ELISA for viral hepatitt

Share Tweet Pin it

Legg igjen en kommentar 2,929

For å oppdage virus hepatitt i kroppen bruker medisin i stor grad et enzymimmunoassay basert på deteksjon av konsentrasjon og type antigener ved bruk av antistoffer og enzymer. Gjennomført i etapper, gjennom laboratorieundersøkelser, med høy nøyaktighet av indikasjoner. Avhengig av antall og klasse av antistoffer, farges og konsentrasjonen av enzymet, som bruker ELISA, og ifølge dette, diagnostiserer legen sykdommen, endres.

Hva er ELISA?

Tilstedeværelsen av viral hepatitt i pasientens kropp bestemmes ved hjelp av en serologisk metode for blodanalyse for tilstedeværelse av HCV-virus og markører (kropper og antistoffer) og peker på det. Enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) undersøker ulike virus, forbindelser med lav molekylvekt, makromolekyler, deres kvalitative og kvantitative indikatorer, ved bruk av manifestasjonen av reaksjonen på deres antigener. For å gjøre dette, bruk enzymet som en etikett for signalregistrering. Det blir stadig mer brukt i medisin, fordi ELISA tydeligvis finner veldefinerte antigener, uten å forveksle dem med andre, har høy følsomhet overfor forekomst av invasjon i viral hepatitt.

Analysen må tas på tom mage.

Ulempen med en slik diagnose er manglende evne til å identifisere årsaken til sykdommen, siden metoden bare indikerer reaksjonen av kroppens immunsystem. Resultatene av analysen påvirkes av vaksinasjonen som tidligere ble utført. I 8 timer før analysen anbefales det å avstå fra å spise, nikotin, alkohol. Grunnlaget for ELISA-testen er kroppens enzymatiske og immunrespons mot viruset. Biologiske molekyler binder seg til cellen og dets elementer, mikroorganismer, oppdager viruset, og deretter arbeider enzymer som lar deg uttrykke immunresponsen i en synlig og målbar parameter.

Indikasjoner for analyse

Viral hepatitt i kroppen kan forårsake kreft og levercirrhose. Betydningen av rettidig diagnose er ubestridelig. Den primære metoden for diagnose er en ELISA-test, som med høy nøyaktighet bestemmer tilstedeværelsen av HCV-viruset (IgM og IgG) og aktiviteten av sporstoffer. Obligatoriske tester for viral hepatittpasning:

  1. Personer med risikogrupper (narkomaner, personer med aids, ansatte i medisinske og rettshåndhevende institusjoner).
  2. Personer med akutt eller kronisk hepatitt.
  3. Gravide og planlegger graviditetskvinnere.

ELISA anerkjenner sykdommen på ethvert stadium. Resultatene av analysen er i gjennomsnitt klare i 2 dager.

Kriterier som bestemmer betydningen av analyse

ELISA test bestemmer tilstedeværelsen av antistoffer av klassen IgG, IgM, IgA. Ved diagnose av viral hepatitt, legger legen ikke hensyn til sin type, siden tilstedeværelsen av en slik manifestasjon av HCV-viruset allerede indikerer et akutt eller kronisk stadium av sykdommen. I de tidlige stadiene av sykdommen stiger nivået av IgM (5 dager etter infeksjon); På den 15. - 20. dag, vises IgG antistoffer og kan forbli i menneskelig blod i lang tid selv etter herding; IgA - vises på 10-14 dager, reduseres etter behandling.

Hvis IgG og IgA oppdages etter bruk av legemidler og deres nivå forblir i samme hastighet - bæreren har en kronisk form for hepatitt. Et viktig kriterium for testen vil være en klar definisjon av klassen av antistoffer som er tilgjengelige og deres mengde. Basert på dette kan du ikke bare vite om sykdommens nærvær, men også utviklingsstadiet. Påvisning av slike elementer i pasientens blod gjør det mulig å foreskrive riktig og rettidig behandling for å hindre mer alvorlige konsekvenser.

Hvordan er det gjort?

Allokere direkte og ikke direkte ELISA-test. Stadier direkte:

  1. Samle biologisk materiale og plassere det i spesielle hull.
  2. Innen 15-30 minutter antigener er festet til overflaten av brønnene.
  3. Tilsetning av antistoffer til brønnene til antigenet funnet. Alle igjen i 1-5 timer.
  4. Fjern unattached antigener (helling av brønninnholdet).
  5. Skyll brønnene med en spesiell løsning.
  6. Legg til enzymløsning til brønnene. La i 30 minutter - 1 time.
  7. Bruken av kolorimetri (deteksjon av farge og konsentrasjon av fargen på brønnens innhold, sammenligning med indikatorer som er direkte proporsjonal med virusets konsentrasjon).
Bruk til diagnose av indirekte ELISA vil gi et mer nøyaktig resultat.

Den indirekte ELISA-metoden finner sted ved bruk av umerkede antistoffer mot antigenene som er funnet og deretter tilsetter merket dem til dem. Først blir blod tatt fra pasienten og spredt gjennom brønnene i 15-30 minutter. (antistoffer er festet med hull). Deretter blir umerkede antistoffer introdusert i dem i 1-5 timer (forbindelsen mellom antistoffer med antigener dannes - immunforbindelsen). Deretter helles ikke-festede mikroelementer fra brønnene og vaskes med en spesiell løsning. I neste fase legger laboratorietekniker merkede sporstoffer til brønnene i 15-30 minutter. (dette bindes umerket med merket med dannelsen av det komplekse "antistoff-antistoff-antigen"). Ekstraer (løs) fjernes igjen under drenering og vasking med en løsning. Neste er enzymet som endrer farge i 5-30 minutter. Bor i brønnene og fargedataene sammenlignes med dataene til indikatorene på tabellene. Indirekte ELISA er mer nøyaktig.

Hva viser en ELISA for viral hepatitt?

ELISA gjør det mulig å oppdage infeksjon (hepatittvirus av alle typer, HIV, herpes, syfilis, cytomegalovirus, meslinger, rubella, kussevirus, Epstein-Barr-virus), er en markør for autoimmune sykdommer, kreftceller. Indikerer brudd på reproduktive funksjoner (endringer i testosteron, prolactin, østradiol og progesteron), skjoldbruskkjertel, invasjon med helminter, klamydia. Effektiv for å oppdage ureaplasmose, kikhoste, Dange virus, West Nile virus, Borrelia. Listen over definisjoner er høy, inkluderer mange titler.

Bekreftelse av resultater

Bestemmelse av HCV-virusantigen ved ELISA gir 98% nøyaktighet. Det brukes også til å teste biologisk materiale med fuzzy tidligere indikatorer. Tilstedeværelsen av IgM antigener er ikke en indikator for akutt hepatitt og krever ytterligere forskning. Når ELISA-testen gjentas, sammenfaller resultatene med 90-100%. I tilfeller med minimal avvik, blir gjennomsnittsverdien tatt som indikator. For maksimal nøyaktighet når det gjelder leger rådgiver parallelt med å utføre en biokjemisk analyse av blod. For å teste resultatene etter enzymimmunoassay, kan du bruke andre diagnostiske metoder.

ELISA for hepatitt C

EIA hepatitt C bestemmer effektivt, det er en av metodene for å diagnostisere en sykdom, basert på vekselvirkningen av antigener og antistoffer. Immunokjemisk reaksjon ved hjelp av ELISA (enzymbundet immunosorbentanalyse) gjør det mulig å oppdage anti-HCV-antistoffer i kroppen. Metoden gjør det mulig å differensialt diagnostisere hepatitt C hos mennesker, bestemme utviklingsstadiet av sykdommen, forutse kurset. Identifisering av bestemte serologiske markører lar deg også velge en effektiv antiviral behandling av patologi.

Funksjoner av metoden

Analysen for deteksjon i humant blod av antistoffer mot hepatitt-type C-viruset utføres ved å feste en fremmed mikroorganisme (antigen) til immunoglobulinmolekylet. Vedlagt enzym enzym spiller rollen som en slags etikett. Det lar deg spore den immunokjemiske reaksjonen, så vel som en av dens komponenter.

Som komponenter av enzymimmunoassay kan det fungere:

  • antistoffer;
  • antistoffer merket med et spesielt enzym;
  • antigener;
  • enzym substrater;
  • indikatorfarger.

Når skadelige fremmede mikroorganismer kommer inn i menneskekroppen, begynner de beskyttende kreftene å produsere immunoglobuliner (antistoffer). Deretter virker de på antigener og nøytraliserer dem. Denne interaksjonen fører til dannelse av antistoff-antigen, som har sine egne indikatorer for kvantitet og kvalitet. De indikerer tilstedeværelse eller fravær i kroppen av HCV-infeksjon. Hvis resultatet av et enzymimmunoassay er positivt, er det et hepatitt-type C-virus.

Moderne teknologier i medisin kan betydelig redusere tiden for å oppdage hepatittviruset, som oppstår i en akutt form. Takket være tredje generasjons diagnostiske systemer, er det også mulig å øke spesifisiteten og følsomheten til den immunokjemiske reaksjonen.

Hovedmaterialet som studeres under ELISA er blod i venet (inkludert donorblod). Ifølge vitnesbyrdet kan det produseres et utvalg av cerebrospinalvæske eller fostervann.

Et positivt resultat av ELISA-metoden for hepatitt av type C indikerer ikke alltid forekomsten av en virusinfeksjon i kroppen. I mer enn 35% av tilfellene blir virusantigener ikke påvist i blodet, noe som fører til et falskt positivt resultat.

Metoden lar deg overvåke kvantitative og kvalitative endringer, skillet mellom akutte og kroniske former for hepatitt C. Det er imidlertid ineffektivt for å bestemme aktiviteten til den patologiske prosessen. For å mer nøyaktig bekrefte forekomsten av HCV-infeksjon, bør også andre metoder for patologisk diagnose brukes.

Indikasjoner for ELISA

Metoden for å detektere den spesifikke og kvantitative konsentrasjon av fremmede mikroorganismer (antigener) ved hjelp av immunoglobuliner og enzymer utføres i flere stadier. Basert på fargeskift og enzym kvantitativt mål, kan legen diagnostisere hepatitt type C. hos mennesker.

Følgende kategorier av mennesker er mer utsatt for sykdommen:

  1. Pasienter som har gjennomgått kirurgi, samt sykdommer i indre organer og systemer.
  2. HIV-infisert (infisert med humant immundefektvirus). En stor andel av mennesker i denne gruppen er narkomaner.
  3. Medisinsk fagpersonell.
  4. Retshåndhevelse offiserer.
  5. Gravide kvinner.

Hepatitt viral opprinnelse fører ofte til utvikling av kreft (for eksempel leverkreft). Det er derfor at donering av blod til en immunoassay bør være primært for personer i hovedrisikogruppen, så vel som for pasienter med akutt eller kronisk hepatitt.

Hvis det er angitt, kan legen foreskrive en ELISA-metode for pasienter som er diagnostisert med:

  • STI (seksuelt overførte infeksjoner);
  • sykdommer av viral opprinnelse (papillomavirus, herpesinfeksjon, hepatitt, etc.);
  • patologisk allergisk karakter
  • immunsvikt;
  • onkologi.

Fordeler og ulemper

ELISA hepatitt C kan påvises på et tidlig stadium, så vel som i asymptomatiske og anicteriske former. Som enhver diagnostisk metode har den flere fordeler og ulemper.

Blant de positive egenskapene til ELISA peker eksperter på:

  1. Nøyaktighet av kvalitative og kvantitative indikatorer. Metodens følsomhet overstiger andre studier på identifisering av hepatitt dusinvis av ganger.
  2. Signifikant reduksjon i tidspunktet for påvisning av virusinfeksjon på grunn av moderne diagnostiske systemer.
  3. Lav pris sammenlignet med andre studier på identifisering av hepatitt hos mennesker.
  4. Muligheten for å diagnostisere leversykdom på et tidlig stadium i fravær av uttalt symptomer.
  5. Fasedforskning ved hjelp av automatiserte prosesser.

Til tross for den høye nøyaktigheten av ELISA, oppdager pasienten ikke hepatittviruset i mer enn 35% av tilfellene med et positivt resultat. Ofte bekrefter testen ikke patologien, noe som indikerer et tvilsomt eller negativt resultat.

Pålideligheten av studien i en eller annen grad påvirker:

  1. Medisinering.
  2. Krenkelser av metabolske prosesser i kroppen.
  3. Tilstedeværelsen av visse patologier av kronisk natur som bidrar til aktiv produksjon av immunglobuliner.

Gitt ulempene med resultatene av in vitro ELISA, blir pasienten tildelt ytterligere forskning. For pålitelig påvisning av antistoffer mot hepatitt C-virusinfeksjon, brukes PCR (polymerasekjedereaksjon) eller RIBA (rekombinant immunoblotting).

Hva identifiserer og hvordan studien gjennomføres

Analyse ved ELISA kan oppdage et bredt spekter av sykdommer hos mennesker.

I tillegg til deteksjon av alle typer hepatitt B-antistoffer, kan et positivt testresultat indikere tilstedeværelsen av følgende patologier i kroppen:

  • humant immundefektvirus;
  • herpesinfeksjon;
  • syfilis;
  • STIer (ureaplasmose, klamydia, etc.);
  • HPV;
  • cytomegalovirus.

Studien er også en slags markør for påvisning av ondartede svulster, genetiske patologier, hormonelle forstyrrelser, samt forstyrrelser i det endokrine systemets funksjon.

Forberedelse for levering av biologisk materiale for påvisning av hepatitt C-viruset innebærer nekting av mat og medisin i 12 timer før studien. Også en nødvendig betingelse er å avstå fra bruk av alkohol, fett, stekt og salt mat.

Direkte ELISA

Hovedtrinnene i å gjennomføre en direkte test er som følger:

  1. Først tar laboratorietekniker blod fra en vene (eller annet biologisk materiale), og legger det i spesielle beholdere.
  2. Alien mikroorganismer (antigener) innen 20 minutter begynner å feste seg til dem.
  3. Spesialisten legger til immunoglobuliner (antistoffer) til antigenene som er funnet å danne en immunrespons. I dette tilfellet blir komponentene igjen i flere timer.
  4. Ikke-festede antigener fjernes ved å hente innholdet fra beholderne.
  5. Materialet skylles med en løsning, og deretter behandles med enzymer og forlates i en time.
  6. Fargen og konsentrasjonen av innholdet analyseres ved bruk av kolorimetri.

Hvis den kvantitative indikatoren for innholdet overstiger de tillatte normene, indikerer dette tilstedeværelsen av hepatitt C-viruset i menneskekroppen.

Indirekte ELISA

Betyr samspillet mellom umerkede immunglobuliner med antigener, som senere merkede antistoffer er festet til.

Ved begynnelsen av pasientens blod tas det fra en blodåre. Deretter plasseres det biologiske materialet i spesielle beholdere i omtrent en halv time. I dette tilfellet er umerkede antistoffer festet til beholderens vegger. Deretter tilsettes merkede antistoffer til dem. Som et resultat av deres interaksjon dannes et antistoff-antigen-immunkompleks.

Etter 4 timer helles innholdet av beholderne og de løse mikroelementene fjernes. En laboratorietekniker fester merkede antistoffer mot et allerede dannet kompleks, og det oppstår et "antistoff-antistoff-antigen" immunrespons.

Etter gjentatt fjerning av løse mikroelementer, legges et spesielt enzym til beholderen, og endrer farge og kvantitative indikatorer på innholdet. Basert på det oppnådde resultatet, kontrollerer spesialisten dataene og konkluderer.

Dekoding resultater

Ved utførelse av ELISA blir det oppmerksom på tilstedeværelsen eller fraværet av antistoffer av klassene IgA, IgG og IgM. Kvantitative indikatorer på disse antistoffene sammenlignes med dataene i et spesialtabell.

Ifølge henne er dekoding av resultatene som følger:

  1. Hvis alle tre typer indikatorer ikke er definert, har personen fullstendig gjenoppretting.
  2. Med et samtidig positivt resultat for alle tre indikatorene, er det en akutt form for virusinfeksjon.
  3. Hvis antistoffer av IgG-klassen bestemmes, mens de andre klassene ikke er identifisert, har personen utviklet postinfeksjonell immunitet.
  4. Den kroniske karakteren av sykdommen er indikert ved positive indikatorer på antistoffer av klassene IgG og IgA. Imidlertid forblir de uendret selv etter medisinsk behandling.
  5. Med en positiv deteksjon av alle tre antistofftyper, kan et tilbakefall av den kroniske karakteren av hepatitt observeres.

Ifølge statistikken begynner nivået av IgM å øke flere dager etter infeksjon i kroppen, noe som indikerer et tidlig stadium av patologi. IgG-antistoffer opptrer vanligvis 2 uker etter sykdomsstart og forblir i blodet i lang tid (selv etter utvinning). IgA-antistoffer oppdages etter 2 uker, mens konsentrasjonen i kroppen minker etter legemiddelbehandling.

Husk at hepatitt C ELISA positiv ikke alltid indikerer tilstedeværelse av infeksjon. Ofte vurderes testen å være falsk positiv, noe som krever re-donasjon av blod. I noen tilfeller foreskrives pasienten ytterligere studier for å nærmere bestemme blodparametere.

Hovedkriteriet for testen er nøyaktig identifisering av kvantitative og typiske indikatorer. De lar deg bestemme ikke bare forekomsten av viruset, men også sykdomsformen. Diagnose av hepatitt C ved hjelp av moderne metoder vil tillate deg å starte rettidig medisinering og minimere negative konsekvenser.

Forskning på hepatitt C-viruset

Antistoffer mot hepatitt C-virus (totalt)

Hepatitt C-virusantistoffer er vanligvis fraværende i serum
Totale antistoffer mot hepatitt C-viruset er antistoffer av IgM- og IgG-klassene, rettet mot et kompleks av strukturelle og ikke-strukturelle proteiner av hepatitt C-viruset.
Denne studien er screening for å identifisere pasienter med VSH. Totale antistoffer mot hepatitt C-viruset kan detekteres i de første 2 ukene av sykdommen, og deres tilstedeværelse indikerer mulig infeksjon med viruset eller en tidligere infeksjon.

Et utvetydig svar basert på resultatene av denne testen kan ikke oppnås, siden testen bestemmer totale IgM- og IgG-antistoffer. Hvis dette er en tidlig periode med akutt viral hepatitt C, indikerer IgM-antistoffer dette, og hvis det er en gjenopprettingstid eller tilstand etter HCV, indikerer IgG-antistoffer dette.

IgG-antistoffer mot HCV kan fortsette i blodet av konvalescenter i 8-10 år med en gradvis reduksjon i konsentrasjonen. Kanskje en sen oppdagelse av antistoffer et år eller mer etter infeksjon. Ved kronisk hepatitt C bestemmes totale antistoffer kontinuerlig. Derfor, for å klargjøre tidspunktet for infeksjon, er det nødvendig å separat bestemme antistoffer av IgM-klassen for HCV.

Evaluering av forskningsresultater

Resultatet av studien er uttrykt kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet av totale antistoffer (JgM og JgG) til HCV i serum. Et positivt resultat - deteksjon av totale antistoffer (JgM og JgG) til HCV indikerer den første fasen av akutt viral hepatitt C, akutt infeksjonsperiode, tidlig stadium av konvalescens, viral hepatitt C eller kronisk viral hepatitt C.

Deteksjon av totale antistoffer mot HCV er imidlertid ikke nok til å diagnostisere HCV og krever bekreftelse for å utelukke et falskt positivt resultat av studien. Derfor, når en positiv screeningstest for totale antistoffer mot HCV er oppnådd, utføres en bekreftende test i laboratoriet. Det endelige resultatet av bestemmelsen av totale antistoffer mot HCV utstedes sammen med resultatet av den bekreftende testen.

Antistoffer mot hepatitt C-virus JgM

Antistoffer mot hepatitt C-virus JgM i serum er normalt fraværende. Tilstedeværelsen av antistoffer fra JgM-klassen til HCV i pasientens blod gjør det mulig å verifisere den aktive infeksjonen. JgM klasse antistoffer kan detekteres ikke bare i akutt HCV, men også i kronisk hepatitt C.

Antistoffer av JgM-klassen for HCV vises i pasientens blod 2 uker etter utviklingen av det kliniske bildet av akutt viral hepatitt C eller forverring av kronisk hepatitt og forsvinner vanligvis etter 4-6 måneder. En reduksjon i nivået deres kan indikere effekten av medisinering.

Evaluering av forskningsresultater

Resultatet av studien er uttrykt kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet av JgM antistoffer mot HCV i serum. Et positivt resultat - deteksjon av JgM antistoffer mot HCV indikerer den første fasen av akutt viral hepatitt C, akutt infeksjonsperiode, tidlig stadium av konvalescens eller aktiv kronisk viral hepatitt C.

Påvisning av hepatitt C-virus ved PCR (kvalitativt)

Hepatitt C-virus i blodet er normalt fraværende.
I motsetning til serologiske metoder for diagnostisering av HCV, der antistoffer mot HCV oppdages, gjør PCR det mulig å oppdage direkte HCV RNA i blodet, både kvalitativt og kvantitativt. Det utpekte fragmentet i begge tjener som en konservativ region av hepatitt C-genomet.

Deteksjon av bare antistoffer mot HCV bekrefter bare faktum av infeksjon hos pasienten, men tillater ikke å dømme om aktiviteten til den smittsomme prosessen (om virusreplikasjon), om prognosen av sykdommen. I tillegg finnes antistoffer mot HS-viruset både i blodet av pasienter med akutt og kronisk hepatitt, og hos de pasientene som har vært syk og gjenopprettet, og ofte forekommer antistoffer i blodet bare flere måneder etter starten av det kliniske bildet av sykdommen, noe som gjør diagnosen vanskelig. Deteksjon av viruset i blodet ved PCR-metoden er en mer informativ diagnostisk metode.

Høy kvalitet påvisning av HCV ved PCR i blodet indikerer viremia, lar deg dømme reproduksjon av viruset i kroppen og er et av kriteriene for effektiviteten av antiviral terapi.

Den analytiske følsomheten til PCR-metoden er minst 50-100 virale partikler i 5 μl, som passerte isolasjonen av en DNA-prøve, spesifisitet - 98%. Deteksjon av Hepatitt C-virus RNA ved bruk av PCR i de tidlige stadier av virusinfeksjon (kanskje innen 1-2 uker etter infeksjon) mot bakgrunnen av det totale fraværet av serologiske markører, kan være tidligste tegn på infeksjon.

Imidlertid kan isolert deteksjon av hepatitt C-virus-RNA mot fullstendig fravær av andre serologiske markører ikke helt utelukke et falskt positivt PCR-resultat. I slike tilfeller er det nødvendig med en omfattende vurdering av kliniske, biokjemiske og morfologiske studier og gjentatt, gjentatt bekreftelse av forekomsten av PCR-infeksjon.

I henhold til WHO-anbefalingene, for å bekrefte diagnosen av viral hepatitt C, er det nødvendig å oppdage hepatitt C-virus-RNA i pasientens blod tre ganger.

Hepatitt C-virus RNA-deteksjon med PCR brukes til å:

  • oppløsning av tvilsomme serologiske testresultater;
  • differensiering av hepatitt C fra andre former for hepatitt;
  • påvisning av det akutte stadium av sykdommen sammenlignet med tidligere infeksjon eller kontakt; bestemme infeksjonsstadiet av nyfødte fra mødre som er seropositive for hepatitt C-viruset;
  • kontrollere effekten av antiviral behandling.
  • Påvisning av hepatitt C-virus ved PCR (kvantitativ)

    Den kvantitative metoden for å bestemme RNA-innholdet i hepatitt C-virus i blodet gir viktig informasjon om intensiteten av sykdomsutviklingen, effektiviteten av behandlingen og utviklingen av resistens mot antivirale legemidler. Analytisk følsomhet av metoden er fra 5.102 kopier / ml viruspartikler i serum, spesifisitet - 98%.

    Nivået på viremi beregnes som følger: Når innholdet av HCV RNA er fra 10 ^ 2 til 10 ^ 4 kopier / ml, er det lavt; fra 10 ^ 5 til 10 ^ 7 kopier / ml - medium og over 10 ^ 8 kopier / ml - høy.

    Kvantitativ bestemmelse av innholdet av HCV RNA i serum ved PCR er viktig for å forutsi effektiviteten av behandling med interferon-alfa. Det er vist at den mest gunstige prognosen for sykdommen og den høyeste sannsynligheten for en positiv respons på antiviral terapi er de med lave nivåer av viremia. Med effektiv behandling reduseres nivået av viremia.

    Genotyping av hepatitt C-virus - Genotype-definisjon

    PCR-metoden tillater ikke bare å oppdage HCV RNA i blodet, men også å etablere sin genotype. Det viktigste for klinisk praksis er 5 subtyper av HCV - 1a, 1b, 2a, 2b og 3a. I vårt land, den vanligste undertypen 1b, etterfulgt av 3a, 1a, 2a.

    Bestemmelse av genotype (undertype) av et virus er viktig for å forutse løpet av HCV og velge pasienter med kronisk HCV for behandling med interferon-alfa og ribavirin.

    Når en pasient blir smittet med undertype 1b, utvikler kronisk HCV i ca 90% tilfeller, og i nærvær av subtyper 2a og 3a utvikler den seg i 33-50%. Hos pasienter med undertype 1b er sykdommen mer alvorlig og slutter ofte med utviklingen av levercirrhose og hepatocellulært karcinom. Når det er infisert med subtype 3a, har pasienter mer utprøvd steatose, galdeveieskade, ALT-aktivitet og fibrøse endringer i leveren er mindre utprøvd enn hos pasienter med undertype 1b.

    Indikasjoner for behandling av kronisk HCV interferon-alfa er:

  • økte transaminase nivåer;
  • tilstedeværelsen av HCV RNA i blodet;
  • HCV genotype 1;
  • høye nivåer av viremia i blodet;
  • histologiske endringer i leveren: fibrose, moderat eller alvorlig betennelse.
  • Ved behandling av interferon-alfa hos pasienter med viral hepatitt C med subtype 1b, er effekten av terapi notert i gjennomsnitt i 18% av tilfellene, hos de som er smittet med andre subtyper - i 55%. Bruk av kombinasjonsbehandling (interferon-alfa + ribavirin) øker effektiviteten av behandlingen. En vedvarende respons observeres hos 28% av pasientene med undertype 1b og i 66% med andre HCV-subtyper.

    ELISA-metode for å oppdage hepatitt

    Moderne medisiner er kjent for mange leversykdommer. HCV (viral hepatitt C) er en av de vanligste og farligste fordi denne infeksjonen ofte utvikler asymptomatisk og fører til kritiske komplikasjoner, til og med død. Det er derfor den tidlige diagnosen av sykdommen er av avgjørende betydning, som utføres ved hjelp av forskjellige metoder, inkludert enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) for å oppdage antistoffer mot viruset i blodet.

    Erklæring om HCV-infeksjon for diagnose av hepatitt

    I laboratoriediagnostikk for deteksjon av hepatitt C (HCV infeksjon) benyttes to typer metoder:

    1. Serologisk, basert på deteksjon av antistoffer mot hepatitt C-viruset (anti-HCV), også kalt ELISA (enzymbundet immunosorbentanalyse). Det er rettet mot å detektere anti-HCV (IgM og IgG markører) som brukes til screening og diagnostisering av hepatitt C. Begge disse markørene kan detekteres i blodet (plasma) i forskjellige kombinasjoner, noe som krever riktig klinisk tolkning. For å bekrefte forekomsten av anti-HCV, utføres en RIBA (rekombinant immunoblot) test.
    2. Molekylærbiologisk, rettet mot deteksjon av RNA-virus. HCV-RNA-testen er foreskrevet for følgende pasientkategorier:
      • med identifisert anti-HCV;
      • uten detekterte anti-HCV, men med etablerte epidemiologiske og kliniske data som krever ekskludering av den akutte form av HCV.

    RNA av viruset kan detekteres i blodet allerede 14 dager etter infeksjon, det vil si før forekomsten av anti-HCV, som oppstår i løpet av de første 2-3 månedene.

    For endelig bekreftelse av diagnosen (spesielt når bare en av de to merkene av HCV-infeksjon oppdages), anbefaler eksperter at det etter en viss tid skal utføres gjentatte tester av anti-HCV og HCV RNA.

    Påvisning av hepatitt ved ELISA

    For implementering av tidlig diagnose av viral hepatitt, spesielt asymptomatiske, anicteriske former, i serum detekterer tilstedeværelsen av virale proteiner (antigener) eller antistoffer mot dem (produsert av immunsystemet når virus kommer inn i kroppen) gjennom enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA). Dette er en universell metode for immunologisk diagnose, dens essens ligger i studien av samspillet mellom "antigen-antistoff". Mye brukt i mange land rundt om i verden.

    Bestemmelse av hepatitt ved hjelp av ELISA gjør det ikke bare mulig å etablere en nøyaktig diagnose, men også å vurdere sykdommens natur, samt å velge en kompetent og effektiv behandling med tradisjonelle medisiner (interferon, ribavirin), direkte virkende midler (Sofosbuvir, Daclatasvir) og deres generiske indiske og kinesiske produksjon.

    Om mulig blir diagnosen av viral hepatitt ved ELISA supplert med PCR (polymerasekjedereaksjon), som gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen av hepatittvirus i RNA.

    Hvor nøyaktig er enzymet immunoassay-metoden

    Ifølge ekspertestimater er nøyaktigheten av ELISA-metoden 95%, det vil si i 95 av 100 pasienter som bruker enzymimmunoassay, kan forekomsten og mengden HCV-antistoffer - IgM og IgG detekteres i blodet. Hvis resultatet er positivt, er det mulig å diagnostisere kontakt med HCV med kroppen (ikke selve viruset, nemlig tilstedeværelsen av antistoffer i blodet til det, noe som kan være et resultat av en allerede overført sykdom).

    Til tross for den høye følsomheten til den enzymbundne immunosorbentanalysen (ELISA), kan det imidlertid ikke oppdages virus hos 40% av pasientene med et positivt resultat, noe som indikerer et tvilsomt eller falskt positivt resultat.

    For å bekrefte at ELISA-resultatene er riktige, brukes RIBA-metoden (rekombinant immunoblotting) for å nøyaktig studere deteksjon av antistoffer mot HCV.

    Anti NCV kjerneprøve

    Effektive studier for å bestemme tilstedeværelsen av antistoffer mot hepatittvirus inkluderer anti-HCV-kjerne, som brukes som en bekreftende test når "usikre" resultater oppnås.

    Hvis det oppdages anti-HCV-kjerne i serum ved en fortynning på 1: 1000, vil et positivt resultat sannsynligvis bli diagnostisert, det vil si at sykdommen er tilstede.

    Dersom prøvene ved en fortynning på 1: 1000 er negative, er det ved en fortynning på 1: 200 positive at det er behov for forskning for tilstedeværelsen av viralt RNA. I dette tilfellet er det sannsynligvis ingen HCV-infeksjon.

    Det er viktig å forstå at ved kroniske former for HCV oppdages antistoffer konstant, og ved eliminering (fjerning fra kroppens celler) fortsetter viruset i 4-8 år eller mer. Derfor viser tilstedeværelsen av anti-HCV ikke alltid infeksjon i kroppen og tillater ikke objektive konklusjoner om aktiviteten til prosessen. For å oppnå nøyaktige data om viral belastning, grad av leverskader, infeksjonsvarighet og forskjellen mellom akutte og kroniske former av sykdommen, anbefales det å bruke definisjonen av spektrum av antistoffer mot forskjellige HCV peptider. Det er også viktig å observere sin kvantitative og kvalitative dynamikk.

    Forskning på viral hepatitt ved bruk av metoden

    ELISA i diagnosen viral hepatitt. Enzyme immunoassay evner

    Spesifikk laboratoriediagnostikk av viral hepatitt er basert på bruk av immunokjemiske og molekylære biologiske forskningsmetoder. De viktigste immunokjemiske metodene er radioisotop eller radioimmun (RIA) og immunoassay (ELISA). Immunokjemiske diagnostiske metoder er basert på spesifikk interaksjon av et antigen - et antistoff med den påfølgende identifikasjon av komplekset ved hjelp av spesielle etiketter. Det vanligste enzymimmunoassayet.

    De første rapportene om bruk av enzymimmunoassay. som en metode for å bestemme stoffer ble utgitt i 1971 samtidig av to forskningsgrupper - B. Van Weemen, A. Schuurs og E. Engvall, P. Perlmann. Enzymimmunoassayet er basert på følgende prinsipp: I fastfasen, som hovedsakelig bruker overflaten av brønnene i en polystyrentablett, fastgjøres antigenet av det infeksiøse middel eller antistoff (ofte en blanding av antistoffer) til antigener som skal detekteres. Dette antigenet eller antistoffene, som er faste på den faste fase, kalles immunosorbent.

    Som et resultat av inkuberingen av immunosorbenten og testserumet i nærvær av et detekterbart middel, binder de seg til antigen-antistoffkomplekset. Etter vaskeprosedyren, hvor ubundne antigener og antistoffer fjernes, utføres inkubering med konjugatet. Som et konjugat ved påvisning av HBsAg, brukes anti-HBs. Ved påvisning av antistoffer mot hepatitt C-viruset er antistoffer mot humane immunglobuliner (antiviruskonjugat) merket med pepperrotperoksidase. Som et resultat av denne inkuberingen skjer vedlegg til de allerede eksisterende antigenkompleksene - antistoffet av det tilveiebende introduserte konjugatet. Etter fjerning av ubundet konjugat (vasking), blir substratet innført i brønnene. Ved bruk av peroxidasekonjugat, brukes hydrogenperoksid som substrat i kombinasjon med en indikator, som oftest brukes som ortofenylendiamin (OPD) eller tetrametylbenzidin (TMB). Resultatet er estimert fotometrisk.

    Kvaliteten og påliteligheten til analytiske evner av enzymimmunoassay-metoden er karakterisert ved en rekke kriterier, som inkluderer følsomhet, spesifisitet, nøyaktighet og reproduserbarhet.

    Følsomhet er minimumsbeløpet av et stoff som kan detekteres ved hjelp av enzymimmunoassay. I dette tilfellet er den nedre grensen for følsomheten til denne metoden konsentrasjonen av teststoffet i prøven, som tilsvarer det minste positive resultatet av bestemmelsen, som er statistisk signifikant forskjellig fra indikatorene for bevisst negative prøver. Følsomheten til en IFTS er avhengig av en rekke omstendigheter som er relatert både til utformingen av testsystemet (immunosorbentens affinitet, kvaliteten på ekstraksjons- og buffersystemene) og oppløsningen og nøyaktigheten av registreringsmetoden.

    Spesifisitet - evnen til å identifisere nøyaktig komponentene for å bestemme hvilken enzymimmunoassay er utformet. Specificiteten av ELISA bestemmes i stor grad av kryssreaksjonen av antistoffer eller antigener (det vil si sammensetningen som brukes som en immunosorbent) med nært beslektede forbindelser, så vel som sammensetningen av inkubasjonsmediet (matriseffekt).

    Korrektitet - korrespondansen av gjennomsnittsverdien av resultatene av gjentatte bestemmelser av samme kontrollprøve med den sanne verdien av den målte parameteren. Nøyaktigheten av bestemmelsen i ELISA avhenger av kvaliteten på testsystemet og kontrollprøven. For gode ELISA testsystemer er korrekthetsindikatorene i området 90-110%. En egenskap ved biomedisinsk forskning i en ELISA er umuligheten av å etablere den eksakte verdien, og derfor er gjennomsnittet av flere ekspertlaboratorier tatt som den sanne verdien. Det statistiske kriteriet for korrekthet er det aritmetiske gjennomsnittet og graden av avviket fra den sanne verdien, uttrykt som prosentandel.

    Reproducerbarhet - Testsystemets evne til å vise de samme verdiene med gjentatte studier av samme prøve. Reproducerbarheten avhenger både av tilfeldige feil (feil) under prosedyren for å sette reaksjonen, og på kvaliteten på testsystemene og nøyaktigheten av metoden for registrering av resultatene. Det antas at reproduserbarheten av de samme kontrollprøver av samme selskap i forskjellige laboratorier ikke bør overstige verdien av variasjonskoeffisienten på 15%.

    Det er flere spesifikke ELISA-regime for bestemmelse av virale hepatittmarkører: a) direkte enzymimmunoassay; b) indirekte enzymimmunoassay; c) konkurransedyktig inhibering; c) "trap" eller "capture" -metoden.

    Av molekylærbiologiske metoder for diagnostisering av viral hepatitt, polymerasekjedereaksjon og hybridisering blir mer vanlig brukt. Disse metodene, spesielt PCR, gjør det mulig å oppdage meget små mengder spesifikt viralt DNA eller RNA og dermed dommereplikasjon, og i noen tilfeller replikasjonsaktivitet.

    Blodtest for hepatitt C

    Hepatitt C er en av de vanligste leversykdommene som oppstår når de smittes med hepatitt C-viruset (HCV), som kommer inn i kroppen først og fremst når det kommer i kontakt med blodet av en infisert person. Kronisk og akutt hepatitt C oppstår. I 70-80 prosent av pasientene med akutt hepatitt C er det ingen symptomer på sykdommen, men i enkelte tilfeller, etter noen tid etter infeksjon, er det manifestasjoner av sykdommen som uttrykkes i tretthet, magesmerter, appetittløp, mørkere urin, oppkast, kvalme, lynnedslag, gulsott, smerter i leddene. Symptomene oppstår som regel 6-7 uker etter infeksjon, men varigheten av tegn på sykdommen varierer fra 2 uker til seks måneder. Hvis de ovennevnte symptomene oppstår, må du konsultere en smittsom lege og ha en blodprøve for hepatitt C. Hepatittdiagnostikk utført i tide, kan oppdage sykdommen i sine tidlige stadier og øke sjansene for utvinning betydelig.

    Når en hepatitt C-test er planlagt

    Situasjoner når en Hepatitt C-test er nødvendig:

    • under graviditet og familieplanlegging;
    • pasienter med symptomer på kronisk eller akutt hepatitt;
    • personen er i fare. Disse er medisinske arbeidere, personer i fengsel, politimyndigheter, personer som bruker narkotika, har et stort antall seksuelle partnere, lider av aids, er på hemodialyse og andre.

    Forberedelse for hepatitt C-analyse

    Spesiell forberedelse til analyse av hepatitt C er ikke nødvendig. Til analyse blir blod tatt fra en vene på tom mage, samtidig skal minst åtte timer passere etter det siste måltidet.

    Hepatitt C ELISA-analyser

    Den første analysen, vanligvis foreskrevet for diagnostisering av hepatitt C - ELISA-test (enzymbundet immunosorbentanalyse). Hepatitt C ELISA-analyser kan påvise tilstedeværelse av antistoffer mot hepatitt C-viruset (anti-HCVAb) i blodet. Hvis resultatet av ELISA-testen er positivt, indikerer det tilstedeværelsen av kontakt av kroppen med hepatitt C-viruset. Men 40% av de som har en positiv ELISA, oppdager ikke viruset i blodet. Dette fenomenet kalles et falskt positivt resultat. Også ved hjelp av ELISA kontrolleres blodgiverens blod.

    RIBA for hepatitt C

    RIBA-testen for hepatitt C brukes til å bekrefte et positivt ELISA-resultat. Den rekombinante immunoblottingsmetoden (RIBA) er en mer nøyaktig studie av tilstedeværelsen av antistoffer mot hepatitt C-viruset. Tilstedeværelsen av hepatitt C-virus i kroppen bestemmer heller ikke et positivt resultat, men bekrefter bare tilstedeværelsen av antistoffer.

    Hepatitt C PCR tester

    For å oppdage tilstedeværelsen av hepatitt C-virus i blodet (HCV RNA) og å foreta en diagnose, bruker de oftest analysen ved hjelp av polymerasekjedereaksjonen (PCR). Denne studien gjør det mulig å oppdage med høy nøyaktighet tilstedeværelsen i blodet av til og med en liten mengde av viruset. PCR-analyse for hepatitt C kan avsløre tilstedeværelsen av et virus allerede 5 dager etter infeksjon, lenge før utseendet av antistoffer. Når resultatet av PCR-analyse er positivt, betyr det at det finnes en aktiv infeksjon.

    Det er slike variasjoner i analysen av PCR:

    • kvantitativ PCR, som gjør det mulig å bestemme ikke bare faktumet for tilstedeværelsen av viruset, men også den virale belastningen (mengden av viruset). Denne indikatoren er av stor betydning for å bestemme effektiviteten av behandlingen;
    • genotyping, etablering av genotypen av hepatitt C-viruset, som er viktig for å bestemme varighet og taktikk for behandlingen. Det er mer enn 10 genotyper av hepatitt C-viruset, men for klinisk praksis er det nok å definere fem av de vanligste typene: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

    Kvantitativ analyse av PCR utføres:

    • med en kvalitativ positiv test for tilstedeværelsen av hepatitt C-virus-RNA i serum;
    • for en nøyaktig vurdering av effektiviteten av behandlingen;
    • å bestemme taktikken til behandling av pasienten.

    Det er ikke noe direkte forhold mellom alvorlighetsgraden av hepatitt C og mengden av virus i blodet. Konsentrasjonen av viruset påvirker infeksjonen av sykdommen, det vil si jo større mengden virus i pasientens blod, desto større er risikoen for overføring av viruset, for eksempel gjennom seksuell kontakt eller fra mor til barn. Effektiviteten av behandlingen avhenger også av virusets konsentrasjon. Under behandlingen er en gunstig faktor en lav viral belastning, og en svært høy er ugunstig.

    Genotyping analyse er gjort:

    • med en kvalitativ positiv test for tilstedeværelsen av hepatitt C-virus-RNA i serum;
    • for en nøyaktig vurdering av effektiviteten av behandlingen;
    • å bestemme taktikken til behandling av pasienten;
    • å forutsi kroningen av den smittsomme prosessen;
    • for å bestemme utviklingen av sykdommen.

    Detektering av virusets genotype er av stor betydning for å bestemme varigheten av behandlingen, noe som er viktig, da interferon har et bredt spekter av bivirkninger og lav pasient toleranse.

    Dekoderingsanalyse for hepatitt C

    Normalt er virus-RNA, antistoffer mot dem og antigener helt fraværende. Tilstedeværelsen av antistoffer i blodet indikerer tilstedeværelse av kronisk eller akutt hepatitt C eller gjenopprettingstid. Hvis HCV RNA er tilstede i blodet, som bestemmes ved PCR-analyse, indikerer dette tilstedeværelsen av et virus i blodet.

    Med en feil testteknikk, transport og blodabnormaliteter kan PCR-analyse noen ganger vise falske positive resultater. Analyser av ELISA og RIBA i de tidlige stadiene av sykdommen, når kroppen ikke har fremstilt en tilstrekkelig mengde antistoffer, kan vise et falsk-negativt resultat.

    Hvis det oppnås positive resultater ved dekoding av testen for hepatitt C, er det nødvendig å kontakte en smittsomsspesialist og en gastroenterolog for videre diagnostisering og behandling.

    Segmenterte nøytrofiler senket

    Barnets blodplater er normale, forhøyet, senket

    Skjoldbruskstimulerende hormon TGT

    Diagnose av hepatitt

    Man kan ikke bestemme tilstedeværelsen av hepatitt i kroppen umiddelbart, siden inkubasjonstiden av sykdommen kan vare opptil fire uker. Når de første tegnene på sykdommen opptrer, forekommer radikale endringer i blodsammensetningen i den berørte organismen: En biokjemisk analyse rapporterer et alvorlig helseproblem og forekomsten av et patogent virus. Det er imidlertid ikke nok å donere blod for hepatitt for å få en endelig diagnose, og det er også nødvendig med detaljert diagnose av hepatitt.

    Laboratoriediagnose av hepatitt

    Det er ønskelig å utføre det etter slutten av inkubasjonsperioden, slik at legen med den største presisjonen kan bestemme leversykdommen som er tilstede i kroppen. Ellers vil den foreskrevne behandlingen ikke gi den ønskede terapeutiske effekten og til og med forverre det rådende kliniske bildet.

    Diagnose av hepatitt A

    Vanligvis begynner diagnosen av hepatitt A med en detaljert spørsmål om pasienten og utnevnelsen av en rekke tester som må utføres så snart som mulig. Dette er:

    • biokjemisk blodprøve;
    • fullfør blodtall
    • PCR-metode;
    • ELISA;
    • koagulasjon.

    Hvis Botkins sykdom utvikler seg, observeres et unormalt hopp med bilirubin, AlAT og AsAT, tymolprøve i henhold til resultatene fra den biokjemiske analysen av blod. Videre produseres spesifikt anti-HAV IgM, som er et uopprettelig faktum av tilstedeværelsen av hepatitt A.
    Generelt er blodanalysen bestemt av nedgang i leukocytter, hoppet i ESR og lymfocytose. Og likevel er den mest pålitelige metoden PCR, som bestemmer indikatoren for RNA for det patogene viruset.
    I tillegg studerer legen symptomene på sykdommen, hvoretter det kan gjøre en endelig diagnose og bryte gjennom til den mest effektive terapien. Behovet for instrumental undersøkelse er ekstremt sjelden. Etter en vellykket konservativ behandling i forhold til sykehusinnleggelse og karantene i pasienten, venter en endelig utvinning, og hepatitt A gjenoppstår ikke igjen.

    Diagnose av hepatitt B

    For å fastslå forekomsten av hepatitt B-virus er det også mulig i henhold til resultatene av laboratorietester, og for dette er det første som kreves for å donere blod for hepatitt. I naturen har det patogene viruset tre hovedantigener - HBsAg, HBcAg og HBeAg, til hvilke antistoffer produseres i kroppen. Hovedtrekket i dette kliniske bildet er ELISA - ELISA, som bare avslører spesifikke markører for hepatitt B.
    Umiddelbart er det nødvendig å klargjøre at antigen HBsAg fremkommer i blodet før de første symptomene på hepatitt og pålidelig er bestemt i isterioden. En negativ test utelukker imidlertid ikke forekomsten av hepatitt B, og krever derfor bruk av en like effektiv polymerasekjedereaksjons (PCR) metode.
    Hvis du mistenker at hepatitt B er obligatorisk, anbefales en biokjemisk blodprøve, som anbefales å passere i første omgang. Utførelse av en biopsi av leveren og en ultralyd av peritoneale organer diskuteres individuelt, men når sykdommens historie er tydelig, er det ikke nødvendig med kliniske undersøkelsesmetoder.

    Lever-ekkogram i autoimmun hepatitt i stadiet av kronisk hepatitt

    Diagnose av hepatitt C

    For å gjøre denne diagnosen er det ikke i det hele tatt tilstrekkelig å donere blod for hepatitt, siden viruset kan dominere i kroppen i latent form. Og likevel er de viktigste laboratorietester alle testene som er presentert ovenfor, samt tilleggsytelsen til en leverbiopsi. Denne mikroskopiske undersøkelsen av biologisk materiale (i vårt tilfelle et stykke levervev) bestemmer omfanget av den patologiske prosessen og vevsfibrose. Materialprøvetaking utføres under lokalbedøvelse, komplikasjoner av en slik prosedyre er ekstremt sjeldne i medisinsk praksis.
    Hvis mistanke om hepatitt C er hovedmetoden for klinisk undersøkelse en ultralyd av peritoneale organer. Årsaken er enkel: sykdommen manifesteres ofte av en visuell forandring i den berørte leveren, endringer i struktur og størrelse. På denne måten kan du bestemme:

    • størrelsen på leveren, milten, bukspyttkjertelen og galleblæren;
    • patologiske forandringer i disse organene;
    • generell blodstrøm i peritoneale organer;
    • optimal område for å utføre en leverbiopsi.

    Denne metoden for klinisk undersøkelse bestemmer alle fokale patologier av et organ på mikroskopisk nivå. Hvis leveren er representert på skjermen i grå skala, er det nødvendig med øyeblikkelig biopsi, siden den grå fargen visualiserer det berørte vevet av det "menneskelige filter".

    Forebygging av hepatitt

    Siden sykdommen ikke manifesterer seg umiddelbart, er den langt fra alle de kliniske bildene som går videre til umiddelbar behandling. Pasienten kan ganske enkelt ikke være klar over eksistensen av et patogent virus i kroppen, som i sin tur sprer seg raskt inn i blodet og smitter sunt leverceller.
    For å unngå en slik tragisk skjebne anbefales det å overholde alle forebyggende tiltak. Slike årvåkenhet vil redusere risikoen for sykelighet betydelig og spare deg for alvorlige helseproblemer i fremtiden. De grunnleggende regler for forebygging er oppført nedenfor:

    • vaske hendene dine etter gaten;
    • å være underlagt høy kvalitet behandling fersk grønnsaker og frukt;
    • utfør alle forebyggende vaksinasjoner angitt i årsplanen
    • selektiv holdning til seksuelle partnere;
    • unngå kontakt med syke mennesker;
    • Bruk bare engangssprøyter og vær spesielt oppmerksom på blodtransfusjonstasjoner.

    Det anbefales også regelmessig (hver sjette måned) å donere blod for hepatitt, for å sikre at viruset ikke trenger inn i kroppen og ikke smitter de en gang sunne leveren celler. Hvis diagnosen er bestemt, er det nødvendig å umiddelbart bli dispensarkonto og følg alle anbefalinger fra en spesialist.

    Publikasjonsforfatter:
    Syropyatov Sergey Nikolaevich
    Utdanning: Rostov State Medical University (Rostov State Medical University), Institutt for gastroenterologi og endoskopi.
    gastroenterolog
    Doktor i medisinske fag

    Dekoderingsanalyse for hepatitt C

    Hva skal testes for dette? Hva er deres norm? Og hvilken lege vil bli dechifisert og gjort den nøyaktige diagnosen?

    Oppdragsbetingelser

    Obligatorisk testing for hepatitt C er normen for:

    1. Kvinner i perioden med planlegging og graviditet;
    2. Pasienter med symptomer på kronisk eller akutt hepatitt;
    3. Personer i fare, inkludert:
      • medisinske fagfolk;
      • rettshåndhevelse offiserer;
      • narkomane;
      • AIDS-pasienter.

    Analyser og forberedelser for dem

    Spesiell forberedelse til testing for hepatitt C er ikke nødvendig. Blodprøvetaking gjøres på en tom mage fra en vene minst 10 timer etter et måltid.

    Normen som regulerer studietidspunktet, er ikke mer enn 2 dager.

    Hepatitt C ELISA-analyser

    I utgangspunktet foreskrevet for diagnose av en sykdom, er analysen en ELISA-test eller et enzymimmunoassay, som kan påvise forekomsten og mengden av anti-HCV-spesifikke antistoffer i blodet i 95% tilfeller. Disse antistoffene er 2 typer - IgM og IgG. Hvis resultatet er positivt, indikerer det at det er kontakt med kroppen med HCV. Imidlertid oppdager 40% av personer med positiv ELISA ikke viruset i blodet - dette er et tvilsomt eller falskt positivt resultat.

    RIBA for hepatitt C

    For å bekrefte de positive resultatene av ELISA, brukes rekombinant immunoblotting (RIBA), som er en mer nøyaktig studie av tilstedeværelsen av antistoffer mot hepatitt C-viruset. Et positivt resultat avgjør imidlertid ikke forekomsten av HCV i pasientens kropp, men bekrefter bare tilstedeværelsen av antistoffer i den.

    Hepatitt C PCR tester

    HCV-RNA-analysen, ofte referert til som en PCR-analyse, eller PCR, er en mer nøyaktig blodprøve som direkte oppdager det genetiske materialet i hepatittviruset (hvert virus er en partikkel av RNA). PCR-analyse av hepatitt C avslører det før forekomsten av antistoffer i en periode som ikke overstiger fem dager etter infeksjon.

    • Kvantitativ PCR, som ikke bare bestemmer faktumet for tilstedeværelsen av viruset, men også dets kvantitet.
    • Genotyping, som gjør det mulig å etablere genotypen av hepatitt C-viruset, som gjør det mulig å bestemme hvilke behandlingsmetoder som skal brukes i hvert enkelt tilfelle.

    Det er mer enn 10 genotyper av HCV, men for klinisk praksis er det nok å identifisere 5 av de vanligste.

    La oss se nærmere på de kvantitative og kvalitative analysene for HCV RNA.

    Kvalitativ analyse indikerer tilstedeværelsen av et virus i blodet. Dette er en ganske tvilsom analyse, siden den har en følsomhetsgrense. Ved utførelse av høyverdig PCR er det ønskelig å bruke et diagnostisk system, hvor følsomheten ikke er mindre enn 50 internasjonale enheter per ml (IE / ml). Referanseverdien eller normen er et negativt resultat ("ikke detektert"), hvilket indikerer at ingen HCV-spesifikke RNA-fragmenter ble detektert i den analyserte prøven. Et positivt PCR-resultat ("detektert") indikerer tilstedeværelsen av en aktiv infeksjon.

    En kvantitativ analyse av PCR, eller virusbelastning, er en test for konsentrasjonen av viruset (viremia) i blodet, som viser antall enheter av viralt RNA i et bestemt blodvolum.

    Tolkning av indikatorer:

    1. Mer enn 800 IE / ml er normen for en høy viral belastning;
    2. Mindre enn 800 IE / ml er normen for lav viral belastning.
    3. Kvantitativ PCR-analyse bør utføres dersom:
    4. En kvalitativ test for tilstedeværelsen av hepatitt C-virus RNA i serum har positive resultater;
    5. Bestemt taktikk og evaluering av effektiviteten av pasientterapi.

    Den kvantitative indikatoren for viruset i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen er ikke direkte relatert til hverandre.

    • infeksjon av sykdommen, noe som innebærer en høyere risiko for overføring av viruset med høyere innhold i pasientens blod;
    • Effektiviteten av terapien, som er høyere, jo lavere viral belastning.

    Genotypingsanalyse utføres med en kvalitativt positiv test for tilstedeværelse av hepatitt C-virus-RNA i serum, samt for:

    1. Definisjoner av sykdomsprogresjon;
    2. Behandlingstaktikk;
    3. Evaluering av effektiviteten av terapi;
    4. Forutsigelse av kronisk infeksjonsprosess.

    Behandlingens varighet, avhengig av deteksjon av genotype av viruset, er en viktig faktor, siden legemiddelene som brukes til behandling, har en rekke bivirkninger og er dårlig tolerert av pasientene.

    Dekoderingsanalyse for hepatitt C

    Dekrypteringstester utført av en kvalifisert tekniker. Normen innebærer det totale fraværet av virus-RNA, antistoffer mot dem og antigener. Innholdet av antistoffer i blodet kan indikere tilstedeværelse av akutt eller kronisk hepatitt C, og løpet av gjenopprettingstiden. Tilstedeværelsen av HCV RNA i blodet, oppdaget ved PCR, indikerer tilstedeværelsen av et virus i blodet.

    Når brudd på samlingen og transporten av blod, samt studieteknologien, viser PCR-analysen noen ganger et falskt positivt eller tvilsomt resultat. Analyser av RIBA og ELISA kan vise falske positive resultater i tilfelle av et tidlig stadium av sykdommen, når kroppen ennå ikke har vært i stand til å produsere nok antistoffer.

    Medisinsk statistikk viser at ca 4% av verdens befolkning er infisert med hepatitt C-viruset. Imidlertid gjenspeiler denne figuren ikke den objektive virkeligheten, fordi mange ikke engang innser at de er bærer av dette viruset. Det er derfor det er så viktig å regelmessig undersøke legen og regelmessig gjøre en blodprøve for hepatitt. Hver enkelt test kan gi et tvilsomt resultat, og bare i kombinasjon kan de endelig bestemme diagnosen og begynne å tilstrekkelig behandle hepatitt.


    Relaterte Artikler Hepatitt