Hepatitt B PCR

Share Tweet Pin it

Tilgjengeligheten av moderne anti-hepatitt B (HBV) medikamenter med klare indikasjoner på deres administrasjon krever en nøyaktig og rask verifisering av diagnosen. På grunn av knappe kliniske data i de første ukene av sykdommen og begrensede immunanalysemetoder for analyse, reduseres diagnosens frekvens.

Tilstedeværelsen av markører anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe lar deg bekrefte HBV eller oppdage en tidligere sykdom. Men det er mulig å bestemme tilstedeværelsen av aktive virale partikler i blodet og telle tallet deres på tidspunktet for studien ved hjelp av PCR - en kvantitativ sanntidsprøve for å oppdage hepatitt B. Metoden sammenligner med diagnostiske metoder i ELISA, diagnostiseringsproblemer og lar deg forutsi sykdomsforløpet mens du mottar antivirale legemidler.

Grunnleggende om sykdomsdiagnose

Diagnose av hepatitt B er basert på vurdering av kliniske manifestasjoner, enzymimmunanalyse og instrumentelle metoder for forskning. Sykdommen oppstår i den akutte fasen etter inkuberingsperioden, og avhengig av infeksjonsdosen og effektiviteten av behandlingen, går det inn i et kronisk stadium. Hovedmålet med behandlingen er å forhindre kronisering, det vil si eliminering av alle virale partikler fra blodet. Det kliniske løpet av sykdommen er en kur uten etterfølgende viremi.

Faktumet med å eliminere infeksjonen må bevises ved en kvantitativ metode for forskning.

Siden et immunoassay med kvalitativ enzym gjør det mulig å diagnostisere HBV indirekte, det vil si, det viser ikke tilstedeværelsen av patogenet i kroppens indre miljø, men karakteriserer immunresponsen mot infeksjonen, overvåker effekten av terapi og det faktum at kur blir vanskelig å bevise. Derfor bør pasienten med hepatitt B eller med nærvær av diagnostiske kriterier i sin favør utføres polymerasekjedereaksjon for å kvantifisere antall virale partikler i blodet. Diagnostisk frekvens er mangelen på kopier av DNA fra infeksjonen.

Beskrivelse av diagnostikkmetoden

Den svært følsomme metoden for PCR-diagnostikk av hepatitt B tilhører kategorien genetisk utviklede molekylærbiologiske studier. Gjennom det bestemmes mengden av virus DNA i det biologiske materialet til pasienten og den tillatte hastigheten. I henhold til de oppnådde resultatene er antall viruspartikler per voluminnhold etablert. Materialet til den diagnostiske testen er pasientens venøse blod. Et inntak er ønskelig på tom mage på grunn av den mulige effekten av chyleserum på resultatet av studien.

De oppnådde resultatene må gis til legen for tolkning og bestemmelse av ytterligere taktikk. Selvdekoding representerer ikke diagnostisk verdi.

Betydningen av resultatet av antall virale partikler oppnådd ved PCR-metoden overstiger verdien av enzymimmunoassays. Siden analysen i sanntidsmodus viser tilstedeværelsen av sykdomsfremkallende middel i blodet, er innholdsinformasjonen høyere enn andre. Hvis ELISA bare indikerer tilstedeværelse av antistoffer, som observeres fra 4 uker av inkubasjonsperioden og varer mer enn 8 uker etter at viruset er eliminert fra blodet, så bekrefter polymerasekjedereaksjonen klart sykdomsaktiviteten eller dens kur, karakteriserer dynamikken til den foreskrevne terapi.

Polymerasekjedereaksjon med kvantitativ bestemmelse av patogenpartikler løser diagnostiske problemer for å stoppe behandlingen på grunn av gjenoppretting eller fortsettende behandling på grunn av manglende effektivitet. Metoden er så spesifikk som mulig for HBV-viruset og preges av en akseptabel nøyaktighet.

Indikasjoner og ytelsesmål

Kvantitativ analyse av hepatitt B er den mest pålitelige og lar deg bekrefte dataene som er oppnådd ved ELISA-metoder. Han er utnevnt når:

  1. oppnå et positivt diagnostisk resultat av ELISA;
  2. behandle en pasient med en fast diagnose av viral leverskade
  3. i diagnosen hepatitt blandet etiologi;
  4. om nødvendig, bestem virusbelastningen hos en pasient.

Siden enzymet immunoassay-metoden brukes mer omfattende i praksis med en smittsomsspesialist, kan enkelte pasienter med mild sykdom behandles uten å måtte beregne viralbelastningen. Men PCR er generelt betraktet som "gullstandarden" for diagnostikk i Hepatology, da det unngår et resultat av en rekke organisatoriske problemer. Derfor har pasientens retning for kvantitativ analyse følgende mål:

  • oppnå data om antall virale partikler i pasientens blod;
  • bekreftelse av den akutte løpet av hepatitt og rettidig verifisering av kronisk sykdom;
  • konstant deteksjon av latente virusbærere med positive ELISA-tester, overvåking av deres viremia;
  • ta beslutninger om foreskrivelse av antiviral behandling, kombinasjon og avslutning.

Det viktigste målet med å anvende en kvantitativ PCR-test for å oppdage HBV er å identifisere mulige kombinasjoner av behandling. I tilfelle av høy viral belastning gir analysens resultat spesialisten muligheten til å fortsette med kombinasjonen av legemidler. Under behandlingen er det enkelt å bestemme effektiviteten av den foreskrevne farmakologiske behandlingen basert på resultat av PCR. Å være guidet bare ved data fra immunofermentale metoder, er det umulig å avgjøre om behandling og dagens effektivitet er rettet. Derfor er en kvantitativ sanntidsprøve en nødvendig analyse før behandling med akutt hepatitt, latent virusinfeksjon med høy viremia og kronisk HBV påbegynnes.

Tolkning av kvantitative PCR-testresultater

Fortolkningen av resultatene av den kvantitative PCR-testen skal utføres av pasientens behandlende lege. Det er nødvendig å evaluere diagnostisk indikator og bestemme terapeutisk taktikk.

En standardanalysator er i stand til å produsere en kvantitativ indikator som reflekterer antall kopier av virus DNA som er tilstede i det studerte venøse blodet. Måleenheter - kopier / ml, IE / ml (kopier per milliliter, internasjonale enheter per milliliter). Tolkningen av resultatene er gitt i tabellen med indikasjon på ulike måleenheter.

Hepatitt B-virus DNA, kvantitasjon

Alfabetisk søk

Hva er hepatitt B-virus DNA-kvantifisering?

HBV er et komplekst DNA-holdig virus og tilhører Hepadnaviridae-familien av Orthohepadnavirus-slekten.

Hepatitt B er en antroponotisk infeksjon, hovedsakelig med parenteral infeksjonsmekanisme, som kan forekomme i form av viral vogn, akutt og kronisk form og er preget av leverskade med mulig utvikling av akutt leversvikt, kronisk hepatitt, levercirrhose og primær leverkreft (hepatocellulært karcinom).

Infeksjon av menneskekroppen skjer gjennom direkte penetrering av HBV i blodet (med eventuelle invasive inngrep og ved transfusjon av blod og dets preparater), eller gjennom slimhinner og hud under fødsel, under seksuelle og tette husholdninger. En gang i leveren trenger HBV inn i hepatocytten, hvor den begynner å formere seg raskt.

Utviklingen av en smittsom prosess kan forekomme på to måter: replikative og integrerende. Den replikative formen av infeksjonen fører til utvikling av akutt eller kronisk hepatitt og levercirrhose, mens den integrerende formen fører til utvikling av "sunn" virusinfeksjon, inaktiv kronisk hepatitt, levercirrhose og primært hepatokarcinom.

Serologisk diagnose og prognose for HBV-infeksjon er basert på deteksjon av virusantigener og antistoffer mot det. Men som det viste seg, er det funnet nok mutantstammer (HBeAg-negativ) i populasjonen av hepatitt B-viruset, som ikke er påvist ved konvensjonelle serologiske test. Derfor er PCR-metoden for diagnose av HBV-infeksjon ekstremt viktig.

Kvantitativ bestemmelse av DNA fra hepatitt B-virus ved PCR.

Analytiske indikatorer: DNA-deteksjon av hepatitt B-virus (hepatitt B-virus) ved hjelp av polymerasekjedereaksjon (PCR) og bestemmelse av virusbelastning i blodplasma.

Det identifiserte fragmentet er en unik DNA-sekvens av genet for det strukturelle protein i hepatitt B-viruset. Specificiteten av bestemmelsen er 98%. Deteksjonsfølsomheten er fra 2x105 IE / ml 5x103 kopier / ml serumviruspartikler.

Kvantitativ karakterisering av DNA-innholdet av hepatitt B-virus er viktig for å vurdere effektiviteten av antiviral terapi og har prognostisk betydning ved bestemmelse av kronisk hepatitt B: den innledningsvis lavt nivå av viremi (DNA HBV minst 2x105 kopier / ml (2x105 IU / ml)) i prosent av kronisk akutt hepatitt B er nær null. Ved en konsentrasjon på 2x105 HBV DNA-kopier / ml (2x105 IU / ml) til 2x10 ° kopier / ml (8h105 IU / ml) chronization prosess observeres hos 25-30% av pasientene, men med et høyt nivå av viremia hos en pasient (flere kopier av 2x10 ° / ml (8x105 IE / ml)) akutt hepatitt B blir ofte kronisk. En reduksjon på 85% i hepatitt B-virus-DNA-konsentrasjonen ved den tredje dagen fra starten av behandlingen er en rask og nøyaktig parameter for å forutsi effektiviteten av behandlingen.

Typer av PCR for hepatitt B og avkodingsresultater

Polymeraskjedereaksjon er en type blodprøve som nøyaktig kan oppdage hepatitt B-viruset. En egenskap ved metoden er at den kan vise HBV i de tidlige stadiene - en måned etter infeksjon, mens et bestemt antigen oppdages hos en pasient bare etter 2 måneder. PCR kan detektere ikke bare et normalt DNA-virus, men også mutantstammer som ingen annen analyse kan se.

Ved dekoding av PCR for hepatitt B, blir resultatene sammenlignet med standardverdier. Basert på dette blir det konklusjoner om forekomsten av sykdommen (positivt resultat), konsentrasjonen av viruset (aktivitet) eller fraværet av sykdommen (negativt resultat). Databehandling er 2 uker.

Typer av PCR for viral hepatitt B

Det finnes 2 typer diagnostikk som er foreskrevet for hepatitt B. Høy kvalitet PCR gjør det mulig med 100% nøyaktighet å fortelle om det er HBV i blodet eller ikke. Kvantitativ PCR viser virusets aktivitet, det vil si hvor mye HBV DNA er inneholdt i 1 ml blod.

PCR av høy kvalitet og tolkning

En blodprøve for hepatitt B ved PCR kan kun oppdage nærvær av DNA-fragmenter. Utnevnt i tilfelle når pasienten mistenker HBV-infeksjon (HBV) eller andre diagnosemetoder, gir serologiske tester ikke et klart svar. Dekoding av resultatene når du utfører en kvalitativ analyse er veldig enkel:

  • negativt resultat - ingen virus;
  • positivt resultat - virus oppdaget.

Formålet med høyverdig PCR er å bekrefte eller motbevise tilstedeværelsen av hepatitt B-viruset, samt å foreta en tidlig diagnose. Hvis HBV oppdages innen 1-2 uker etter infeksjon, vil behandlingen være maksimalt effektiv. Med den aktive utviklingen av HBV i 2 måneder og over, blir sykdommen kronisk og kan ikke fullstendig herdes.

I tilfelle når høy kvalitet PCR for hepatitt indikeres ved tilstedeværelse av et virus, er neste trinn å gjennomføre en kvantitativ diagnose.

Kvantitativ PCR

For å effektiv behandling eller evaluering av resultatene av terapi, er det ikke bare å vite at pasienten har HBV. Det er nødvendig å kvantifisere verdien av DNA av hepatitt B-virus i 1 ml blod, det vil si den virale belastningen på kroppen. Denne type PCR for hepatitt B utføres i følgende tilfeller:

  1. Før du foreskriver behandling.
  2. For å vurdere effektiviteten av behandlingen.
  3. For å bestemme utviklingen av resistens av viruset til de tatt medikamenter.
  4. Å bestemme scenen hvor sykdommen ligger.

Måleenheten for et virus er internasjonale enheter (IE / ml) eller antall kopier av DNA / ml, det vil si antallet DNA-fragmenter per 1 ml blod. Forholdet mellom de to enhetene avhenger av det valgte testsystemet og varierer fra 2 til 7 kopier / ml i 1 IE / ml. Hvis systemet er ukjent, brukes den gjennomsnittlige verdien for konvertering:

1 IE / ml = 5 kopier / ml

Hvis kvantitativ analyse gjøres umiddelbart, er marginalen for diagnostisering av sykdommen 75 IE / ml. Når resultatet er over denne indikatoren, blir diagnosen HBV laget, under - HBV er ikke detektert.

Behandling av kvantitativ PCR

I hepatitt B er følgende virusvekt (viremia) -verdier, kopier / ml, PCR-standardene:

  • 10 ^ 5 kopier / ml. Når det med en stor viral aktivitet er en økning i ALT-nivået oftere 2 ganger på seks måneder, så er antiviral terapi umiddelbart foreskrevet.

For å finne ut hvordan DNA-hepatitt vil oppføre seg når det gjelder kronisk tilstand, det vil si overgangen til kronisk form fra akutt, blir resultatene av PCR-diagnostikk også brukt:

  • HBV DNA med 2 x 10 ^ 6 kopier / ml betyr at oppkjøpet av den kroniske formen av sykdommen er uunngåelig.

Forberedelse til undersøkelsen

For å bestemme tilstedeværelsen av HBV ved PCR, tas blod fra en blodåre. Prosedyren utføres alltid strengt på tom mage, og det er best å komme til laboratoriet om morgenen når den naturlige hviletiden fra mat er 8 timer. For at resultatene av undersøkelsen skal være korrekte, er det nødvendig å vite på forhånd hvordan du skal forberede turen til klinikken på riktig måte. Ytterligere trinn er som følger:

  1. Avslag på fettstoffer, røyking, alkohol og idrett i 12 timer før prosedyren.
  2. Hvil i 20 minutter umiddelbart før du donerer blod.
  3. Før du starter prosedyren, må sykepleieren være advart om de tatt medisinene.

Advarsel! Hvis diagnosen utføres av et barn under 5 år, så en halv time før prosedyren, bør han drikke 1 glass kokt vann hvert 10. minutt.

Oppsummering

Hittil er PCR-diagnostikk for påvisning av hepatitt B den mest nøyaktige metoden. Metoden lar deg se de skjulte og muterte former for sykdommen, for å identifisere sykdommen i de første ukene etter infeksjon og følgelig å gjennomføre en effektiv behandling. Avhengig av situasjonen utføres kvalitativ eller kvantitativ PCR, som er rettet mot å detektere HBV og etablere sin aktivitet. For å bli testet må du kontakte en virolog, en spesialist i smittsomme sykdommer eller en hepatolog.

Hepatitt B PCR

PCR-diagnostikk gjør det ikke bare mulig å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt B-virus i blodet og dets etiologi, men også for å evaluere aktiviteten. Påvisning av viral belastning er spesielt viktig for valg av effektiv behandling, hvis den er for høy, så reduseres sannsynligheten for utvinning. Hva er kjernen i polymerasekjedereaksjonsmetoden?

Essensen av PCR-diagnostikk

DNA-virus i blodet ved PCR-metoden for hepatitt kan påvises ved slutten av inkubasjonsperioden, på dette tidspunkt kan HBsAg detekteres mot bakgrunnen av et økt nivå av transaminaser, hvoretter HBeAg fremkommer.

  • Med en kvalitativ definisjon kan du nøyaktig fastslå diagnosen, det er eller det er ingen hepatitt. Normalt bør det ikke være noe DNA i blodet.
  • Den kvantitative metoden tillater å bestemme intensiteten i utviklingen av sykdommen og reproduksjonen av viruset.

Analysen har en svært høy følsomhet og pålitelighet. Som biologisk materiale tar venøst ​​blod. Takket være moderne teknologi kan PCR oppdage viruset i en konsentrasjon på 5 × 10 3 -10 4 kopier / ml i blodet. Ifølge resultatene fra analysen, å vite normen, er det mulig å bedømme virusbelastningen og forutsi behandlingen.

Det er viktig! Det er virusets DNA bidrar til utviklingen av cirrose og andre kroniske leversykdommer.

DNA-deteksjon med PCR er nødvendig i følgende tilfeller:

  1. Tviler på formuleringen av den endelige analysen etter testing.
  2. Bestemmelse av akutt stadium av sykdommen.
  3. Påvisning av latente former for hepatitt.
  4. Evaluering av effekt etter antiviral terapi.

Hvordan deklarere resultatene oppnådd etter PCR-diagnostikk?

PCR kvantitativ

Ved kvantitativ vurdering kan du ikke bare bestemme tilstedeværelsen av et virus, men også finne ut den virale belastningen hvis PCR viser et positivt resultat.

En kvantitativ metode er nødvendig for å finne ut slik informasjon:

  1. Intensiteten av utviklingen av sykdommen.
  2. Effektiviteten av behandlingen.
  3. Utviklingen av resistens mot antivirale legemidler.

Kvantifisering er svært viktig når man foretar en diagnose av kronisk hepatitt. I dette tilfellet vil alle indikatorene ikke ligge innenfor det normale området. Transaminase-nivået vil bli økt, virusaktivitetsindeksen vil være mer enn 4, og virus-DNA-konsentrasjonen vil være over 105 kopier av DNA / ml. Hvis viruskonsentrasjonen er lavere og transaminase nivået er normalt, kan vi snakke om passiv bærer.

Før utnevnelse av antiviral behandling, er gjennomføringen av PCR-diagnostikk, nemlig kvantitativ undersøkelse, avgjørende for å bestemme virusbelastningen.

Gjør analysen hver 3. måned, og hvis virusbelastningen øker 10 ganger, så kan vi snakke om motstanden til viruset til behandling.

  • Kvantitativ analyse gir svært viktig informasjon, fordi du kan bestemme hvor mye patogenets DNA er i blodet. Jo større mengden er, jo større er viralbelastningen og jo mer alvorlig pasientens tilstand.
  • Ved å redusere viral belastning etter behandling, kan man dømme effektiviteten.
  • I noen tilfeller er PCR for hepatitt en indikasjon på ytterligere testing, for eksempel en leverbiopsi. Ved forhøyede nivåer av ALT utføres PCR. Dekryptering av tester er som følger: Hvis virusbelastningen er mer enn 10 5 kopier av DNA / ml, og ALT-nivået overskrider normen, men ikke mer enn 2 ganger i løpet av et halvt år, trenger en slik pasient en biopsi. Ved sterk betennelse eller fibrose er antiviral behandling indikert. Hvis ALT-nivået overskrider normen med mer enn 2 ganger med høy viral belastning, foreskrives behandlingen umiddelbart uten tilleggsdiagnostikk.

Kun gode spesialister vil kunne dechifisere resultatene av kvantitativ PCR på riktig måte.

PCR-kvalitet

Kvalitativ analyse gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt B i blodet. Normalt bør det være fraværende. Med denne metoden kan du nøyaktig etablere diagnosen.

HPR-analyse av høy kvalitet gir et 100% nøyaktig resultat.

Ingen annen metode gir slike pålitelige data. I mer enn halvparten av tilfellene etter å ha bestått diagnosen, blir DNA av viruset detektert, i fravær av antigen. Det er svært viktig å etablere diagnosen ved den første fasen av sykdommen.

Det er bevist at hvis DNA i hepatitt B-viruset reagerer aktivt i menneskekroppen i to måneder, blir sykdommen kronisk. Hvis vi begynner å bekjempe viruset allerede i de første ukene etter infeksjon, er sjansene for en fullstendig gjenoppretting veldig høy.

Hvordan er dekoding av de oppnådde resultatene fra undersøkelsen ved hjelp av den kvalitative metoden?

Dekoding analysen er veldig enkel:

  • Normalt bør resultatet være negativt, det vil si at virusets DNA ikke ble detektert.
  • Et positivt resultat indikerer tilstedeværelsen av hepatitt.

Analysen bidrar til å identifisere viruset, bestemme genotypen og starte behandling i tide. Svært ofte, i nærvær av DNA, sammen med en kvalitativ vurdering, utfører de også en kvantitativ.

Hvordan forberede seg på undersøkelsen?

Når du analyserer hepatitt ved hjelp av PCR-diagnostikk, tas blod fra en blodåre. Det er best å bli undersøkt om morgenen, siden blodet alltid skal doneres på tom mage (etter siste måltid skal minst 8 timer passere).

For at analysen skal være så pålitelig som mulig, må pasienten være oppmerksom på noen faktorer som kan påvirke sluttresultatet:

  • Før du donerer blod fra en vene, må du hvile i 20 minutter.
  • I tillegg er analysen gitt på tom mage, så i ytterligere 12 timer kan du ikke drikke alkohol, røyk, leke sport og spise fettstoffer.
  • Noen medisiner som pasienten må ta kan påvirke sluttresultatet. Laboratorietekniker skal være oppmerksom på tilfelle av narkotikabehandling.
  • Hvis blodet må doneres til et barn under 5 år, så er det i dette tilfellet nødvendig å drikke det hvert 10. minutt, en halv time før diagnosen. på et glass kokt vann.

Det er svært viktig å gjennomgå PCR i en klinikk som har fungert bra. Faktisk, til tross for at PCR bestemmer tilstedeværelsen av et virus med en nøyaktighet på opptil 100%, kan dette tallet falle til 95%, hvis vi vurderer den menneskelige faktoren.

Ukvalifiserte teknikere eller dårlig rykte kan resultere i falske resultater.

HBV, DNA-kvantifisert [sanntids-PCR]

En studie for å identifisere årsaksmidlet til hepatitt B (HBV), hvor forekomsten av genetisk materiale (DNA) av viruset og dets kvantitet (virusbelastning) i blodprøven bestemmes ved bruk av realtids-polymerasekjedereaksjonsmetoden (RT-PCR).

HBV-DNA kan detekteres ved en konsentrasjon som ligger utenfor den nedre grensen for det lineære konsentrasjonsområdet. Linjært konsentrasjonsområde er området der du nøyaktig kan beregne antall kopier av patogenet. For denne analysen er det lineære området for HBV DNA-konsentrasjoner bestemt av detekteringsforsterkeren 7,5 × 10 2 - 1,0 x 108 kopier / ml prøve.

Russiske synonymer

Hepatitt B-virus (HBV), DNA-kvantifisering.

Engelsk synonymer

Hepatitt B Virus DNA, Kvantitativ, Realtid PCR, Blod; HBV viral belastning; Hepatitt B Virus DNA Quant.

Forskningsmetode

Realtids-polymerasekjedereaksjon.

Måleenheter

Kopier / ml (kopi per milliliter).

Hva biomateriale kan brukes til forskning?

Hvordan forbereder du på studien?

Ikke røyk i 30 minutter før du donerer blod.

Generell informasjon om studien

Viral hepatitt B (HBV) er en smittsom sykdom i leveren forårsaket av et DNA-holdig hepatitt B-virus (HBV). Blant alle årsakene til akutt hepatitt og kronisk virusinfeksjon, anses hepatitt B-viruset som en av de vanligste i verden. Det faktiske antallet infiserte er ukjent, siden mange mennesker har infeksjonen uten spesifikke symptomer og ikke søker medisinsk hjelp. Ofte oppdages viruset under forebyggende laboratorietester. Ifølge grove estimater er det rundt 350 millioner mennesker i verden som er rammet av hepatitt B-viruset og 620.000 dør fra effektene hvert år. I Russland overstiger antall bærere av HBV 5 millioner mennesker.

Kilden til infeksjon er en HBV-pasient eller en asymptomatisk virusbærer. HBV overføres med blod og andre kroppsvæsker. Du kan bli smittet gjennom ubeskyttet sex, bruk av ikke-sterile sprøyter, blodtransfusjoner og transplantasjon av donororganer, barnet kan bli infisert av moren under eller etter fødselen (gjennom sprekker i brystvorten). Risikogruppen inneholder: Helsearbeidere som kan ha kontakt med pasientens blod, pasienter som får hemodialyse, injiserende narkotikabrukere, seksuelt misbrukte mennesker, barn født til mødre med HBV.

Inkubasjonsperioden for sykdommen er fra 4 uker til 6 måneder. Viral hepatitt B kan forekomme i form av milde former som varer flere uker, så vel som i form av kronisk kronisk infeksjon. De viktigste symptomene på hepatitt er hudlindring, feber, kvalme, tretthet, laboratorieforsøk - unormal leverfunksjon og spesifikke antigener i hepatitt B-viruset. Akutt sykdom kan raskt føre til døden, gå inn i kronisk infeksjon eller slutt ved fullstendig gjenoppretting. Det antas at HBV dannes etter sterkt sterk immunitet. Kronisk viral hepatitt B er assosiert med utviklingen av cirrose og leverkreft.

Det er flere spesifikke tester for å oppdage eksisterende eller overført viral hepatitt B. For å bekrefte forekomsten av infeksjon og for å avklare sykdommens periode brukes definisjonen av virusantigener, antistoffer mot dem og virus-DNA.

Polymeraskjedereaksjonen er svært sensitiv og spesifikk. PCR kan brukes til å bestemme DNA av et virus enten kvalitativt eller kvantitativt. På grunn av den kvalitative metoden er tilstedeværelsen av hepatitt B-viruset i kroppen og dets aktive reproduksjon bekreftet. Kvantitativ bestemmelse av viral belastning gjør det mulig å vurdere intensiteten av sykdomsutviklingen, effektiviteten av behandlingen eller utviklingen av resistens mot antivirale legemidler.

Det er et forhold mellom konsentrasjonen av viruset i blodet og utfallet av akutt viral hepatitt B. Med lavt nivå av viremia er sannsynligheten for at infeksjon blir kronisk nær null, og en infisert person er ikke farlig for andre. Med høy viral belastning (5 kopier / ml) oppstår kroniskhet ofte og pasienten er en potensiell infeksjonskilde. Påvist forhold mellom mengden av virus-DNA i serum, tilstedeværelse av HBeAg, økt ALT og utvikling av cirrose og hepatocellulært karcinom (leverkreft).

Effektiviteten av antiviral terapi vurderes ved å redusere mengden av virus-DNA i blodet. 3-6 måneder etter behandlingsstart, bør virusbelastningen med en tilstrekkelig terapeutisk respons reduseres med 1-2 størrelsesordener. Fraværet av en reduksjon i antallet av viruset eller økningen mot bakgrunnen av behandlingen som kreves, krever en gjennomgang og endring av behandlingen.

Kvantifisering av DNA fra hepatitt B-viruset sammen med det kliniske bildet av sykdommen og biokjemiske parametere, markørene for infeksjon og resultatet av leverbiopsi tillater å forutsi sykdommen og vurdere behovet for antiviral terapi.

Hva brukes forskning til?

  • Å forutsi løpet av viral hepatitt B.
  • For å bekrefte den kroniske formen for viral hepatitt B.
  • Å identifisere bærere av viral hepatitt B og overvåke viral replikasjonsaktivitet.
  • Å identifisere skjulte og mutante stammer av hepatitt B.
  • For å vurdere effektiviteten av antiviral terapi for hepatitt B og avgjøre videre behandlingsteknikker.

Når er en studie planlagt?

  • Med kvalitativ gjenkjenning av DNA i hepatitt B-viruset.
  • Ved akutt og kronisk viral hepatitt B.
  • Når blandet hepatitt.
  • Før og under antiviral terapi.

Hva betyr resultatene?

  • "Ikke oppdaget" - DNAet av hepatitt B-viruset oppdages ikke eller verdien er under følsomhetsgrensen for metoden (200 kopier / ml = 120 IE / ml).
  • 10 ^ 5 kopier / ml (6 * 10 ^ 4 IE / ml) - høy viral belastning, en aktiv infeksjonsprosess (antiviral terapi er nødvendig).
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kopier / ml (> 6 * 10 ^ 7 IE / ml) - Hepatitt B-virus DNA ble detektert ved en konsentrasjon over det lineære konsentrasjonsområdet.

Det lineære området for DNA-konsentrasjoner av hepatitt B-viruset, bestemt av detekteringsforsterkeren, er 7,5 * 10 ^ 2 - 1,0 * 10 ^ 8 kopier / ml (4,5 * 10 ^ 2 - 6 * 10 ^ 7 IE / ml).

Hva kan påvirke resultatet?

Viktige notater

  • Kvantitativ bestemmelse av DNA av hepatitt B-virus er en obligatorisk studie før utnevnelse av antiviral terapi. I løpet av behandlingen må analysen gjentas etter 3-6 måneder.
  • Viral hepatitt B kombineres ofte med viral hepatitt D.

Anbefales også

Hvem gjør studien?

litteratur

  1. Zh.I. Vozianova Infeksiøse og parasittiske sykdommer: I 3 tonn. - K.: Helse, 2000 - T.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, og andre. Hepatitt B Hepatitt B Virus DNA Hepatitt Hepatitt B. J Clin Microbiol. 2003 oktober; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrisons prinsipper for internmedisin. 16. utg. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Behandling av hepatitt B. En konsensusutviklingskonferanse for NIH. Program og abstrakter. 20.-22. Oktober 2008.

Alt om kvantifiserende hepatitt B

Hepatitt B er en viral infeksjon som påvirker leveren. I dag er rundt 300 millioner mennesker over hele verden bærere av hepatitt B.

I noen går viralet inn i cirrose eller hepatocellulært karcinom (den første fasen av kreft). Nye antivirale sykdomsforskningsstrategier har to mål:

  • bestemme hvor følsom kroppen er for viral belastning;
  • bestemme hvor motstandsdyktig viruset er til medisinering og andre medisinske inngrep.

Funksjoner av Hepatittforskning

Serologiske studier er rettet mot å identifisere antigener og antistoffer i serum, men denne metoden er upålitelig. Derfor har forskere utviklet en metode for polymerasekjedereaksjon (PCR). Det tillater ikke bare å kvalitativt bestemme tilstedeværelsen av et virus (om enn), men også kvantitativt (i hvilken mengde antistoffer er tilstede i serum).

Før du samler blod, bør legen finne ut:

  • om pasienten tok narkotiske stoffer intravenøst;
  • om personen var en donor eller mottaker (til hvem blod ble infundert);
  • om pasienten gjennomgikk kirurgi
  • om pasienten har skadet hud
  • om en person er trygg på sin seksuelle partneres helse
  • var det noen kontakt med hepatitt b virus?

Ved akutt hepatitt kan et positivt resultat identifiseres 1-2 uker etter inkubasjon ved PCR.

Blodprøver for viral hepatitt B (HBV) tas når:

  • Diagnose av akutt hepatitt i:
    • inkubasjonsperiode (1-2 uker);
    • intens sykdomstid (3-4 uker);
    • Perioden for det tidlige stadiet av gjenoppretting.
  • Diagnose av CVH (kronisk viral hepatitt).
  • Når blandet med hepatitt.

Det tas også regelmessige analyser fra personer i fare, de inkluderer:

  • folk som har behov for hyppige blodtransfusjoner;
  • pasienter som gjennomgår regelmessige blodrensingsprosedyrer for nyresvikt
  • personer med aids eller hiv infeksjon;
  • gravide kvinner;
  • helsepersonell som kommer i kontakt med blod;
  • pasienter med symptomer på leversykdom.
  • for behandling av skrumplever, kreft og andre leversykdommer.

Forberedelse for den kvantitative analysen innebærer overholdelse av slike regler:

  • Ikke røyk 1 time før testen.
  • Ikke spis 4 timer før prosedyren;
  • Det er best å passere en kvantitativ analyse etter å ha passert kvalitativ;
  • Ikke drikk alkohol dagen før studien.

Effektiv terapi for sykdommen påvirker nedgangen i mengden av virus-DNA i serum. Seks måneder etter starten av behandlingen, bør mengden av viruset reduseres med 2-3 størrelsesordener. Hvis testresultatene ikke har endret seg over tid, eller tvert imot, blir de verre, så endres hele behandlingen nødvendigvis, og automatisk blir akutt hepatitt omdøpt til kronisk.

Hvis hepatittvirus-DNA kommer inn i kroppen, kan infeksjonen gå på to måter:

  • replikativ (utvikling av akutt eller kronisk hepatitt oppstår, som videre, uten medisinsk inngrep, fører til levercirrhose);
  • integrerende (utviklingen av asymptomatisk, inaktiv virusvogn, som fortsatt vil føre til skrumplever eller hepatocellulær karsinom).

Hvordan er blodoppsamlingsprosedyren? Legen trekker pasientens underarm med en rundkjede og setter inn en nål i en vene ved albuen, tar deretter blod til en sprøyte og helles i et spesielt reagensrør. Resultatene vil være klare om noen dager, avhengig av hvor pasienten tar analysen.

Materialet er serum, lymfocytter, hepatobial biopsier, som er plassert i et reagensrør med en godt skrudd hette. Men resultatet kan bli påvirket av forurenset materiale for prøvetaking, overeksponering av materialet (det oppbevares i opptil 24 timer ved en temperatur ikke over +4 ° C).

Kvantitative analysemetoder

Det finnes flere metoder for kvantitativ analyse, inkludert PCR, ELISA, biokjemi.

PCR (polymerasekjedereaksjon).

Dette er en overflate antigenproteinanalyse som utgjør en del av virusets ytre skall. Etter at viruspartiklene kommer inn i kroppen, begynner de intensiv reproduksjon på overflaten av leveren, ødelegger friske celler i orgelet. Nye molekyler slippes ut i blodet.

På denne bakgrunn undersøkes konsentrasjonen av serumantistoffer, og det bestemmes om det er en infeksjon med hepatitt B eller ikke.

Material for forskning er tatt på tom mage. PCR utføres i et apparat kalt en forsterker.

Algoritme for PCR analyse:

  1. For det første spaltes DNAet i to uavhengige kjeder ved å øke temperaturen til materialet for undersøkelse i forsterkeren.
  2. Materialet avkjøles litt med nitrogen. Primerer finner de nødvendige sekvensene i DNA-molekylet og går med i dem.
  3. Forlengelse er det tredje trinnet når to primere knytter seg til to tråder av DNA. Ved hjelp av DNA-polymerase-enzymet oppstår strekkingen av DNA-segmentet fra primeren som sluttet seg til det tidligere. På stedet i primerområdet i hver av DNA-kjedene dannes således en andre komplementær DNA-kjede.

I fremtiden blir disse trinnene gjentatt mange ganger, og i løpet av få timer utføres 35-45 sykluser, milliarder av kopier av den ønskede prøven dannes. Hvis det foreligger slike kopier, beregnes beløpet per 1 ml materiale for analyse.

I tillegg til PCR er det en ELISA (enzym-linked immunosorbent assay) metode. Det bestemmer ikke bare overflateantistoffene, men også antall antistoffer lokalisert inne og sammenkoblet med tidligere antigener.

biokjemi

En annen metode for kvantitativ analyse. Når et virus kommer inn i kroppen fra skadede leverenceller, blir enzymer frigjort i kroppen, hvis deres mengde er over normen, så kan vi snakke om infeksjon. I tillegg er det nødvendig å bestemme virusbelastningen (DNA-HBV), for å bestå leverfunksjonstester (for bilirubin med fraksjoner, ALT, AST, alkalisk fosfatase, gamma-GT). Det er obligatorisk å besøke en spesialist i smittsomme sykdommer, som om nødvendig sender pasienten til fibroelastometri, velger et behandlingsforløp.

Biokjemi - kvantitativ analyse

Real-time PCR

I denne metoden finner du søk etter kopier etter hver syklus, og ikke etter 35-45. Metoden fungerer på samme måte som PCR, det lar deg bestemme antall kopier i en prøve for forskning. Dermed blir analysetiden betydelig redusert, mens 100% garanteres.

Hepatitt B DNA-deteksjon

Bestemmelsen av mengden av hepatitt B-DNA er svært viktig, siden med en liten indikator er prognosen for sykdommen gunstigere enn hos en større. Konsentrasjonen av HBV DNA måles i kopier / ml eller meg / ml

1 ml / ml = 2,83 x 10 kopier / ml

Resultatene av denne analysen kan være som følger:

  • Virus DNA blir ikke detektert dersom det ikke er i kroppen eller konsentrasjonen er svært lav, 90 me / ml = 200 kopier / ml;
  • Virus-DNA er detektert i en mengde under konsentrasjonsnormen, 2 x 106 kopier / ml;
  • Virus-DNA er i gjennomsnitt ved 2 x 106-2 × 109 kopier / ml;
  • Virus-DNA er mer enn 2 × 109 kopier / ml, konsentrasjonen av antistoffer er høy, noe som indikerer sykdommens fremgang.

Hvis testresultatet er positivt, blir det diagnostisert:

Hvis resultatet er negativt, så:

  • det er ikke noe virus i kroppen;
  • Hepatitt B kan være tilstede under gjenopprettingsperioden (hvis tidligere tester var positive).

I sjeldne tilfeller indikerer en negativ DNA-test for hepatitt B-virus et raskt og ondartet sykdomsforløp.

Beslutningen om levering av analyse for viruset tar:

Kvantitativ analyse er obligatorisk ved diagnosen av sykdommen og må finne sted før starten av behandlingen. Men det må huskes at hepatitt B noen ganger er nært sammenflettet med hepatitt D, noe som kan skape ytterligere vanskeligheter med å utføre en slik analyse. Derfor bør du vurdere følgende alternativer for komplikasjoner:

  • Saminfeksjon - infeksjon skjer umiddelbart med to typer hepatitt B og D. Denne sykdommen er mye vanskeligere og smertefull. En slik sykdom har ingen kronisk form, fordi sykdommen for det meste er dødelig;
  • Superinfeksjon - Akutt hepatitt B forbinder den tidligere falt ned hepatitt D, i dette tilfellet strømmer sykdommen inn i kronisk med dårlig prognose.

Kvantitativ bestemmelse av hepatitt B-virus DNA

Bestemmelse av konsentrasjonen av HBV DNA i blodet (virusbelastning) med HB er målt i internasjonale enheter per ml (IE / ml), og kan måles i kopier / ml. Forholdet mellom kopi / IE i reagenspakker fra forskjellige produsenter er forskjellig - fra 1,5 til 8 (i gjennomsnitt - 5). For tiden regnes grensen mellom høy og lav virusbelastning av HBV til 2.000 IE / ml (10.000 eksemplarer / ml).

Bestemmelse av konsentrasjonen av HBV DNA i blodet brukes til å bestemme de forskjellige stadiene i kronisk infeksjon forårsaket av HBV (tabell 6) og for å overvåke effekten av antiviral terapi (tabell 7). Siden med CHB er fullstendig utryddelse av viruset praktisk talt umulig, er målet med behandling å redusere risikoen for uønskede utfall av sykdommen (levercirrhose eller hepatocellulær karsinom), som kan oppnås med vedvarende inhibering av virusreplikasjon. Det er derfor måling av konsentrasjonen av HBV DNA i blodet, som gjenspeiler aktiviteten av viral replikasjon, blir hovedkriteriet for å vurdere responsen på behandlingen.

Indikasjoner for undersøkelse

  • Personer med HBsAg;
  • pasienter med kronisk hepatitt B før starten av antiviral terapi og under den:
    • ved bruk av legemidler med lav genetisk barriere (lamivudin, telbivudin): ved 12, 24, 48 ukers behandling og deretter hver tredje måned med fortsatt behandling;
    • ved bruk av legemidler med høy genetisk barriere (entecavir, tenofovir) eller langsom utvikling av resistens (adefovir): ved 12, 48 ukers behandling og deretter hver 6. måned med fortsatt behandling;
    • HBV-pasienter som gjennomgår antiviral terapi med mistanke om virologisk tilbakefall testes 1 måned etter økning av konsentrasjonen av HBV-DNA uten å trekke tilbake det antivirale legemidlet.

Funksjoner av tolkning av resultater

Diagnose av HBV-infisert viral belastning i blodplasma sammen med andre markører tillater bestemmelse av stadium av kronisk infeksjon forårsaket av HBV (tabell 6).

Overvåking av effektiviteten av antiviral behandling av CHB En kvantitativ studie av HBV DNA i blodplasma er en obligatorisk studie før og under antiviral behandling for å vurdere effektiviteten. Avhengig av de oppnådde resultatene (Tabell 7) fortsetter terapien med det valgte stoffet, eller behandlingsregimet justeres.

OM MULIGE KONTRAINDIKASJONER ER DET NØDVENDIG FOR Å SAMLEDE MED SPESIALISTEN

Copyright FBUN Sentralforskningsinstituttet for epidemiologi, Rospotrebnadzor, 1998-2018

Studier av hepatitt B-viruset (ELISA og PCR)

Hepatitt B-virus "s" antigen (HBsAg)

Hepatitt B overflateantigen i serum er normalt fraværende.
Påvisning av hepatitt B overflateantigen (HBsAg) i serum bekrefter akutt eller kronisk infeksjon med hepatitt B-viruset.

Ved akutt sykdom detekteres HBsAg i serum i de siste 1-2 ukene av inkubasjonsperioden og de første 2-3 ukene i klinisk periode. Sirkulasjon av HBsAg i blodet kan være begrenset til noen dager, så du bør streve for en tidlig innledende undersøkelse av pasienter. ELISA-metoden gjør det mulig å oppdage HBsAg hos mer enn 90% av pasientene. Hos nesten 5% av pasientene oppdager de mest sensitive undersøkelsesmetodene ikke HBsAg, i slike tilfeller er etiologien for viral hepatitt B bekreftet ved tilstedeværelse av anti-HBcAg JgM eller PCR.

Konsentrasjonen av HBsAg i serum i alle former for hepatitt B-alvorlighetsgrad ved sykdommens høyde har et betydelig spekter av svingninger, men det er et visst mønster: I den akutte perioden er det et invers forhold mellom serum HBsAg og alvorlighetsgrad av sykdommen.

Høye konsentrasjoner av HBsAg er mer vanlige i milde og moderate former av sykdommen. I alvorlige og ondartede former er konsentrasjonen av HBsAg i blodet ofte lav, og i 20% av pasientene med alvorlig form og i 30% med et malignt antigen i blodet, kan det ikke oppdages i det hele tatt. Utseendet på denne bakgrunn hos pasienter med antistoffer mot HBsAg betraktes som et ugunstig diagnostisk tegn; Det er bestemt i ondartede former for hepatitt B.

I den akutte løpet av hepatitt B, reduseres konsentrasjonen av HBsAg i blodet gradvis til fullstendig forsvunnelse av dette antigenet. HBsAg forsvinner hos de fleste pasienter innen 3 måneder fra begynnelsen av akutt infeksjon.

En reduksjon i konsentrasjonen av HBsAg med mer enn 50% ved slutten av den tredje uken av den akutte perioden, som regel, indikerer en tett fullføring av infeksjonsprosessen. Vanligvis hos pasienter med høy konsentrasjon av HBsAg ved sykdommens høyde, det oppdages i blodet i flere måneder.
Hos pasienter med lave konsentrasjoner av HBsAg forsvinner mye tidligere (noen ganger flere dager etter sykdommens begynnelse). Generelt varierer tidspunktet for deteksjon av HBsAg fra flere dager til 4-5 måneder. Maksimal deteksjonsperiode for HBsAg med en jevn løpet av akutt hepatitt B, overstiger ikke 6 måneder fra sykdomsbegyndelsen.

HBsAg kan finnes hos friske mennesker, som regel i profylaktiske eller utilsiktede studier. I slike tilfeller blir andre markører av viral hepatitt B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG og anti-HBeAg undersøkt, og leverfunksjonen studeres.

Når negative resultater trengs, gjentas studier på HBsAg.
Hvis gjentatte blodprøver i mer enn 3 måneder avslører HBsAg, klassifiseres denne pasienten som en kronisk pasient med viral hepatitt B.
Tilstedeværelsen av HBsAg er ganske vanlig. Det er mer enn 300 millioner luftfartsselskaper i verden, og i vårt land er det rundt 10 millioner transportører.
Oppsigelse av HBsAg-sirkulasjon med etterfølgende serokonversjon (dannelse av anti-HBs) indikerer alltid gjenoppretting - sanering av kroppen.

En blodprøve for HBsAg brukes til følgende formål:

  • for diagnostisering av akutt hepatitt B:
    • inkubasjonsperiode;
    • akutt sykdom;
    • tidlig utvinning;
  • for diagnostisering av kronisk viral hepatitt B;
  • for sykdommer:
    • vedvarende kronisk hepatitt;
    • levercirrhose;
  • for screening og identifisering av pasienter i risikogrupper:

  • pasienter med hyppige hemotransfusjoner;
  • pasienter med kronisk nyresvikt
  • pasienter med flere hemodialyser
  • pasienter med immunsviktstilstander, inkludert AIDS.
  • Evaluering av forskningsresultater

    Resultatene av studien uttrykkes kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer mangel på serum HBsAg. Et positivt resultat - identifisering av HBsAg indikerer en inkubasjon eller akutt periode med akutt viral hepatitt B, så vel som hos kronisk viral hepatitt B.

    Antistoffer mot nukleært antigen av hepatitt B-virus JgG (anti-HBcAg JgG)

    Normalt er serum anti-HBcAg fraværende i serum.
    Hos pasienter med anti-HBcAg forekommer JgG i den akutte perioden med viral hepatitt B og vedvarer hele livet. Anti-HBcAg JgG er den ledende markøren for overført HBV.

    Blodprøver for anti-HBcAg JgG brukes til å diagnostisere:

  • kronisk viral hepatitt B i nærvær av HBs antigen i serumet;
  • viral hepatitt B
  • Evaluering av forskningsresultater

    Resultatet av studien er uttrykt kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet av serum anti-HBcAg JgG. Et positivt resultat - identifiseringen av anti-HBcAg JgG indikerer akutt infeksjon, konvalescens eller tidligere overført viral hepatitt B.

    Hepatitt B-virus "e" antigen (HBeAg)

    Normalt er HBeAg i serum fraværende.
    HBeAg kan detekteres i serum hos de fleste pasienter med akutt viral hepatitt B. Det forsvinner vanligvis i blodet før HBs-antigenet. Et høyt nivå av HBeAg i de første ukene av sykdommen eller påvisning av det i mer enn 8 uker gir grunn til å mistenke en kronisk infeksjon.

    Dette antigenet oppdages ofte i kronisk aktiv hepatitt av viral etiologi. Av spesiell interesse for definisjonen av HBeAg er det faktum at dets deteksjon karakteriserer den aktive replikative fase av den smittefarlige prosessen. Det er fastslått at høye konsentrasjoner av HBeAg korresponderer med høy DNA-polymeraseaktivitet og karakteriserer den aktive replikasjon av viruset.

    Tilstedeværelsen av HBeAg i blodet indikerer sin høye infektivitet, dvs. Tilstedeværelsen av aktiv hepatitt B-infeksjon i kroppen blir undersøkt, og detekteres kun i nærvær av HBs-antigen i blodet. Hos pasienter med kronisk aktiv hepatitt brukes antivirale legemidler kun når HBeAg påvises i blodet. HBeAg - antigen - en markør for den akutte fasen og replikasjon av hepatitt B-viruset.

    En blodprøve for tilstedeværelse av HBe-antigen brukes til å diagnostisere:

  • inkubasjonsperiode for viral hepatitt B;
  • prodromal periode av viral hepatitt B;
  • akutt periode med viral hepatitt B;
  • kronisk vedvarende viral hepatitt B.
  • Evaluering av forskningsresultater

    Resultatet av studien er uttrykt kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer mangel på serum HBeAg. Et positivt resultat - detektering av HBeAg indikerer en inkubasjon eller akutt periode med akutt viral hepatitt B eller den fortsatte replikasjonen av viruset og infeksjonen hos pasienten.

    Antistoffer mot antigenet "e" av hepatitt B-viruset (anti-HBeAg)

    Anti-HBeAg i serum er normalt fraværende. Utseendet til anti-HBeAg-antistoffer indikerer vanligvis intensiv fjerning fra kroppen av hepatitt B-viruset og liten infeksjon av pasienten.

    Disse antistoffene opptrer i den akutte perioden og varer ved opptil 5 år etter infeksjonen. Ved kronisk vedvarende hepatitt er anti-HBeAg funnet i pasientens blod sammen med HBsAg. Serokonversjon, dvs. Overgangen av HBeAg til anti-HBeAg, med kronisk aktiv hepatitt, er oftere prognostisk gunstig, men den samme serokonversjonen forbedrer ikke prognosen for alvorlig cirrotisk levertransformasjon.

    Blodprøver for tilstedeværelse av anti-HBeAg brukes i følgende tilfeller i diagnosen av viral hepatitt B:

  • etablere den første fasen av sykdommen;
  • akutt infeksjon;
  • tidlig utvinning;
  • rekonvalesens;
  • sen stadium gjenoppretting.
  • diagnose av nylig overført virus hepatitt B;
  • diagnose av kronisk vedvarende viral hepatitt B.
  • Evaluering av forskningsresultater

    Resultatet av studien er uttrykt kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet av antistoffer mot HBeAg i serum. Et positivt resultat er deteksjon av antistoffer mot HBeAg, noe som kan indikere begynnelsestrinnet av akutt viral hepatitt B, den akutte infeksjonsperioden, tidlig stadium av konvalescens, konvalescens, nylig overført viral hepatitt B eller vedvarende viral hepatitt B.

    Kriteriene for tilstedeværelse av kronisk hepatitt B er:

  • detektere eller periodisk detektere HBV DNA i blodet;
  • kontinuerlig eller periodisk økning i aktiviteten av ALT / AST i blodet;
  • Morfologiske tegn på kronisk hepatitt ved histologisk undersøkelse av leverbiopsi.
  • Deteksjon av hepatitt B-virus ved PCR (kvalitativt)

    Hepatitt B-virus i blodet er normalt fraværende.
    Den kvalitative bestemmelsen av hepatitt B-viruset ved PCR-metoden i blodet gjør det mulig å bekrefte tilstedeværelsen av viruset i pasientens kropp og derved fastslå sykdommens etiologi.

    Denne studien gir nyttig informasjon for diagnostisering av akutt viral hepatitt B i inkubasjon og tidlig utviklingsstadier av sykdommen, når pasientens viktigste serologiske markører i blodet kan være fraværende. Serum viralt DNA påvises hos 50% av pasientene i fravær av HBeAg. Den analytiske følsomheten til PCR-metoden er ikke mindre enn 80 viruspartikler i 5 μl, den siste DNA-deteksjonsprøven, spesifisitet - 98%.

    Denne metoden er viktig for å diagnostisere og overvåke løpet av kronisk HBV. Ca 5-10% av tilfeller av cirrhosis og andre kroniske leversykdommer er forårsaket av kronisk bærer av hepatitt B-virus. Markører av aktiviteten til slike sykdommer er tilstedeværelsen av HBeAg og DNA av hepatitt B-virus i blodet.

    PCR-metoden lar deg bestemme DNA fra hepatitt B-viruset i blodet både kvalitativt og kvantitativt. Det fastlagte fragmentet i begge tilfeller er den unike DNA-sekvensen av genet for det strukturelle protein i hepatitt B-viruset.

    Hepatitt B-virus DNA-deteksjon i biomaterialer ved bruk av PCR er nødvendig for:

  • oppløsning av tvilsomme serologiske testresultater;
  • påvisning av det akutte stadium av sykdommen sammenlignet med tidligere infeksjon eller kontakt;
  • kontrollere effekten av antiviral behandling.
  • Forsvinnelsen av hepatitt B-virus DNA fra blodet er et tegn på effektiviteten av behandlingen

    Påvisning av hepatitt B-virus ved PCR (kvantitativ)

    Denne metoden gir viktig informasjon om intensiteten av sykdomsutviklingen, effektiviteten av behandlingen og utviklingen av resistens mot aktive stoffer.
    For diagnostisering av viral hepatitt ved PCR i serum, brukes testsystemer, hvor følsomheten er 50-100 eksemplarer i prøven, som tillater deteksjon av viruset i en konsentrasjon på 5 x 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopier / ml. PCR i viral hepatitt B er absolutt nødvendig for å bedømme viral replikasjon.

    Serum viralt DNA påvises hos 50% av pasientene i fravær av HBeAg. Serum, lymfocytter og hepatobioptater kan tjene som materiale for å detektere DNA fra hepatitt B-viruset.

    • Vurdering av nivået av viremia er som følger:
    • mindre enn 2,10 ^ 5 kopier / ml (mindre enn 2,10 ^ 5 IE / ml) - lav viremi;
    • fra 2,10 ^ 5 kopier / ml (2,10 ^ 5 IE / ml) til 2,10 ^ 6 kopier / ml (8,10 ^ 5 IE / ml) - medium viremi;
    • mer enn 2,10 ^ 6 kopier / ml - høy viremi.

    Det er et forhold mellom utfallet av akutt viral hepatitt B og konsentrasjonen av HBV DNA i pasientens blod. Med lavt nivå av viremia er prosessen med kronisering av infeksjonen nær null, med gjennomsnitt - prosessen er kronet hos 25-30% av pasientene, og med høyt nivå av viremia blir akutt viral hepatitt B oftest kronisk.

    Indikasjonene for behandling av kronisk HBV interferon-alfa bør betraktes som tilstedeværelse av markører med aktiv viral replikasjon (deteksjon av HBV HBV, HBeAg og HBV DNA i serum i løpet av de foregående 6 månedene.).

    Kriteriene for evaluering av effektiviteten av behandlingen er forsvinden av HBeAg og HBV DNA i blodet, som vanligvis ledsages av normalisering av transaminase nivåer og langvarig remisjon av sykdommen, HBV DNA forsvinner fra blodet ved den femte behandlingsmåneden hos 80% av pasientene. Å redusere nivået av viremia med 85% eller mer innen tredje dag fra starten av behandlingen sammenlignet med baseline er et raskt og forholdsvis nøyaktig kriterium for å forutsi effektiviteten av behandlingen.


    Relaterte Artikler Hepatitt