PCR-analysen:

  1. Et positivt svar betyr at det er infeksjon i det biologiske materialet. Analysen tillater å bestemme eksakt antall infiserte celler.
  2. Det negative svaret indikerer fraværet av infeksjon, som er nøye søkt i kroppen.

Metoden for kvantitativ bestemmelse av hepatitt C er nøyaktig og informativ, utført på utstyr med høy følsomhet. Dekryptering av resultatene av analysen lar deg finne ut om infeksjonen og dens spesifikasjoner, for å se det minste antallet infiserte celler på svært sensitive analysatorer.

False-positive eller motsatte resultater er sjelden gitt av analysen, oftere skjer dette i immunanalyser.

Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C

Hepatitt er en alvorlig sykdom som har mange årsaker. Grunnlaget for utviklingen er direkte eller indirekte skade på leveren. Med tanke på dens betydning for hele organismen, kan man bare gjette hvor vanskelig patologien er. I denne artikkelen vil vi nærmere undersøke funksjonene i kurset og laboratoriediagnosen av hepatitt C.

Årsaken til sykdommen er et virusmiddel som refererer til RNA-holdige patogener. Den har en særegen egenskap - evnen til å mutere, det vil si å forandre strukturen. På grunn av dette unngår infeksjonen fra angrepet av immunsystemet og fører i de fleste tilfeller til kronisk betennelse i leveren.

Gitt eksistensen av forskjellige undertyper av viruset, bør valget av medisiner være basert på resultatene av genotyping. Til tross for en lang studie av sykdommen og strukturen av HCV, har det ennå ikke vært mulig å utvikle en spesifikk vaksine for sykdommen.

Vanskelighetene med tidlig diagnose ligger i det asymptomatiske løpet av hepatitt, noe som fører til at en person besøker en lege på cirrhosisstadiet. For å oppdage sykdommen i tide, er det nødvendig med vanlige medisinske undersøkelser. Bare ved laboratorietesting av blod er det mulig å oppdage HCV og forhindre forurensning av andre. Faktum er at transportøren av infeksjonen i lang tid ikke kan gjette om patologien og fortsette å overføre viruset til friske mennesker.

Fremgangsmåter for overføring

I de fleste tilfeller sprer viruset gjennom blodet, da det inneholder den høyeste konsentrasjonen av patogene stoffer. Dermed overføres infeksjonen:

  • med hemodialyse;
  • med en infisert nål;
  • i ferd med å kjempe, når huden er skadet, og blodkontakt oppstår;
  • med blodtransfusjon (blodtransfusjon).

Sannsynligheten for infeksjon under intimitet er ubetydelig, da sæd og vaginal utslipp inneholder en liten mengde patogener. Risikoen for infeksjon økes betydelig i strid med integriteten til slimhinnen i kjønnsorganene. Dette observeres med aggressiv og analsex.

Når det gjelder vertikal modus for overføring, utføres den i arbeidsprosessen. I fosterets svangerskapstid kan patogen ikke trenge gjennom moderkaken til embryoet. Ved naturlig fødsel blir det patogene stoffet overført til barnet når huden er skadet, når kontakt med moderens blod blir observert.

Etter patogenes inntrengning i en sunn organisme begynner syntesen av antistoffer, som er beskyttelse mot infeksjon og tilhører immunstrukturer. De er funnet i den første studien av en person som bruker ELISA.

En polymerasekjedereaksjon utføres for å bekrefte pasientens diagnose. Det er en analyse av det genetiske materialet til et patogent middel og bestemmelsen av viral belastning.

Laboratoriediagnose av hepatitt C

Laboratoriediagnose starter med enzymimmunoassay. Hovedoppgaven er å oppdage antistoffer produsert mot patogenet. Dens effektivitet er nesten 95%. Takket være denne undersøkelsen er det mulig å identifisere virusbæreren i det prekliniske stadiet og sende det til videre undersøkelse.

En kvalitativ analyse av ELISA indikerer tilstedeværelse eller fravær av immunglobuliner i pasientens blod. Resultatet kan være "positivt" eller "negativt". Etter å ha mottatt det første svaret, blir personen sendt til neste undersøkelse - PCR. Prisen avhenger av kvaliteten på reagensene og laboratoriet. Kostnaden for polymerasekjedereaksjonen kan nå 4000 rubler.

PCR-funksjoner

Ved hjelp av en polymerasekjedereaksjon, tillater selv en liten mengde biologisk materiale oss å estimere virusbelastningen i blodet, det vil si å beregne konsentrasjonen av patogener i en milliliter væske.

Med forekomsten av PCR har diagnosen hepatitt blitt mye lettere. Analysen gjør det mulig å identifisere HCV RNA, for å etablere stadium av den smittsomme prosessen og infektiøsiteten av virusbæreren.

Det finnes flere typer genetisk diagnose:

  1. Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C - bekrefter tilstedeværelse eller fravær av HCV i emnetes blod:
  2. kvantitativ, der du kan beregne konsentrasjonen av virus og etablere scenen av sykdommen. Resultatet er gitt i IE / ml eller kopier / ml (avhengig av laboratoriet);
  3. genotyping - nødvendig for å bestemme genotypen av HCV. Dette kreves for det nøyaktige utvalg av stoffer som vil være mest effektive i dette tilfellet. Analyse indikerer indirekte alvorlighetsgraden av den patologiske prosessen i leveren. Således, med den tredje genotypen av patogenet, observeres steatosis oftest, grunnlaget for dette er akkumulering av fett i hepatocytter (dets celler). I tillegg påvirker typen av virus utfallet og varigheten av terapeutisk kurs.

Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C

Først og fremst blir biologisk materiale undersøkt i laboratoriet for tilstedeværelse av HCV RNA. Det er viktig å huske at en kvalitativ analyse av hepatitt C har et visst følsomhetsnivå, og derfor kan det ikke alltid gi riktig svar. I dette tilfellet anbefales det å gjennomføre laboratoriediagnostikk ved hjelp av andre reagenser.

For å oppnå pålitelige resultater, bør testsystemer med følsomhet på minst 50 IE / ml brukes.

Det diagnostiske resultatet kan enten være "positivt" eller "negativt". Hvis patogenet ikke er funnet i blodet, er studien fullført. Hvis det oppdages et patogent middel i en prøve, kvantifiseres en viral belastning.

En falsk-negativ respons oppnås når en teknologisk prosess brytes, for eksempel, aktive komponenter som undertrykker byggingen av kopier av patogenet, kommer inn i mediet. Dermed er det ikke mulig å vise et ekte blodbilde, og derfor er ikke en persons infeksjon diagnostisert.

Et falskt positivt resultat kan oppnås hvis røret for innsamling av biologisk materiale, samt miljøet for studien, var forurenset. I tillegg er slik analyserespons mulig med blandede infeksjoner, når leveren er påvirket av flere virus, for eksempel hepatitt C og D.

Indikasjoner for kvalitativ forskning

Legen kan foreskrive en pasient en kvalitativ studie om identifisering av RNA i hepatitt C-viruset:

  • ved mottak av et positivt eller tvilsomt enzymimmunoassayrespons;
  • for bekreftelse av diagnosen;
  • bestemme viral belastning;
  • sette scenen av sykdommen;
  • diagnose av blandet infeksjon. Hepatitt C infiserer ofte leveren samtidig med "D" -viruset;
  • Bestemmelse av terapeutisk taktikk under hensyntagen til kausjonsmiddelets genotype;
  • vurdere dynamikken i endringer under behandling med antivirale medisiner.

Fordelene ved polymerasekjedereaksjonen inkluderer:

  1. høy følsomhet av teknikken, som gjør det mulig å fastslå faktumet av infeksjon i det prekliniske stadium;
  2. identifisering av patogenets genetiske materiale, og ikke antistoffer mot det;
  3. muligheten for å etablere en subtype av et patogent middel;
  4. høy hastighet på diagnostikk, da det ikke krever såing av materialet på næringsmediet, og det er nok å bruke spesifikke testsystemer. En person mottar resultatet etter 5 timer;
  5. allsidighet. Analysen tillater å identifisere ethvert genetisk materiale (RNA, DNA). På grunn av dette kan legen bekrefte hepatitt C og andre typer sykdommen (B);
  6. evnen til å oppdage latent infeksjon.

Kvantitativ forskning

I studien av blod ved hjelp av polymerasekjeden kan reaksjonen beregne antall patogener i et fast volum biologisk materiale. Indikatoren er presentert i IE / ml. Gjennom analyse er det mulig å bestemme graden av smitte av pasienten, bestemme stadium av den smittefarlige prosessen, og også vurdere effektiviteten av medisinering.

På grunnlag av PCR bestemmer spesialisten hvilke doser medikamenter som kan blokkere reproduksjon av patogener. I tillegg bestemmes varigheten av antiviral behandling og prognose for livet. Det er viktig å huske at testsystemene har høy følsomhet, slik at metoden gjør det mulig å bekrefte infeksjon av en person i det prekliniske stadiet.

genotyping

Gitt patogenes evne til å mutere, er genotypen nødvendig for å bestemme behandlingens taktikk og valg av antivirale legemidler. For eksempel varer behandling av hepatitt B HCV 1 48 uker, med en positiv utvikling observert i bare 60% av tilfellene. Genotyper 2 og 3 har en mer gunstig prognose. Antivirale legemidler er foreskrevet i 8 måneder, og deres effektivitet når 85%.

Ifølge statistikk er HCV 1, 2 og 3 i de fleste tilfeller registrert i Russland.

Når deklarerer en laboratorietest, kan dette svaret angis - "ikke skrevet". Dette betyr at et virus sirkulerer i pasientens sirkulasjonssystem og ikke kan gjenkjennes av testsystemet. Resultatet av analysen i dette tilfellet indikerer at patogenet ikke er typisk for et gitt geografisk område.

Hvordan får du pålitelige resultater?

For at en kvalitativ studie av PCR for å oppdage RNA av det fremkallende middel av hepatitt C viste de riktige resultatene, er det nødvendig å observere kravene til å forberede laboratoriediagnostikk:

  1. blodprøvetaking utføres på tom mage, og det "sultne" gapet bør ikke være kortere enn 8 timer;
  2. To dager før studien anbefales det å slutte å drikke alkoholholdige drikkevarer og forlate krydret, fett og røkt mat;
  3. Avbryt introduksjonen av legemidler som reduserer blodproppene, for eksempel heparin. Hvis disse medisinene er foreskrevet av helsehensyn, må du varsle legen. I tillegg bør spesialisten være oppmerksom på inntak av andre legemidler som kan påvirke resultatet av laboratorieforskning;
  4. På tærskelen til samlingen av biologisk materiale, bør ikke fysioterapeutiske prosedyrer utføres og ikke utsettes for alvorlig fysisk anstrengelse.

Resultatene av analysen kan påvirkes ikke bare av den personen som donerer blod, men også av andre faktorer, nemlig:

  • dårlig kvalitet blod prøvetaking;
  • manglende overholdelse av anbefalinger om transport av biologisk materiale
  • Utilstrekkelig opplæring av laboratoriearbeidere;
  • manglende overholdelse av forskningsteknikken;
  • innføring av antikoagulantia (heparin) på kvelden før blodprøvetaking. Denne gruppen medikamenter reduserer koagulering, og derved reduserer arbeidet med reagenser.

I ulike laboratorier kan det diagnostiske svaret avvike noe, men disse feilene påvirker ikke det endelige resultatet av studien.

Spesiell oppmerksomhet er lagt til hvilke typer testsystemer som brukes i laboratoriet. Ofte er det gitt fortrinnsvis reagenser med høy følsomhet. Dette er viktig for pasienter med lav viral belastning, da det er vanskelig å oppdage.

Hvor ofte utføres en laboratorietest?

Primær polymerasekjedereaksjon utføres hos mennesker som har blitt påvist ved immunoassay-antistoffer mot patogenet av hepatitt. I dette tilfellet er det tildelt å bekrefte det faktum at infeksjon av en person og etablere scenen av sykdommen. I tillegg tillater analysen å bestemme virus subtypen, noe som er spesielt viktig for valg av medisiner.

Neste periode for obligatorisk laboratorietesting er 3 måneder fra starten av antiviral terapi. Diagnostikk gjør det mulig å evaluere effektiviteten av medisiner, justere dosen eller erstatte dem.

I tillegg til grunnleggende tester kan PCR i tillegg utføres ved 4 og 24 uker fra starten av behandlingen. Positiv prognose av sykdommen er bekreftet av en reduksjon i viral belastning etter tre måneders behandling. For eksempel bør den reduseres fra 1 million IE / ml til flere hundre tusen.

Hvis konsentrasjonen av patogene stoffer i blodet forblir på samme nivå eller øker noe, indikerer dette ineffektiviteten av antivirale legemidler og krever erstatning. Ved bruk av PCR ved slutten av behandlingen, er det mulig å bekrefte pasientens utvinning.

For å korrekt tolke resultatene av laboratoriediagnostikk, er det nødvendig med konsultasjon av en hepatolog eller smittsom sykdom. Gitt den høye frekvensen av falske responser i ELISA, brukes analysen utelukkende til primær screening. For en grundigere undersøkelse av den anvendte polymerasekjedereaksjonen.

Hvordan gjenopprette fra hepatitt C med 97% sjanse?

I dag er moderne medisiner av den nye generasjonen Sofosbuvir og Daclatasvir sannsynlig å helbrede hepatitt C for 97-100%. Du kan få de nyeste medisinene i Russland fra den offisielle representanten for den indiske farmasøytiske giganten Zydus Heptiza. Bestilte stoffer vil bli levert med bud innen 4 dager, betaling ved mottak. Få en gratis konsultasjon om bruk av moderne rusmidler, samt lære om hvordan man skal anskaffe, kan du på den offisielle nettsiden til leverandøren Zydus i Russland.

PCR-studie for hepatitt C: typer, indikasjoner, transkripsjon

Viral hepatitt C er en alvorlig sykdom som oppstår med skade på leveren. I åtti prosent av pasientene blir det kronisk. Viruset multipliserer i leveren celler - hepatocytter - og forårsaker deres død. Dødt vev erstattes av bindevev, fibrose utvikler seg.

Etter hvert som fibrose utvikler seg, lever ikke i stand til å utføre sine funksjoner, begynner levercirrhose, noe som er farlig på grunn av komplikasjoner: økt trykk i portalveinsystemet, gastrointestinal blødning, nedsatt blodkoagulasjon, mentale forandringer på grunn av skade på hjernekjerner ved giftige produkter.

Årsaken til sykdommen er infeksjon av et virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen RNA-virus. Dette betyr at det genetiske materialet ved hvilket patogenene av patogenet syntetiseres, er kodet i ribonukleinsyremolekylet. Infeksjon skjer gjennom blod, seksuelt, og fra en gravid kvinne til fosteret. Dessverre kan en tilstrekkelig stor mengde tid passere mellom infeksjon og begynnelsen av antistoffproduksjonen - fra to uker til seks måneder. Dette tillater ikke å bestemme infeksjonen ved hjelp av metoden for immunoassay og begynne behandling i de tidlige stadier.

Hva er PCR-analyse?

PCR er en metode for molekylær analyse, som gjør det mulig å oppdage patogenes genetiske materiale allerede i den første uken etter infeksjon ved bruk av polymerasekjedereaksjon. Studien har høy spesifisitet, nøyaktighet, og tillater ikke bare å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også dets konsentrasjon og genotype.

For studien tas en pasients blod der virus-RNA kan være lokalisert. Primerer legges til de kunstig syntetiserte regioner av det ønskede gen av liten lengde, og RNA-polymerase er et spesielt enzym som øker mengden av genetisk materiale av patogenet flere ganger. Ved hjelp av et spesielt apparat, utføres flere sykluser av oppvarming og kjøling. Deretter analyseres materialet og sammenlignes med de kjente genene til viruset, på basis av hvilket det dannes en konklusjon om nærvær eller fravær av infeksjon.

Typer av PCR-analyse for hepatitt C

Det finnes tre typer PCR-analyse:

  1. Kvalitativ analyse av PCR. Den første fasen av studien. Det lar deg identifisere genetisk materiale av viruset i blodet.

  • Kvantitativ analyse av PCR. Lar deg bestemme virusbelastningen - konsentrasjonen av det genetiske materialet til patogenet i en milliliter blod. Denne studien utføres før behandlingsstart, og deretter i første, fjerde, tolvte, og (hvis løpet er lang), tjuefire uke med behandling for å evaluere effektiviteten.

  • Genotyping. Den forårsakende agensen av hepatitt C muterer ofte og raskt. Det var syv varianter av denne virusgenotypen funnet på planeten. I Russland er den første, andre og tredje typen vanlige. Hver av genotypene har en annen motstand mot terapi, for eksempel er effektiviteten av behandlingen av den første typen seksti prosent, og for den andre og tredje når denne tallet åttifem. Derfor, for å kunne velge de riktige stoffene og foreskrive et behandlingsforløp av tilstrekkelig varighet, er det nødvendig å avgjøre nøyaktig hvilken type virus pasienten er infisert med.
  • Indikasjoner for PCR-analyse for hepatitt C

    PCR-studien er foreskrevet i følgende tilfeller:

    • kontakt med en syk person der infeksjon kan oppstå;
    • positiv enzymimmunoassay;
    • tegn på skrumplever: endringer i leverens størrelse, utbredelse av milten, utseende på underlivet av subkutan venøs plexus;
    • Utseendet på symptomer på leverskade: smerte i høyre underliv, guling av huden;
    • økt aktivitet av ALT og AST i den biokjemiske analysen av blod;
    • før behandling begynner å bestemme viral belastning;
    • å overvåke effekten av antiviral terapi;
    • etter behandling for å kontrollere tilbakefall
    • i nærvær av diagnostisert hepatitt B, for å utelukke blandet leverskade.

    Forklaring av PCR-studier på hepatitt C

    Dekoding av PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitt C skal utføres av en spesialist på hepatolog eller smittsomme sykdommer. Analysere resultatene av PCR er nødvendig i kombinasjon med data om biokjemisk analyse av blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalifisert lege vil kunne analysere resultatene av forskning og, basert på dem, foreskrive riktig behandling.

    Dekoding av kvalitativ analyse.

    I det analyserte biologiske materialet fant det genetiske materialet til patogenet. Infeksjon bekreftet.

    Infeksjon er fraværende, eller mengden av patogenens RNA er under følsomhetsgrensen.

    Dekoding av kvantitativ analyse.

    Normal sats for friske mennesker. Det betyr at det ikke finnes hepatitt C-RNA i materialet som er studert, eller konsentrasjonen er under følsomhetsgrensen for studien.

    RNA-konsentrasjonen er under rekkevidden av kvantifisering. Disse resultatene tolkes svært nøye, korrelerer dem med data fra andre studier, ofte gjenstudier.

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon regnes som lav. Vanligvis betyr en reduksjon i mengden virus at terapien er vellykket.

    Mer enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml

    Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon anses høy.

    Mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

    Mengden av RNA er over den øvre grense for kvantifikasjonsområdet. Det er umulig å trekke konklusjoner om graden av virusbelastning med dette resultatet. Vanligvis i slike tilfeller gjentas testen med fortynning av en blodprøve.

    Dekoding av genotyping.

    Oppdaget RNA av en bestemt genotype

    Hepatitt C-virus av en bestemt genotype og subtype ble påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romerske tall og latinske bokstaver, for eksempel - 1a, 2b. Totalt er det syv genotyper og sekstisju subtyper, men i Russland er det bare tre første typer.

    Hepatitt C virus RNA oppdaget

    RNA ble funnet i blodet av en sjelden genotype for Russland, som ikke kan tilskrives den første, andre eller tredje typen. Mer forskning er nødvendig.

    Dette resultatet indikerer at pasienten er sunn, eller at mengden av patogen-RNA er for liten.

    Det er mulig at PCR-analyse for hepatitt C er negativ, og enzymbundet immunosorbentanalyse gjenkjenner antistoffer mot viruset. Dette betyr at pasienten hadde akutt hepatitt C og gjenopprettet alene. Omtrent tjue tilfeller av infeksjon resulterer i spontan utvinning dersom pasientens kropp har tilstrekkelig motstand mot infeksjonen.

    Selv om PCR er en svært nøyaktig analyse, kan resultatet bli forvrengt i følgende situasjoner:

    • blodet ble transportert til laboratoriet under upassende forhold, temperaturen ble brutt;
    • biomaterialprøven var forurenset;
    • det var rester av heparin og andre antikoagulantia i blodet;
    • Undersøkere ble funnet å være inhibitorer - stoffer som reduserer eller stopper polymerasekjedereaksjonen.

    Fordelene med PCR over andre metoder

    1. Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materialet til det forårsakende middel. Ved hjelp av immunfluorescensanalyse kan bare immunoglobuliner bestemmes - stoffer som kroppen produserer som svar på en infeksjon. I tilfelle infeksjon med hepatitt C, kan intervallet mellom infeksjon og utbruddet av immunresponsen være flere uker og måneder, da vil ELISA være ineffektivt. PCR vil gi svar i den første uken etter infeksjon.

  • Lav sannsynlighet for feil. I materialet som studeres, bestemmer området for genetisk materiale, som er karakteristisk for bare en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-feil er mulige, siden samme type antistoffer kan frigjøres mot forskjellige virus - slike antistoffer kalles kryssantistoffer.

  • Høy følsomhet. PCR gjør det mulig å oppdage forårsakerens RNA selv i små mengder. Dette gjør det mulig å identifisere skjulte infeksjoner.
  • Hvordan forberede seg på bloddonasjon for PCR-studier

    For PCR-analysen av hepatitt C samles venøs blod. Vanligvis tas to porsjoner blod fra pasientens vene om gangen: den første sendes til PCR og den andre av ELISA. Dette er gjort for å mer nøyaktig vurdere hvor mye en pasient er infisert med et virus, og hvordan immunitet bekjemper den.

    Vanligvis er pasienten pålagt å følge følgende regler:

    • en blodprøve blir tatt om morgenen;
    • Intervallet mellom det siste måltidet og bloddonasjonen skal være åtte til ti timer;
    • to eller tre dager før analysen, er det nødvendig å forlate stekte og fete matvarer og alkohol;
    • i tjuefire timer før analysen, bør pasienten unngå fysisk anstrengelse: ikke bære vekter, ikke gå til treningsstudio eller svømmebasseng.

    Relaterte Artikler Hepatitt