Bruk av PCR-diagnostikk

Polymeraskjedereaksjon (PCR) i molekylærbiologi er en eksperimentell metode for å oppdage virus. Det lar deg øke konsentrasjonen av bestemte nukleinsyrefragmenter (DNA) i prøver av biologisk materiale, noe som gjør det mulig å bestemme dem (gjenkjenne) og telle.

Analysen utføres som følger. Genetisk materiale (en blodprøve), som potensielt kan inkludere det ønskede genet, blir introdusert i røret. Det er også plassert primere - kjemisk syntetiserte segmenter av en liten lengde av ønsket gen.

DNA- eller RNA-polymerase er også tilsatt til karet, det er i stand til å lineere opp en nukleinsyrekjede som er helt identisk med originalen. Den resulterende sammensetning injiseres og et sett med fire fri nukleotider - et spesielt byggemateriale for RNA eller DNA, hvorav den ene inneholder radioaktive fosforpartikler.

Den resulterende blanding oppvarmes til 95-96 ° C, og derfor er to DNA-spiraler, som normalt er sammenflettet, vevd. Deretter avkjøles legemidlet, hvorpå primene selv fester seg til den ønskede regionen av virusgenomet, og hindrer at RNA (eller DNA) danner en dobbelt helix igjen.

Under kjøleprosessen søker polymerasen etter en fri nukleotidkjede. For funksjonen av dette enzymet er det nødvendig en enkelt kjede av nukleotider. Siden polymerase glir langs DNA-kjeden (som en ring på et tau), er den ikke i stand til å arbeide på en dobbelt helix.

Etter dette utføres en gjentatt varmesyklus som skyldes hvilke kjeder av nukleotider som er separert. Ved hver av disse syklusene av PCR øker mengden i prøven av det ønskede hepatittgenet eksponentielt, og resten av det genetiske materialet blir produsert (vokser) lineært.

Etter rensing av løsningen fra nukleotidrester og separasjon ved elektroforese av DNA-kjeder av molekylvektsparameteren, kan man lett bestemme om det er et ønsket gen i prøven under studie eller ikke.

Fordeler med PCR

Laboratorietesting ved hjelp av PCR tillater enda mer informasjon enn tilstedeværelsen av virus-RNA. Ved å bestemme parameteren for nivået av radioaktiv stråling, er det mulig å identifisere hvor mye genetisk materiale som opprinnelig var inneholdt i prøven under studien. I tilfelle av hepatitt, bestem indikatoren for nivået av viral belastning.

En annen fordel ved denne metoden er den meget høye følsomhetsgrad av CR-reaksjonen. Det er mye høyere enn klassiske metoder for å oppdage virus. Ideelt sett, for å identifisere ønsket gen, for PCR, er bare ett virus i prøven tilstrekkelig.

I tillegg er PCR helt spesifikt. Dens primere er utformet på en slik måte at de stemmer fullt overens med de unike områdene av de ønskede gener som ingen annen sekvens har. Som fingeravtrykk er unike, er det unike nukleotidsekvenser i hvert gen.

Kvalitativ analyse av PCR

Kvalitativ analyse lar deg bare identifisere tilstedeværelsen av et virus i blodet. Denne testen skal utføres for alle pasienter i hvilke antistoffer mot hepatitt C ble funnet i blodet. Det kan resultere i bare én av to verdier: "detektert" eller "ikke oppdaget". I en sunn person skal normen (referanseverdi) "ikke oppdages".

Det er en spesiell tolkning av slike resultater av kvalitativ forskning:

Resultatet er "oppdaget". Dette betyr at et fragment av RNA som er spesifikt for hepatitt C-viruset ble funnet i den analyserte prøven av biologisk materiale tatt. Det er derfor et faktum at pasienten er infisert med hepatitt C-viruset. Hvis resultatet av høyverdig PCR er "detektert", indikerer dette at viruset multipliserer og på denne tiden smitter det nye leverceller i kroppen.
Resultatet er "ikke oppdaget." En slik dom indikerer at i den analyserte prøven av biologisk materiale som er oppnådd i dette laboratoriet, ble det ikke funnet noe fragment av RNA som er spesifikt for hepatitt C-viruset. Alternativt var konsentrasjonen av RNA av patogeninfeksjonen i denne prøven under sensitivitetsgrensen for testen.

I den akutte fasen av RNA i hepatitt C-viruset kan slike kvalitative studier ved PCR-metoden detekteres allerede etter 1-2 uker umiddelbart etter kroppsinfeksjon, det vil si lenge før utseendet av antistoffer mot hepatitt selv.

Unøyaktige testresultater fra denne studien kan fås ved å:

forurenset biomateriale;
tilstedeværelsen av heparin i pasientens blod;
Tilstedeværelsen i prøven av kjemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) som påvirker de ulike komponentene i PCR.

For å gjennomføre en kvalitativ analyse av PCR, er det ikke nødvendig med spesiell forberedelse av pasienten for studien. Venøst blod brukes som et materiale.

Evaluering av resultater

HPR-test av høy kvalitet har en viss grad av følsomhet, og avhengig av nøyaktigheten av forskningen og nivået på utstyret i laboratoriet kan variere fra 10 til 500 IE / ml.

Dette betyr at hvis viruset i blodprøven er tilstede i en meget lav konsentrasjon (mindre enn terskelverdien av følsomheten til dette laboratoriet), kan resultatet bestemmes som "ikke detektert" hos en pasientpatient. På grunn av dette, når det utføres en kvalitativ analyse av PCR med lavt nivå av viremia (lav viruskonsentrasjon), for eksempel for pasienter som gjennomgår antiviral terapi, er det svært viktig å kjenne følsomhetsgrensen for dette diagnostiske systemet.

Varianter av diagnostiske systemer

For å kontrollere den virologiske responsen, anbefales det å bruke diagnostiske systemer med en følsomhetsgrense på minst 50 IE / ml for antiviral behandling. Disse kriteriene er oppfylt, for eksempel med Cobas Ampicolor HCV-test-analysatorer (nøyaktig til 50 IE / ml), samt RealBest HCV RNA (med følsomhet på 15 IE / ml).

I henhold til WHO-anbefalinger, for å etablere en endelig diagnose av hepatitt C, er det nødvendig å basere seg bare på tre ganger deteksjon av C-virus-RNA i pasientens serumprøver, uten andre varianter av hepatittmarkører.

I tillegg til PCR-metoder, brukes en TMA-analyse (transkripsjonal amplifikasjonsmetode) til å detektere HCV RNA hos pasienter. Den har den beste følsomhetsgrensen (5-10 IE / ml), men i vårt land er en slik testmetode ikke særlig vanlig.

Utvalg av detekterbare virusmodifikasjoner

En slik kvalitativ bestemmelse i serum av tilstedeværelsen av RNA i hepatitt C-viruset gjør det mulig å bestemme flere genotyper av dette viruset. For tiden vet vitenskapen mer enn seks genotyper av dette viruset, så vel som om 10 subtyper av denne sykdommen.

I vårt land er vanlige virus 1, 2, 3 genotyper. Laboratorier kan oppdage følgende genotyper: 1a og 1b, 2a, 2b og 2c, samt 3, 4, 5a og 6, uavhengig av undertyper. For alle virusmodifikasjoner er deteksjonsspecifikiteten 100%.

PCR kvantitativ analyse

Ved hjelp av en kvantitativ PCR-test bestemmes nivået av konsentrasjon av hepatittviruset i blodprøver (virusbelastning). Denne testen for viremia (viruskonsentrasjon) lar deg bestemme antall enheter av et bestemt genetisk materiale (det mest virale RNA) som detekteres i en viss mengde. I dette tilfellet bestemme konsentrasjonen i 1 ml, som tilsvarer 1 cu. cm.

De kvantitative parametrene til analysen er uttrykt i figurer, for dette formål brukes internasjonale enheter (IE) per ml (ml), referert til som IE / ml, som måleenheter. Nå i noen laboratorier kan mengden av virus bestemmes i andre enheter: Antall kopier per ml er angitt som kopier / ml.

Datoer. For hepatitt C, gjøres en slik kvantitativ analyse av PCR umiddelbart før starten av behandlingen. Deretter 1., 4., 12. og 24. uke. Evaluering på 12. uke er indikativ, det gjør det mulig å bestemme effektiviteten av terapien.
Forberedelse for analyse. For å utføre en kvantitativ analyse av PCR, er det ikke nødvendig med spesiell forberedelse av pasienten til studien. En halv time før prøvetaking bør ikke røyke. Venøst blod brukes som laboratoriemateriale.

Evaluering av resultater

For ulike laboratorietestsystemer er det forskjellige konverteringskvoter for denne indikatoren i IE / ml. I gjennomsnitt tar de en konverteringsparameter, der 4 kopier / ml = 1 IE / ml. Det vil si at hvis laboratoriet gir resultatet av PCR-analyse 2,4 * 10 6 kopier / ml, så skal denne parameteren deles inn i 4 og vi får 6 * 10 5 IE / ml.

En belastning på 800.000 IE / ml regnes som høy, noe som tilsvarer omtrent 3.000.000 eksemplarer / ml. Lav viremia, ifølge noen forfattere, tilsvarer parametrene for kvantitativ PCR under 400 000 IE / ml.

Som resultat av den kvantitative testen kan de endelige resultatene ikke leveres i form av en digital verdi, men: "under måleområdet" eller "ikke detektert".

Vurdering: "under måleområdet." Dette antyder at den kvantitative testen ikke kunne oppdage hepatitt C viral RNA, men selve viruset er tilstede i kroppen i svært lave konsentrasjoner. Dette fremgår av en ytterligere kvalitativ test, som bekrefter faktumet av tilstedeværelsen av viruset.
Vurdering: ikke oppdaget. Dette resultatet indikerer at den kvantitative testen ikke ble funnet i prøven av virus-RNA.

Parameteren for viral belastning bestemmer først og fremst graden av infeksiøsitet av sykdommen, nivået av "infeksjon" av pasienten. Jo høyere pasientens viruskonsentrasjon er, jo større er sannsynligheten for at den overføres til andre mennesker. For eksempel, under samleie med en syke person, eller vertikalt. Denne kvantitative indikatoren bidrar også til å bestemme effekten av behandlingen av pasienten.

Å gjennomføre en kvantitativ analyse av KKP er viktig for antiviral terapi, vurderer suksess og planlegger varighet på kurset. Med en rask respons fra kroppen til behandling og en lav grad av viremi, kan varigheten av behandlingen forkortes.

Hvis den kvantitative PCR-parameteren reduseres sakte, bør antiviral terapi forlenges eller modifiseres. Hvis nivået av viral belastning er lav, er dette en gunstig faktor for terapi, men hvis forhøyet, er metoden for behandling som brukes, ineffektiv og legemidlene eller metoder for deres bruk bør endres.

Kostnaden for blodprøving og PCR for hepatitt C

Hepatitt C er en inflammatorisk patologi der leverceller påvirkes. Sykdommen utvikler seg som følge av penetrering av hepatitt C-viruset (HVC) i menneskekroppen.

Formen av sykdommen kan være akutt eller kronisk.

Ofte er symptomene på den akutte patologien hos de fleste pasienter fraværende, noen ganger er sykdommen ledsaget av smertefulle opplevelser i magen, redusert ytelse, økt tretthet, tap av appetitt, en mørk skygge av urin, misfarging av avføring, yellowness av huden og slimhinner, ledsmerter. Slike symptomer oppstår vanligvis 6-8 uker etter infeksjon, men kan oppstå etter seks måneder.

Ved utvikling av slike fenomener er det nødvendig å kontakte en medisinsk institusjon og gjennomgå en omfattende undersøkelse av hele organismen. Som en del av en medisinsk undersøkelse utføres en blodprøve for hepatitt C.

I dag, ved hjelp av moderne diagnostiske teknikker, kan denne patologien identifiseres i begynnelsen av utviklingen, noe som øker sjansene for en fullstendig kur av sykdommen.

Følgende grupper av mennesker er pålagt å teste for hepatitt C:

kvinner i perioden med å bære et barn;
personer med tegn på hepatitt;
medisinsk personale;
potensielt organ og blodgivere;
narkomaner, HIV-smittede personer, promiskuøse intime liv.

Liste over nødvendige studier

Hvilke tester skal jeg ta for hepatitt C? For å nøyaktig diagnostisere sykdommen, identifisere årsakene og bestemme tilstanden til leveren parenchyma, er følgende studier påkrevd:

generell urin og blodprøver;
biokjemisk analyse av blod;
PCR analyse;
blodprøve for påvisning av antistoffer mot HVC;
en blodprøve for eksisterende antistoffer mot sine egne leverceller;
leverbiopsi.

Dekoding av blodprøver for hepatitt C utføres av en spesialist. Vurder hver metode for forskning mer detaljert, så vel som vi vil forstå hvilken analyse av hepatitt C som er mest nøyaktig.

Generell analyse

Når du utfører en generell blodprøve for hepatitt C, kan du vurdere pasientens tilstand. Endringer i blodparametere blir ikke oppfattet som spesifikke symptomer på hepatitt, men med denne sykdommen er det slike forstyrrelser som:

redusert konsentrasjon av hemoglobin, blodplater og leukocytter;
øker innholdet av lymfocytter;
blodpropp er brutt
erytrocytt sedimenteringshastighet (ESR) øker.

Generell analyse av urin gjør det mulig å oppdage urobelin i dets sammensetning - et gallepigment som oppstår i urinen som følge av nedsatt leverfunksjon.

Biokjemisk analyse

Biokjemisk analyse av blod i hepatitt C gjør det mulig å identifisere slike lidelser som:

forhøyede nivåer av leverenzymer (alanintransaminase - ALT og aspartataminotransferase - AST), som kommer inn i blodet når hepatocytter er skadet. I en normal tilstand bør disse indikatorene for menn ikke være over 37 IE / l, for kvinner - ikke høyere enn 31 IE / l. En økt konsentrasjon av ALT og AST i asymptomatisk hepatitt C er ofte det eneste symptomet på denne sykdommen. I tillegg øker blodglutamyltranspeptidase alkalisk fosfatase (normalt ikke høyere enn 150 IE / l).
Bilirubininnholdet (både generelt og direkte) i blodet overskrides. Hvis nivået av gul pigment i serum overskrider 27-34 μmol / l, oppstår gulsott (opptil 80 μmol / l i mild form, 86-169 μmol / l - i moderat, over 170 μmol / l - i alvorlig form).
Nivået på albumin er senket, konsentrasjonen av gamma globuliner, tvert imot, økes. Gamma globuliner består av immunglobuliner - antistoffer som beskytter kroppen mot sykdomsfremkallende stoffer.
økt konsentrasjon av triglyserider i blodet.

PCR-test

Ved hjelp av PCR-teknikken er det mulig å diagnostisere sykdomsfremkallende middel. Utførelse av denne analysen gjør det mulig å oppdage et virus i blodet, selv om mengden er minimal. PCR-analysen for hepatitt C gjør det mulig å bestemme den eksisterende infeksjonen i blodet allerede etter 5 dager fra infeksjonstidspunktet, det vil si lenge før antistoffer opptrer.

Hvis resultatet av en blodprøve for hepatitt C ved PCR er positiv, indikerer dette forekomsten av en aktiv infeksjon i kroppen. Ved hjelp av denne metoden kan du gjennomføre en kvalitativ og kvantitativ studie av HVC RNA.

I løpet av den kvalitative analysen av PCR for hepatitt C, er det mulig å oppdage et eksisterende virus i menneskekroppen.

Denne diagnostiske prosedyren utføres hvis anti-HVC detekteres i blodet.

Dekryptering av analysen for hepatitt C inneholder informasjon om at en infeksjon enten har blitt detektert eller ikke oppdaget i kroppen. Normalt finnes det ingen patologiske stoffer i blodet.

Hvis hepatitt C-testen er positiv, betyr det at patogenet kontinuerlig deler og infiserer leverceller.

Resultatene av denne analysen kan være upålitelige, det er mulig i følgende tilfeller:

forurenset biomaterial brukt
i nærvær av heparin i blodet;
i nærvær av kjemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) i det studerte biomaterialet, som påvirker elementene i PCR.

Kvantitativ analyse av hepatitt C gir informasjon om mengden av virus som er inneholdt i blodet, det vil si, bestemmer virusbelastningen. Med dette konseptet menes volumet av HVC RNA tilstede i blodet (for eksempel i 1 ml). I tolkningen av den kvantitative analysen for hepatitt C, uttrykkes denne verdien i digital ekvivalent, målt i IE / ml.

Blod for PCR for hepatitt C er tatt før terapeutiske tiltak. Etter analysen utføres på 1, 4, 12 og 24 uker. Studien i uke 12 er veiledende og utføres for å vurdere effektiviteten av medisinske prosedyrer.

Hvis testen for hepatitt C under graviditeten er positiv og virusverdiene overskrides, øker risikoen for overføring av patogener fra den syke mor til barnet flere ganger. Også med forhøyede verdier av viral belastning er implementeringen av terapeutiske tiltak vanskelig.

I følge transkripsjonen av tester for hepatitt C, hvis virusbelastningsverdiene overskrider 800.000 IE / ml, så er det høyt. Hvis tallene er under 400 000 IE / ml, anses nivået av virusbelastning som lav.

Analyse av hepatitt C ved PCR regnes som den mest nøyaktige og har flere fordeler over andre forskningsalternativer, nemlig:

direkte diagnose av sykdomsfremkallende middel. Ved utførelse av tradisjonelle studier bestemmes det av tilstedeværelsen av proteinmarkører som er avfallsprodukter av patogener. Dette indikerer bare at infeksjonen er tilstede i blodet. Ved testing for hepatitt C ved PCR, er det mulig å bestemme typen patogen av farlig patologi.
spesifisitet av teknikken. Under denne prosedyren bestemmes et unikt DNA-område i biomaterialet som tilsvarer bare en type patogen. Dette minimerer sannsynligheten for falske resultater.
høy følsomhet. Når du utfører PCR-analyse, kan du oppdage minimumsmengden av virus. Dette er viktig hvis betingede patogene stoffer identifiseres som bare utgjør en trussel hvis nivået øker.
Ved bruk av denne teknikken i en prøve av biomaterialet, kan flere patogener detekteres samtidig.
kan oppdage skjulte infeksjoner. I tillegg tillater analysen deg å diagnostisere patogene mikroorganismer som lever i celler og har høy antigenvariabilitet.

Hvis testresultatene er positive, blir spor av viruset funnet i biomaterialet, da nettverket har en infeksjon i kroppen.

En negativ PCR-analyse for hepatitt C betyr at det ikke er spor av infeksjon i biomaterialet.

Immunologisk studie

Denne metoden lar deg identifisere antistoffer mot alle typer hepatittvirus, samt antistoffer mot leverenes celler i din egen kropp, og utseendet bidrar til utviklingen av autoimmun hepatitt.

Resultatene som ble oppnådd i løpet av studien er relevante i 3 måneder, da skal du donere blod til hepatitt C.

Det er også mulig å utføre en ekspresstudie ved hjelp av spesielle teststrimler. Denne analysen gjør det mulig å bestemme antistoffer mot virus C i sammensetningen av blod og spytt. Denne prosedyren kan utføres uavhengig, hjemme.

Leverbiopsi

For å utføre en slik analyse blir et element av leveren parenchyma tatt og en histologisk undersøkelse av det oppnådde biomaterialet utføres. Dette lar deg vurdere tilstanden til kroppen: å identifisere inflammatorisk, nekrotisk foci, stadium av fibrose og så videre.

I dag brukes tester som erstatter histologisk analyse av hepatisk parenkyma.

For å vurdere stadiet av leverskade og intensiteten av betennelsesprosessen, brukes spesifikke venøse blodbiomarkører. Ved hjelp av FibroTest kan du vurdere graden av vekst av fibrøst vev.

Når du utfører Actitest kan du få informasjon om intensiteten av patologiske prosesser i leveren parenchyma. Bruke Steatototesta kan diagnostisere fettvev i leveren og vurdere omfanget av denne prosessen. Fibromax består av alle ovennevnte tester og kan inkludere noen andre studier.

Forberedelse for studien

Hvilke tester blir tatt for hepatitt C og hvordan vi har funnet ut denne typen forskning. Det er like viktig å vite hvordan å forberede seg på analysen.

For å oppnå pålitelige resultater, anbefales det å overholde følgende krav:

Hepatitt C-tester må tas om morgenen, på tom mage. Siste gang mat skal forbrukes minst 8 timer før studien.
Biomaterialet kan samles om dagen eller om kvelden. I dette tilfellet er det viktig at minst 5-6 timer passerer mellom det siste måltidet og analysen.
Før du donerer blod for hepatitt C, bør te, kaffe, juice eller andre drikker kasseres, bare vann er tillatt.
48 timer før studien er det nødvendig å utelukke bruk av fettstoffer, stekt mat og alkoholholdige drikker.
i minst en time før analysen må du avstå fra å røyke.
Analyse bør ikke utføres umiddelbart etter ultralyd, instrumental, røntgenundersøkelse, massasje eller fysioterapi.
en dag før gjennomføringen av studien er det nødvendig å utelukke bruk av medisinering og intensiv fysisk aktivitet. Emosjonell stress er også kontraindisert.
Det anbefales å bruke 15 minutter før du utfører studien i en rolig tilstand.

Gjennomføring av blodoppsamlingsprosedyren

Hvor blir testet for hepatitt C? Samlingen av biomateriale for videre forskning utføres i laboratoriet til en medisinsk institusjon eller hos pasientens hjem.

Blod fra en blodåre tas som følger:

Ved hjelp av en spesiell tourniquet innpakket rundt pasientens underarm, blir den venøse blodstrømmen stoppet. Takket være slike manipulasjoner blir blodårene fylt med blod og vil bli mer synlige, noe som i stor grad vil lette prosessen med å sette inn nålen.
området av huden hvor nålen skal settes inn, behandles forsiktig med alkohol eller alkoholholdig væske.
En nål forsynes forsiktig inn i en blodåre, så er et testrør festet til det, spesielt utviklet for å samle blod.
Umiddelbart etter at nålen er satt inn i venen, blir klemmen fjernet fra pasientens arm.
Etter at blodvolumet som er nødvendig for analysen er blitt samlet, blir nålen forsiktig fjernet fra venen.
en steril bomullspinne eller gasbind med fuktighet må påføres injeksjonsstedet.
For å forhindre forekomst av et hematom, bør tampongen presses med en viss innsats mot nålinnsatsområdet, bøy armen ved albueforbindelsen og hold den i denne posisjonen i flere minutter. Slike handlinger vil også bidra til å stoppe blodet raskere.

Forutsatt at teknikken for intern administrasjon er god, er denne prosedyren helt trygg og forårsaker ikke smertefulle opplevelser.

I sjeldne tilfeller kan blodårene svulme etter blodsamlingen. Dette fenomenet kalles "flebitt". En komprimering (ikke varm) vil bidra til å løse problemet, det bør brukes på hovne områder av huden flere ganger om dagen.

Visse problemer kan også oppstå hvis det er en blødningsforstyrrelse. Ta aspirin, warfarin og andre blodfortynnere kan føre til blødning. Det er derfor før du utfører analysen, er det nødvendig å nekte å ta medisiner. Hvis behandlingen ikke kan kanselleres, bør du informere spesialisten.

Datoer og priser

Hvor mye blir testet for hepatitt C? Resultatene av en blodprøve for hepatitt kan være klar om noen timer, og om noen dager (som regel ikke mer enn 8 dager). Varigheten av forberedelsen av resultatene avhenger av typen virus og den valgte analysemetoden. Hurtigere er studien utført med PCR-metoden. Resultatene i dette tilfellet vil være klare på bare noen få timer.

Hvor mye koster en hepatitt C-test? Avhengig av klinikken og kompleksiteten av studien, kan prisen på prosedyren variere fra 400 til 11 000 rubler.

Du bør være oppmerksom på at det kan ta flere uker å danne en tilstrekkelig mengde antistoffer mot HVC. Derfor, i et tidlig stadium i utviklingen av patologi, kan resultatet av en studie være falsk-negativ.

I tillegg er det mulig å oppnå upålitelige data ved analyse av dårlig kvalitet og brudd på transportbetingelsene for det oppnådde biomaterialet (prøver må leveres til laboratoriet i maksimalt 2 timer etter blodprøvetaking).

Hvis resultatet av studien er positivt, bør du straks kontakte en smittsom sykdom lege. Spesialisten vil foreta en ekstra undersøkelse og foreskrive riktig behandling.

Tror du at det er umulig å kurere hepatitt C?

I dag er moderne medisiner av den nye generasjonen Sofosbuvir og Daclatasvir sannsynlig å helbrede hepatitt C for 97-100%. Du kan få de nyeste medisinene i Russland fra den offisielle representanten for den indiske farmasøytiske giganten Zydus Heptiza. Bestilte stoffer vil bli levert med bud innen 4 dager, betaling ved mottak. Få en gratis konsultasjon om bruk av moderne rusmidler, samt lære om hvordan man skal anskaffe, kan du på den offisielle nettsiden til leverandøren Zydus i Russland.

Kvalitativ analyse for hepatitt C

Legg igjen en kommentar 7,180

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold studeres strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden forsømmet tilstand av leveren vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres også etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Tilordnet for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av kausjonsmiddelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller den milde formen, utføres PCR ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Ved donering av blod til hepatitt undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). Studier av PCR bidrar til å finne patogenmaterialet i strukturen av RNA og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

påvisning av tegn på betennelse i leveren;
screening studier for forebygging;
undersøkelse av personer i kontakt
diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
levercirrhose;
for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.

Studier av PCR foreskrives av en lege for å bestemme effektiviteten av et behandlingsforløp for hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA til virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt nivå av konsentrasjon av det forårsakende middelet av hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lavt antall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse med polymerasekjedereaksjonsindeksen er tildelt alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å bestå testen for hepatitt B, da i en positiv konklusjon, og for hepatitt D. Også kvalitativt analysert reaksjon skal utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikatoren bør man huske på at analysens følsomhet for diagnostiske systemer er forskjellig, og at RNA hepatitt C fortsatt kan være i blodet, men ikke manifestert i analysen.

Spesielt sensitiv PCR-metode viser ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

mistenkte skjulte former for hepatitt C;
PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
i tilfelle gjenoppretting
å oppdage tidlig infeksjon.

Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekodingen av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, spesielt med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid selvtillit et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene fra den serologiske analysen tilstedeværelsen av antistoffer mot C-viruset, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er bare svært sjeldne tilfeller av falske positiver som finnes i diagnosen. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

Kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR for hepatitt C: negativ, positiv, transkripsjon

Hepatitt C er en viral leversykdom forårsaket av flavivirus HCV (fra det engelske ordet hepatitt C-virus), hvis struktur inneholder et ribonukleinsyremolekyl (RNA). RNA bærer virusets genetiske kode. Dens tilstedeværelse tillater analyse av PCR for hepatitt C.

Faren for HCV for en person ligger i det faktum at det såkalte serologiske vinduet (tiden mellom infeksjon og utseendet av en reaksjon fra immunsystemet) kan være ganske lang - fra flere uker til seks måneder.

Det registrerer ikke infeksjon og starter behandling i tide.

Avhengig av organismens individuelle egenskaper kan bæreren av HCV manifestere seg i en akutt form, så vel som oppstå som en kronisk sykdom som vil kreve en lang og kostbar behandling. Når antistoffer mot HCV oppdages, utføres en rekke laboratorietester, inkludert PCR for hepatitt C. Denne testen er utført for alle personer i hvis blodantistoffer mot HCV er funnet.

Hva er PCR-analyse?

Laboratorieanalyse av PCR for hepatitt C - studiet av biologisk materiale for å oppdage nærvær av flavavirus.

Polymerasekjedereaksjonen (som forkortelsen står for) viser den kvantitative verdien av kroppens virale lesjon, dets kvalitative egenskaper, samt genotypen av viruset som inneholder RNA.

På grunnlag av dem, samt på grunnlag av ytterligere analyser, bestemmes metoden og varigheten av behandlingen, samt den epidemiologiske faktoren (grad av risiko for overføring til en annen bærer).

Hva er Hepatitt C RNA-analyse?

Hepatitt C-PCR kalles også RNA-analyse (HCV RNA), fordi Flavaviruset inneholder en RNA-partikkel med en virionsstørrelse på 30-60 nm. En av egenskapene til denne mikroorganismen er en høy tilbøyelighet til mutasjoner.

Hver av virusens underarter (genotyper) har en annen motstand, noe som medfører forskjellige behandlingsmetoder og arten av den videre prognosen for pasienten.

Biologisk materiale (venøst blod) er gitt på tom mage og er som regel undersøkt med realtids-PCR-metoden (svært sensitiv sanntidsdiagnostikk med en lavere deteksjonsgrense på 15 IE / ml ved bruk av lukkede automatiserte systemer).

Det finnes andre tester, for eksempel COBAS AMPLICOR med en følsomhet på 50-100 IE / ml. For enhver laboratorietest er terskelen for følsomhet viktig, dvs. Reagens evne til å oppdage minimal konsentrasjon av virus i biologisk materiale.

Typer av analyse for hepatitt C ved PCR

Hepatitt C PCR inneholder tre viktige komponenter:

kvalitativ analyse;
kvantitativ analyse;
genotyping.

Disse tester tillater deg å bestemme arten av viremia, samt patogenens genetiske egenskaper. Avhengig av diagnostikkens følsomhet utføres studien en gang, og noen ganger utføres en andre test med et mer sensitivt reagens for å bekrefte eller finjustere resultatene.

Høykvalitets PCR av hepatitt C

Hepatitt C PCR-analyse kvalitativ er et annet vanlig navn for analysen av polymerasekjedereaksjonen. Standard følsomhet av testen, som gjør det mulig å oppdage tilstedeværelsen av virale lesjoner, ligger i området 10-500 IE / ml.

En negativ PCR-analyse for hepatitt C viser at viruskonsentrasjonen i pasientens blod er under følsomhetstrømen til diagnosesystemet.

Hvis høyverdig PCR ga svaret "ikke oppdaget", så for etterfølgende behandling er det viktig å finne ut av terskelen for følsomheten til reagenset.

Proteinfraksjoner til flavavirus fremkommer mye senere.

Hepatitt C Kvantitativ PCR

PCR hepatitt C kvantitativ er en indikator på virusbelastning, som reflekterer nivået av RNA-konsentrasjon av flavavirus i kroppen. Dette er en indikator som viser hvor mange fragmenter av virus RNA som finnes i kubikkcentimeter av blod. Resultatene av PCR av hepatitt C RNA i en kvantitativ test i det konvensjonelle systemet er indikert i internasjonale enheter per milliliter (IE / ml) og kan registreres på forskjellige måter, for eksempel 1,7 millioner eller 1,700,000 IE / ml.

Kvantitativ PCR-diagnostikk av hepatitt C er foreskrevet for pasienter før behandling med antiviralbehandling, og i uke 12 i behandling, for å evaluere resultatene av den valgte metoden for behandling av HCV. Viral belastning gjør det mulig å bestemme tre viktige indikatorer for sykdommen:

smittsomhet, dvs. graden av risiko for virusoverføring fra en bærer til en annen (jo høyere konsentrasjonen av flavavirus-RNA, desto større er sannsynligheten for å infisere en annen person, for eksempel gjennom seksuell kontakt);
metode og effektivitet av behandlingen;
Varighet og prognose for antiviral terapi (jo høyere viral belastning, jo lenger behandling varer).

Kvantitativ PCR-diagnostikk av hepatitt C er avhengig av type laboratorietest og terskelen for følsomheten. Den nedre grensen til normen anses å være indikatoren opptil 600.000 IE / ml, gjennomsnittsverdien er innenfor 600.000-700.000 IE / ml. Resultater på 800.000 IE / ml og over anses høye nivåer av RNA-holdig virus.

genotyping

På grunn av den høye mutasjonsaktiviteten til HCV i naturen, er det viktig å identifisere hvilken virusgenotype som er i pasientens blod ved testing. Totalt har 11 genotyper av hepatitt C-viruset blitt registrert på planeten, som inkluderer mange underarter (undertyper). På territoriet i Russland distribuert 1,2 og 3.

Hepatitt C PCR RNA sammen med genotyping er en svært viktig del av analysen siden gjør det mulig for legen å bestemme motstanden (motstanden) av viruset, velg de aktuelle legemidlene og foreskrive et behandlingsforløp.

Genotyping lar deg også indirekte bestemme tilstanden i leveren. For eksempel er 3 genotypen av HCV ofte ledsaget av steatosis, hvor fett akkumuleres i organets celler.

En blodprøve for PCR for hepatitt C bør produsere en figur som bestemmer genotypen. Laboratorie svar kan si "ikke skrevet" - og det betyr at et virus er i humant blod som ikke oppdages av testsystemet. Dette kan tyde på at genotypen ikke er typisk for et gitt geografisk område. I dette tilfellet bør du gjenta analysen med en høyere følsomhet for diagnosesystemet.

Dekoding av PCR-analyse for hepatitt C

Testen for hepatitt C PCR kvantitativ dekryptering kan baseres på dataene ovenfor. Når man får resultater fra laboratorietester, skrives vanligvis følgende data:

"Found" / "not found" (høy kvalitet PCR for hepatitt C);
antall RNA-holdige fraksjoner, for eksempel 831,680 ME / ml (kvantitativ PCR-analyse);
figuren som bestemmer genotypen for HCV, for eksempel - 1, 2, 3, 4;
Navnet på testen er oftest sanntid.

Det viktigste ved å dekode analysen av PCR for hepatitt C er andre leddet, som viser virusbelastningen, som bestemmer prognosen, metoden og varigheten av behandlingen.

Hvis PCR-testen for hepatitt C er negativ, og ELISA er positiv - hva betyr dette?

For å dekode laboratorietester, er det viktig å kontakte en hepatolog eller en smittsom sykdomsspesialist som vil forklare informasjonen som er oppnådd i henhold til type diagnostisk system og dens følsomhetsgrense. I medisinsk praksis er det mange data om blodprøver som kan villede en person uten medisinsk utdanning.

For eksempel, hvis testen for hepatitt C-PCR er negativ, og ELISA er positiv, kan det bety at det ikke er noen HCV i pasientens blod for øyeblikket, men tidligere har han hatt en akutt form for hepatitt C. Det antas at en positiv enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) viser at Det er antistoffer i blodet som er produsert etter invasjonen av viruset tidligere. Men i moderne medisinsk praksis anses ELISA-analyse å være utilstrekkelig pålitelig og gir ofte ujevne resultater, slik at leger bruker det som en primær screening. Ved diagnostisering av en sykdom styres spesialister nettopp ved PCR-test.

Nyttig video

Følgende video gir en svært detaljert og interessant beskrivelse av essensen av PCR-metoden, hvordan analysen utføres:

konklusjon

For analyse av PCR for hepatitt C, er vanligvis venøs blod tatt. Ofte er det et dobbelt inntak av biologisk materiale - for ELISA, og direkte for PCR-test. For riktige testresultater kreves det i samsvar med grunnleggende regler for laboratorieprøvetaking av biologisk materiale:

Blod for analyse er gitt i første halvdel av dagen på tom mage;
mellom måltid og blodprøver bør ta minst 8 timer;
alkohol og stekt mat bør også utelukkes før testen utføres;
i løpet av dagen før du donerer blod, er det nødvendig å unngå høy fysisk anstrengelse.

Blodtestresultater er vanligvis klare neste dag.

Hepatitt-PCR-analyse

PCR for hepatitt C

Hepatitt C-RNA ("PCR-kvalitativ") - deteksjon i blodprøven er bevis på akutt eller kronisk hepatitt C. Det bestemmes fra 2. uke med infeksjon, vises før anti-HCV, som gjør det mulig å diagnostisere sykdommen i de tidlige stadier. RNA er bestemt hos pasienter med akutte hepatittklinikker og hos de med positive hepatittresultater.
Hepatitt C RNA ("PCR-kvantitativ") - viral belastning er en av indikatorene for effektiviteten av antiviral terapi og dens vurdering (ved endring i nivå fra den opprinnelige verdien). Den kvantitative karakteriseringen av hepatitt C RNA-innholdet er viktig for å vurdere effekten av antiviral terapi og har prognostisk betydning for å bestemme kronisk virkning. Pasienter med høy viral belastning (høy mengde RNA) før behandling svarer mindre godt til behandling.
Hepatitt C RNA (genotypene 1, 2, 3) - typen behandlingstaktikk og effektiviteten avhenger av typen. Sykdommen forårsaket av genotype 1-viruset er den mest ugunstige i forhold til prediksjonen av effektiviteten av terapien. I henhold til gjeldende anbefalinger, bør en blodprøve for oss å genotype hepatitt C utføres til pasienter før starten av antiviral terapi.
Hepatitt C RNA (utvidet genotyping 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a subtyper sirkulerer i Russland. Hepatitt C, forårsaket av genotype 1 og 4-virusene, er den mest ugunstige for prognosen.
Ultrasensitiv Hepatitt C PCR (kvalitativ metode) - Analysen brukes til å diagnostisere sykdommen i de tidlige stadiene av infeksjon, den er optimal for testing av blodgivere og evaluering av responsen på antiviral behandling. Denne studien anbefales, selv uten deteksjon av antistoffer mot hepatitt C-viruset, for pasienter med leversykdom av uspesifisert årsak, tilegnet immunfeil eller mottatt immunosuppressiv terapi.
Ultra-sensitiv hepatitt C-PCR (kvantitativ metode) er en unik høy følsomhetsanalyse (10 IE / ml) for å bestemme hepatitt C-virus-RNA i kvantitative termer. Studien brukes til å overvåke effekten av behandlingen.

PCR for hepatitt B

Hepatitt B-DNA (kvalitativ analyse) er en indikator på multiplikasjonen av hepatitt B-viruset. Det opptrer først i blodet i gjennomsnitt 1 måned etter infeksjon. I noen tilfeller er den eneste markøren for latent HBV-infeksjon. Ved å bestemme DNA av et virus kan man diagnostisere hepatitt B forårsaket av mutantstammer, noe som ikke avslører andre markører for infeksjon.
Hepatitt B DNA (kvantitativ analyse) - DNA-konsentrasjon (virusbelastning) er en av testene for å bestemme stadiet av kronisk hepatitt B og kriteriet for effektiviteten av antiviral terapi. Analysen utføres før og under behandlingsprosessen.
Genotyping av hepatitt B - sykdommer forårsaket av forskjellige genotyper av viruset kan variere i klinisk kurs og utfall. Hepatitt B, forårsaket av et genotype C-virus, er mer sannsynlig å ta et kronisk kurs, og har stor risiko for transformasjon i levercirrhose eller hepatocellulært karcinom. Pasienter som er smittet med genotype A-viruset, reagerer bedre på behandlingen.
Ultrasensitiv DNA-PCR for hepatitt B (kvalitativ metode) - de blir sendt for tidlig påvisning av sykdommen. Meget informativ i studien av blodgivere. Det kan brukes til å bekrefte spontan eller behandling-indusert eliminering av viruset fra menneskekroppen.
Ultrafølsom PCR for hepatitt C (kvantitativ metode) - diagnostisering av hepatitt B-virus DNA i kvantitative termer. Analysen er tatt for å vurdere effektiviteten av behandlingen.
Bestemmelse av mutasjoner av resistens mot antivirale legemidler lamivudin, telbivudin, entecavir, adefovir, tenofovir (overlevert sammen med analysen av "DNA av hepatitt B kvantitativ"). Det er nødvendig å overlevere analysen til pasienter med kronisk hepatitt B før du starter antiviral behandling og mens du tar medisiner. Resultatet inneholder informasjon om tilstedeværelse av resistens av hepatitt B-viruset mot antivirale legemidler:
- R - virusbestandig mot antiviralt stoff (mutasjoner av resistens mot dette stoffet er funnet);
- S - hepatitt B-virus er følsomt for stoffet (normal verdi, resistansmutasjoner blir ikke detektert);
- Jeg - den forårsakende smitteagenten kan utvikle motstand mot dette stoffet.

PCR-analyse for hepatitt med transkripsjon

Det registrerer ikke infeksjon og starter behandling i tide.

Hva er PCR-analyse?

Laboratorieanalyse av PCR for hepatitt C - studiet av biologisk materiale for å oppdage nærvær av flavavirus.

Polymerasekjedereaksjonen (som forkortelsen står for) viser den kvantitative verdien av kroppens virale lesjon, dets kvalitative egenskaper, samt genotypen av viruset som inneholder RNA.

Hva er Hepatitt C RNA-analyse?

Hver av virusens underarter (genotyper) har en annen motstand, noe som medfører forskjellige behandlingsmetoder og arten av den videre prognosen for pasienten.

Referanseverdien av testen (normale verdier) er "ikke funnet".

Typer av analyse for hepatitt C ved PCR

Hepatitt C PCR inneholder tre viktige komponenter:

kvalitativ analyse; kvantitativ analyse; genotyping.

Høykvalitets PCR av hepatitt C

En negativ PCR-analyse for hepatitt C viser at viruskonsentrasjonen i pasientens blod er under følsomhetstrømen til diagnosesystemet.

Hvis høyverdig PCR ga svaret "ikke oppdaget", så for etterfølgende behandling er det viktig å finne ut av terskelen for følsomheten til reagenset.

En positiv respons på PCR-testen for hepatitt C kan gis så tidlig som 4-5 dager etter HCV-infeksjon.

Proteinfraksjoner til flavavirus fremkommer mye senere.

Hepatitt C Kvantitativ PCR

smittsomhet, dvs. graden av risiko for virusoverføring fra en bærer til en annen (jo høyere konsentrasjonen av flavavirus-RNA, desto større er sannsynligheten for å infisere en annen person, for eksempel gjennom seksuell kontakt); metode og effektivitet av behandlingen; Varighet og prognose for antiviral terapi (jo høyere viral belastning, jo lenger behandling varer).

Viktig: Det er ikke noe direkte forhold mellom nivået av HCV RNA i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen. Pasienten kan ha en svært høy viral belastning, men dette betyr ikke at det er alvorlig skade på leverceller.

genotyping

Ulike HCV-genotyper reagerer annerledes enn antiviral terapi. For eksempel krever 1 genotype opptil 48 ukers behandling, og effektiviteten er i gjennomsnitt 60%, mens 2 og 3 genotyper behandles dobbelt så fort med en effektivitet på opptil 85%.

Genotyping lar deg også indirekte bestemme tilstanden i leveren. For eksempel er 3 genotypen av HCV ofte ledsaget av steatosis, hvor fett akkumuleres i organets celler.

Dekoding av PCR-analyse for hepatitt C

Testen for hepatitt C PCR kvantitativ dekryptering kan baseres på dataene ovenfor. Når man får resultater fra laboratorietester, skrives vanligvis følgende data:

"Found" / "not found" (høy kvalitet PCR for hepatitt C); antall RNA-holdige fraksjoner, for eksempel 831,680 ME / ml (kvantitativ PCR-analyse); figuren som bestemmer genotypen for HCV, for eksempel - 1, 2, 3, 4; Navnet på testen er oftest sanntid.

Det viktigste ved å dekode analysen av PCR for hepatitt C er andre leddet, som viser virusbelastningen, som bestemmer prognosen, metoden og varigheten av behandlingen.

Viktig: Som et resultat av testen kan et latinsk brev, for eksempel 1a, som betyr en undertype av viruset, vises ved siden av figuren som viser genotypen. For legen, spiller det ingen rolle: bare genotypen er tatt for å velge behandlingsmetode.

Hvis PCR-testen for hepatitt C er negativ, og ELISA er positiv - hva betyr dette?

Nyttig video

Følgende video gir en svært detaljert og interessant beskrivelse av essensen av PCR-metoden, hvordan analysen utføres:

konklusjon

Blod for analyse er gitt i første halvdel av dagen på tom mage; mellom måltid og blodprøver bør ta minst 8 timer; alkohol og stekt mat bør også utelukkes før testen utføres; i løpet av dagen før du donerer blod, er det nødvendig å unngå høy fysisk anstrengelse.

Blodtestresultater er vanligvis klare neste dag.

En spesiell laboratorieundersøkelse - analysen av PCR for hepatitt C - forenkler i stor grad diagnosen av denne virussykdommen. Hepatitt C er ikke et unntak. En liten blodprøve kan testes for innholdet av rna og annet genetisk materiale av viruset. Alle individer med antistoffer mot hepatitt C som sirkulerer i blodplasmaet, blir underkastet analyse med PCR, hvis tilstedeværelse bekreftet den kvalitative deteksjonen.

Fortolkningen av resultatene tolkes i kolonnen i forskningsformen som en "positiv" eller "negativ" analyse. I tillegg er det mulig å ikke bare bestemme minimumsvirusinnholdet, men også å telle antall partikler. Det er således mulig å bestemme estimert viral belastning og bestemme medisinsk behandling taktikk så nøyaktig som mulig.

Viral leverskade

Lever som et element i fordøyelseskanalen tar stor byrde. I sine celler forekommer de fleste metabolske reaksjoner av alle typer metabolisme, som sikrer optimal funksjon av alle organer og systemer. Samtidig er dens avgiftningsverdi flott for fjerning av slagg og metabolske produkter med enzymatisk galle.

Tapet av leveren av virus av forskjellig natur er ekstremt farlig for kroppen. Et mangfoldig klinisk bilde og manglende overholdelse av behandling fører hepatitt til det første når det gjelder helserisiko. Hepatitt C er kronisk og kan være negativ i lang tid, sakte parasitere i menneskekroppen. Viruset overføres gjennom biologiske væsker: blod og sjeldnere gjennom sæd. Narkotikamisbruk av ikke-sterile sprøyter, naturlig levering av smittede kvinner, utilsiktede skader eller kutt av helsepersonell kan føre til overføring av viruset til friske mennesker.

Tidlig diagnose av sykdommen er hemmet av det skjulte kliniske bildet og den usystematiske patologien. Et positivt resultat kan ganske enkelt gå glipp av dårlige analyser. Bare en betydelig skade på leverenceller forårsaker en viss symptomatologi, men den negative effekten av viremia gir da ingen sjanse til å gjenopprette orgelet.

Moderne medisin har utviklet spesielle metoder for å gjenkjenne de minste sporene av viruset. PCR, IFA, leverbiopsi kan oppdage den minste skade på leveren og minimumsnivået av antistoffer mot viruset. Analysen ved hjelp av PCR er den enkleste og mest pålitelige i diagnostisk praksis.

Kvalitativ analyse

Essensen av polymerasereaksjonen er genereringen av en sekvens av rna. Reaksjonen utføres i nærvær av de samme virale proteiner i blodplasmaet.

Spesielle katalysatorer lar deg syntetisere en lignende viral sekvens av kjeden, som sammenlignes med de kjente nukleotidene av viralt RNA. Basert på dette, bestemmer de viral belastning og leverskade.

En PCR-studie avslører mer informasjon enn den enkle deteksjonen av et rna-virus. Det overgår i følsomhet når standardmetoder for eph og annen viral isolasjon flere ganger.

PCR er i stand til å fange selv en eneste tilstedeværelse av det ønskede gen i det tatt blod. En slik diagnostisk kjedereaksjon er også meget spesifikk. Sekvensen av nukleotidkjeder er unik for hver skapning, slik at enzymatiske primere oppretter identiske sekvenser av ønsket genetisk informasjon. Dermed kan noe virus oppdages med den minste nøyaktighet, selv om den kvantitative indikatoren er ekstremt liten.

Pasienter i hvis blod ble funnet antistoffer produsert mot viral hepatitt, gjennomføre en kvalitativ studie av PCR eller Eph. Resultatet av analysen kan være både positivt og negativt, som i begge tilfeller krever behandling.

Den positive responsen til kjedereaksjonen skal deklareres som tilstedeværelsen av RNA-fragmenter av hepatittviruset eller som fenomenet infeksjon.

I blodplasmaet for øyeblikket virker viruset aktivt og parasitter over leveren celler. PCR-diagnostikk kan gi et negativt svar hvis det er få partikler av viralt RNA tilstede i plasma, under følsomhetsnivået av testen, eller slet ikke. Etter direkte infeksjon, blir virusmengden relativt langsomt, og først etter 1-2 uker, om eller annen kvalitativ forskning er i stand til å isolere dem.

Negativ analyse kan fås i følgende tilfeller:

Når du tar materiale i ujevne forhold, får du en blodprøve med forurensning; Når en pasient tidligere har fått heparin injeksjoner. Med tilstedeværelsen av andre enzymer og substrater i prøvene tatt som forstyrrer løpet av kjedereaksjonen.

Kvantitativ analyse

Kvantitativ test som en mikrobiologisk diagnose er utformet for å bestemme virusbelastningen. En bekreftet kvalitativ analyse for viremia tjener som grunnlag for å bestemme mengden av genetisk materiale og dets konsentrasjon. Antallet detektert viral rna bestemmes i en enhet av blodvolum, vanligvis i 1 milliliter. De nødvendige materialene er uttrykt i internasjonale enheter, enkelte laboratorier bruker antall kopier i analysen av eif.

Vanligvis, før noen terapeutisk behandling, analyseres PCR kvantitativt. Telling av viral rna utføres ganske ofte: etter en, fire, tolv og tjuefire uker. 12. uke betraktes som veiledende, siden analysen i løpet av denne perioden utføres tolkning av effektiviteten av terapeutiske tiltak.

Enhver forskning krever ikke en grundig forberedende fase av pasientene. Det eneste som er forbudt før du tar blod, er røyking.

Kvantitativ analyse ved bruk av PCR eller IFA involverer å ta prøver fra en ven.

Tolkning av resultater som høy viral belastning starter fra en figur på 800.000 IE / ml. Et slikt positivt resultat for hepatitt C reflekterer tilstedeværelsen av minst 3.000.000 eksemplarer per milliliter blod. Det lave nivået av viremi stopper ved 400.000 IE / ml. Resultatene av studien kan være verdier som et negativt svar, samt indikatoren "under måleområdet."

En kvantitativ test med et estimat av "under måleområdet" sier at under reaksjonen var det ikke mulig å beregne RNA. Viruset er fortsatt sirkulerende i kroppen, som indikert ved en positiv kvalitativ test. En negativ indikator for kvantitativ analyse av PCR eller ifa indikerer fraværet av rna i denne blodprøven.

Viral belastning gjør det mulig å dechifisere graden av infeksiøsitet i patologien og pasientens fare for andre. Et høyt nivå av viral rna identifisert under PCR eller Eph indikerer en risiko for at pasienten er "smittsom".

Til tross for begrensede metoder for overføring av viruset gjennom blodet øker risikoen for overføring av viruset gjennom sekretene fra kjønnskjertlene fra mor til barn.

Kvantitativ analyse gir betydelig hjelp til evaluering av terapeutiske inngrep. Ifa og PCR reflekterer virkningen av antivirale legemidler, bidrar til å etablere tidspunktet for behandling og vurderer dannelsen av pasientens immunitet. Den tidlige negative responsen av laboratorietester indikerer vellykket behandling og behovet for å redusere varigheten av behandlingen. Langsom nedgang i viremia kan tolkes som behovet for å modifisere terapeutisk kurs. Nivået på viral belastning bestemmer prognosen for sykdommen. Hepatitt med lav hastighet er sannsynligvis ganske enkelt behandlet og viruset kan fjernes helt fra kroppen. Høye nivåer av viral tilstedeværelse i blodet krever forsiktig oppmerksomhet og allsidig behandling.

Hepatitt C er en inflammatorisk patologi der leverceller påvirkes. Sykdommen utvikler seg som følge av penetrering av hepatitt C-viruset (HVC) i menneskekroppen.

Formen av sykdommen kan være akutt eller kronisk.

I dag, ved hjelp av moderne diagnostiske teknikker, kan denne patologien identifiseres i begynnelsen av utviklingen, noe som øker sjansene for en fullstendig kur av sykdommen.

Følgende grupper av mennesker er pålagt å teste for hepatitt C:

kvinner i perioden med å bære et barn; personer med tegn på hepatitt; medisinsk personale; potensielt organ og blodgivere; narkomaner, HIV-smittede personer, promiskuøse intime liv.

Liste over nødvendige studier

Hvilke tester skal jeg ta for hepatitt C? For å nøyaktig diagnostisere sykdommen, identifisere årsakene og bestemme tilstanden til leveren parenchyma, er følgende studier påkrevd:

generell urin og blodprøver; biokjemisk analyse av blod; PCR analyse; blodprøve for påvisning av antistoffer mot HVC; en blodprøve for eksisterende antistoffer mot sine egne leverceller; leverbiopsi.

Dekoding av blodprøver for hepatitt C utføres av en spesialist. Vurder hver metode for forskning mer detaljert, så vel som vi vil forstå hvilken analyse av hepatitt C som er mest nøyaktig.

Generell analyse

redusert konsentrasjon av hemoglobin, blodplater og leukocytter; øker innholdet av lymfocytter; blodpropp er brutt erytrocytt sedimenteringshastighet (ESR) øker.

Generell analyse av urin gjør det mulig å oppdage urobelin i dets sammensetning - et gallepigment som oppstår i urinen som følge av nedsatt leverfunksjon.

Biokjemisk analyse

Biokjemisk analyse av blod i hepatitt C gjør det mulig å identifisere slike lidelser som:

forhøyede nivåer av leverenzymer (alanintransaminase - ALT og aspartataminotransferase - AST), som kommer inn i blodet når hepatocytter er skadet. I en normal tilstand bør disse indikatorene for menn ikke være over 37 IE / l, for kvinner - ikke høyere enn 31 IE / l. En økt konsentrasjon av ALT og AST i asymptomatisk hepatitt C er ofte det eneste symptomet på denne sykdommen. I tillegg øker blodglutamyltranspeptidase alkalisk fosfatase (normalt ikke høyere enn 150 IE / l). Bilirubininnholdet (både generelt og direkte) i blodet overskrides. Hvis nivået av gul pigment i serum overskrider 27-34 μmol / l, oppstår gulsott (opptil 80 μmol / l i mild form, 86-169 μmol / l - i moderat, over 170 μmol / l - i alvorlig form). Nivået på albumin er senket, konsentrasjonen av gamma globuliner, tvert imot, økes. Gamma globuliner består av immunglobuliner - antistoffer som beskytter kroppen mot sykdomsfremkallende stoffer. økt konsentrasjon av triglyserider i blodet.

PCR-test

I løpet av den kvalitative analysen av PCR for hepatitt C, er det mulig å oppdage et eksisterende virus i menneskekroppen.

Denne diagnostiske prosedyren utføres hvis anti-HVC detekteres i blodet.

Dekryptering av analysen for hepatitt C inneholder informasjon om at en infeksjon enten har blitt detektert eller ikke oppdaget i kroppen. Normalt finnes det ingen patologiske stoffer i blodet.

Hvis hepatitt C-testen er positiv, betyr det at patogenet kontinuerlig deler og infiserer leverceller.

Resultatene av denne analysen kan være upålitelige, det er mulig i følgende tilfeller:

forurenset biomaterial brukt i nærvær av heparin i blodet; i nærvær av kjemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) i det studerte biomaterialet, som påvirker elementene i PCR.

Analyse av hepatitt C ved PCR regnes som den mest nøyaktige og har flere fordeler over andre forskningsalternativer, nemlig:

direkte diagnose av sykdomsfremkallende middel. Ved utførelse av tradisjonelle studier bestemmes det av tilstedeværelsen av proteinmarkører som er avfallsprodukter av patogener. Dette indikerer bare at infeksjonen er tilstede i blodet. Ved testing for hepatitt C ved PCR, er det mulig å bestemme typen patogen av farlig patologi. spesifisitet av teknikken. Under denne prosedyren bestemmes et unikt DNA-område i biomaterialet som tilsvarer bare en type patogen. Dette minimerer sannsynligheten for falske resultater. høy følsomhet. Når du utfører PCR-analyse, kan du oppdage minimumsmengden av virus. Dette er viktig hvis betingede patogene stoffer identifiseres som bare utgjør en trussel hvis nivået øker. Ved bruk av denne teknikken i en prøve av biomaterialet, kan flere patogener detekteres samtidig. kan oppdage skjulte infeksjoner. I tillegg tillater analysen deg å diagnostisere patogene mikroorganismer som lever i celler og har høy antigenvariabilitet.

Hvis testresultatene er positive, blir spor av viruset funnet i biomaterialet, da nettverket har en infeksjon i kroppen.

En negativ PCR-analyse for hepatitt C betyr at det ikke er spor av infeksjon i biomaterialet.

Immunologisk studie

Denne metoden lar deg identifisere antistoffer mot alle typer hepatittvirus, samt antistoffer mot leverenes celler i din egen kropp, og utseendet bidrar til utviklingen av autoimmun hepatitt.

Resultatene som ble oppnådd i løpet av studien er relevante i 3 måneder, da skal du donere blod til hepatitt C.

Leverbiopsi

I dag brukes tester som erstatter histologisk analyse av hepatisk parenkyma.

For å vurdere stadiet av leverskade og intensiteten av betennelsesprosessen, brukes spesifikke venøse blodbiomarkører. Ved hjelp av FibroTest kan du vurdere graden av vekst av fibrøst vev.

Forberedelse for studien

Hvilke tester blir tatt for hepatitt C og hvordan vi har funnet ut denne typen forskning. Det er like viktig å vite hvordan å forberede seg på analysen.

For å oppnå pålitelige resultater, anbefales det å overholde følgende krav:

Hepatitt C-tester må tas om morgenen, på tom mage. Siste gang mat skal forbrukes minst 8 timer før studien. Biomaterialet kan samles om dagen eller om kvelden. I dette tilfellet er det viktig at minst 5-6 timer passerer mellom det siste måltidet og analysen. Før du donerer blod for hepatitt C, bør te, kaffe, juice eller andre drikker kasseres, bare vann er tillatt. 48 timer før studien er det nødvendig å utelukke bruk av fettstoffer, stekt mat og alkoholholdige drikker. i minst en time før analysen må du avstå fra å røyke. Analyse bør ikke utføres umiddelbart etter ultralyd, instrumental, røntgenundersøkelse, massasje eller fysioterapi. en dag før gjennomføringen av studien er det nødvendig å utelukke bruk av medisinering og intensiv fysisk aktivitet. Emosjonell stress er også kontraindisert. Det anbefales å bruke 15 minutter før du utfører studien i en rolig tilstand.

Gjennomføring av blodoppsamlingsprosedyren

Hvor blir testet for hepatitt C? Samlingen av biomateriale for videre forskning utføres i laboratoriet til en medisinsk institusjon eller hos pasientens hjem.

Blod fra en blodåre tas som følger:

Ved hjelp av en spesiell tourniquet innpakket rundt pasientens underarm, blir den venøse blodstrømmen stoppet. Takket være slike manipulasjoner blir blodårene fylt med blod og vil bli mer synlige, noe som i stor grad vil lette prosessen med å sette inn nålen. området av huden hvor nålen skal settes inn, behandles forsiktig med alkohol eller alkoholholdig væske. En nål forsynes forsiktig inn i en blodåre, så er et testrør festet til det, spesielt utviklet for å samle blod. Umiddelbart etter at nålen er satt inn i venen, blir klemmen fjernet fra pasientens arm. Etter at blodvolumet som er nødvendig for analysen er blitt samlet, blir nålen forsiktig fjernet fra venen. en steril bomullspinne eller gasbind med fuktighet må påføres injeksjonsstedet. For å forhindre forekomst av et hematom, bør tampongen presses med en viss innsats mot nålinnsatsområdet, bøy armen ved albueforbindelsen og hold den i denne posisjonen i flere minutter. Slike handlinger vil også bidra til å stoppe blodet raskere.

Forutsatt at teknikken for intern administrasjon er god, er denne prosedyren helt trygg og forårsaker ikke smertefulle opplevelser.

Datoer og priser

Hvor mye koster en hepatitt C-test? Avhengig av klinikken og kompleksiteten av studien, kan prisen på prosedyren variere fra 400 til 11 000 rubler.

Hvis resultatet av studien er positivt, bør du straks kontakte en smittsom sykdom lege. Spesialisten vil foreta en ekstra undersøkelse og foreskrive riktig behandling.

Tror du at det er umulig å kurere hepatitt C?

Forrige Artikkel

Drug Laennec - anmeldelser

Neste Artikkel

GRA i blodtall

Relaterte Artikler Hepatitt

Behandling